通过形成类胚体诱导人羊水多能干细胞向心肌细胞分化

由人羊水中分离羊水多能性干细胞，通过形成类胚体诱导其向心肌细胞分化。取人羊水标本进行体外培养，分离得到人羊水干细胞，已连续传代培养至42代，采用免疫细胞化学、RT-PCR和流式细胞仪技术对羊水干细胞的生物学特性进行检测。取10-15代羊水干细胞，悬浮培养使其形成类胚体，进而向心肌细胞诱导分化。培养的羊水干细胞呈成纤维样，表达部分胚胎干细胞特异标志基因，悬浮培养可形成类胚体。类胚体碱性磷酸酶（AP）检测呈阳性，表达三胚层特异标志基因fgf5、ζ-globin和α-fetoprotein。羊水干细胞形成类胚体后进行诱导，得到α-actin阳性细胞，表达心肌细胞特异标志基因Tbx5、Nkx2．5、GATA4和α—MHC。试验结果表明，从人羊水标本中可分离得到具有胚胎干细胞特性的细胞，经初步检测确定为羊水干细胞，并能通过形成类胚体诱导其向心肌细胞分化。

诱导多能干细胞(iPS)的诱导培养与鉴定

通过外源转录调控因子的诱导,使成体细胞重编程为胚胎干细胞(ES细胞)样的多能细胞,这种细胞称为诱导多能干细胞(iPS细胞),这一方法被称为iPS技术。目前,iPS技术已先后在小鼠、人、猕猴、大鼠和猪中成功应用,建立了相应的iPS细胞系,并获得了iPS细胞嵌合小鼠和四倍体克隆小鼠。尽管iPS与ES细胞在形态和生长特性上有许多相同之处,但iPS细胞的建立需要较独特的诱导培养体系和鉴定方法。以下结合近年来iPS技术的发展和本实验室的相关研究,对iPS细胞的建立和培养体系的优化进行了深入探讨。