芍药苷通过调控巨噬细胞活性抗幽门螺杆菌作用及其机制研究

背景幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)容易造成胃炎、胃溃疡等胃部疾病,目前有很多杀灭H.pylori的药物,多以西药为主,不宜长期服用,且易复发.中药灭菌副作用小,但是作用机制并不完全清楚.目的分析芍药苷(paeoniflorin,PF)通过调控巨噬细胞活性抗H.pylori作用及相关机制.方法选取昆明小鼠6只,新西兰家兔4只,制备含PF血清,提取小鼠腹腔巨噬细胞,含药血清作用于小鼠腹腔巨噬细胞,实验组加入5%含药血清,对照组加入无药血清,各组同时在加入H.pylori 11637,含药血清在作用6 h后收集细胞.ELISA法检测各组小鼠巨噬细胞的单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量,Western-Blot检测热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、Toll样受体2(toll-like receptor-2,TLR2)及Toll样受体4(toll-like receptor-4,TLR4)蛋白表达,荧光定量多聚合酶链式反应检测小鼠巨噬细胞HSP70 mRNA、TLR2 mRNA及TLR4 mRNA相对表达.结果对照组小鼠MCP-1、IL-1β及TNF-α含量较空白组升高,实验组小鼠MCP-1、IL-1β及TNF-α含量较对照组降低,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组巨噬细胞iNOS、TLR4及TLR2蛋白表达较空白组升高;实验组巨噬细胞iNOS、TLR4及TLR2蛋白表达较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05);对照组小鼠巨噬细胞TLR4、TLR2 mRNA相对表达量较空白组升高,实验组小鼠巨噬细胞TLR4、TLR2 mRNA相对表达量较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05);对照组小鼠巨噬细胞HSP70 mRNA及蛋白表达较空白组升高,实验组小鼠巨噬细胞HSP70 mRNA及蛋白表达较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论芍药苷经过调节巨噬细胞活性起到抗H.pylori感染作用,可抑制巨噬细胞分泌炎症因子与HSP70应激因子,其抗炎作用可能和抑制巨噬细胞TLR2/4信号通路有关.