陕西渭北地区烟草环斑病毒(TRSV)的研究——Ⅰ.病毒的鉴定及其理化特性

自然感染 TRSV 的烟草植株表现矮化,并具有典型的小叶症状。接种结果表明该病毒的寄主范围广泛,可侵染9个科的23种植物,受侵染的植物大多数呈现局部坏死和环斑,某些植物种类到后期还可恢复。病毒的致死温度为65～70℃,稀释限点为10^(-3)～10^(-4),体外保毒期为6～7天。对提纯病毒的研究结果表明:病毒粒子为等轴对称体,直径达26nm,其中有些粒子呈中空状态。病毒制备物经紫外线扫描后可获得典型的核蛋白紫外吸收光谱,其 Amax=260nm,Amin=240nm,A260/280=1.4。病毒降解后所得的核酸和蛋白的紫外吸收最高值分别为260nm 和278nm,而最低值分别为232nm 和250nm。经 PAGE 分析表明外壳蛋白只有一种亚基,其分子量为57000道尔顿;核酸具有2个组分,即 RNA_1和 RNA_2,它们的分子量分别为2.3×10~6和1.4×10~6,其中 RNA_1单独接种无侵染性,RNA_2的侵染性会由于 RNA_1的存在而得到增强。血清学测定表明病株汁液和提纯病毒只与 TRSV 标准抗血清起沉淀反应,而与 CMV、TMV、TNV、TEV 以及 TBRV 抗血清之间没有血清学关系。

陕西渭北地区烟草环斑病毒(TRSV)的研究 Ⅱ、病毒的传播、种苗带毒检测及防治

试验表明桃蚜具有传播 TRSV 的能力,但是传毒率仅为4.2%,蚜虫最短获毒时间在2分钟以内,最短接毒时间也是2分钟,最长持毒时间则为125分钟,因而属于非持久性传毒。烟草种子带毒是传播病毒的主要途径,植株感染 TRSV 的早晚是决定种子带毒率高低的主要因素,但其子代幼苗常表现为无症感染。提纯 TRSV 制备的抗血清具有高度的专化性,只与同源的 TRSV 抗原起沉淀反应,而与 CMV、TMV、TNV、TEV 以及 TBRV 之间不存在血清学关系。抗血清的效价为1:516。利用酶联免疫吸附测定技术(ELISA)对 TRSV 检测获得成功。在受侵染后已恢复的植株中,以 ELISA 作为带毒检测手段比琼脂双扩散法更加灵敏和准确,但对单粒、10、25、50及75粒烟种的带毒检测没有获得肯定的结果,可用 ELISA 检测种苗的带毒情况来确定单粒种子的带毒率。经测定生产上种植的3个烟草品种均有不同程度的带毒。在混合感染的条件下,CMV 和 TMV 对 TRSV 有抑制作用,而 TEV 却对 TRSV 表现出协生现象。