TRAP结合液体闪烁计数法半定量检测端粒酶活性

本文介绍一种端粒酶检测方法，该方法是将 Ｔ Ｒ Ａ Ｐ法在 Ｐ Ｃ Ｒ 过程中引入３ Ｈｄ Ｃ Ｔ Ｐ，结合液闪计数ｃｐｍ 半定量分析端粒酶活性。应用该方法检测端粒酶阳性的 Ｃ Ｎ Ｅ２ 细胞和部分组织标本及 Ｒ Ｎａｓｅ Ａ 或加热预处理后的对照标本，并与 Ｔ Ｒ Ａ Ｐ 法相比较，结果显示 Ｃ Ｎ Ｅ２ 细胞端粒酶阳性，１０ 个 Ｃ Ｎ Ｅ２ 细胞中仍可检到端粒酶，组织样品的端粒酶与文献值基本一致；放射性活性计数（ｃｐｍ） 与 Ｃ Ｎ Ｅ２ 细胞抽提液中端粒酶活性具有良好的线性关系；用 Ｒ Ｎａｓｅ Ａ 或加热处理后标本为阴性，ｃｐｍ 值接近阴性对照；批内和批间变异度分别为１１ ．６８ ％ 和２０９９ ％ 。该方法不需使用聚丙烯酰胺凝胶电泳（ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ） 和放射自显影，简便快速，当天可观察结果，并具有灵敏度高、特异性和批内重复性好之特点。