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人天然免疫基因BCL10的猪同源物的识别、克隆与初步表达分析
被引量:
5
1
作者
何建锋
张彦明
+2 位作者
段会娟
曹金锁
张德礼
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期747-754,共8页
采用电子克隆方法克隆到大小为925bp的人天然免疫蛋白BCL10的猪同源基因完整cDNA序列(GenBank登录号:EU088132),并利用RT-PCR方法从猪的全血中扩增出包含702bp的完整开放读码框架(ORF)的cDNA片段。经核酸测序,证明与电子克隆结果相符。...
采用电子克隆方法克隆到大小为925bp的人天然免疫蛋白BCL10的猪同源基因完整cDNA序列(GenBank登录号:EU088132),并利用RT-PCR方法从猪的全血中扩增出包含702bp的完整开放读码框架(ORF)的cDNA片段。经核酸测序,证明与电子克隆结果相符。利用NCBIBLAST分析该cDNA包含3个大小为57bp、289bp和356bp的外显子,并且定位于猪的4号染色体上。采用半定量PCR技术检测基础水平猪各组织BCL10基因mRNA表达丰度,并将该基因构建到带有绿色标签的真核表达载体pEGFP-C1中,采用脂质体转染法将该基因转入PK-15细胞,通过绿色荧光标记和RT-PCR方法检测实验组的BCL10蛋白表达。研究结果表明,BCL10基因mRNA在脾脏中表达最高;胸腺、大脑和淋巴结表达次之,而肝脏只有微量表达,肾脏没有检测到表达;同时BCL10基因在PK-15细胞中得到了有效表达。
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关键词
BCL10基因
克隆
表达分析
真核表达
下载PDF
职称材料
题名
人天然免疫基因BCL10的猪同源物的识别、克隆与初步表达分析
被引量:
5
1
作者
何建锋
张彦明
段会娟
曹金锁
张德礼
机构
西北农林科技大学动物医学院预防兽医学系病毒免疫与生物信息研究室
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期747-754,共8页
基金
西北农林科技大学引进人才基金资助项目(编号:01140406)
国家自然科学基金项目(编号:30270342)资助~~
文摘
采用电子克隆方法克隆到大小为925bp的人天然免疫蛋白BCL10的猪同源基因完整cDNA序列(GenBank登录号:EU088132),并利用RT-PCR方法从猪的全血中扩增出包含702bp的完整开放读码框架(ORF)的cDNA片段。经核酸测序,证明与电子克隆结果相符。利用NCBIBLAST分析该cDNA包含3个大小为57bp、289bp和356bp的外显子,并且定位于猪的4号染色体上。采用半定量PCR技术检测基础水平猪各组织BCL10基因mRNA表达丰度,并将该基因构建到带有绿色标签的真核表达载体pEGFP-C1中,采用脂质体转染法将该基因转入PK-15细胞,通过绿色荧光标记和RT-PCR方法检测实验组的BCL10蛋白表达。研究结果表明,BCL10基因mRNA在脾脏中表达最高;胸腺、大脑和淋巴结表达次之,而肝脏只有微量表达,肾脏没有检测到表达;同时BCL10基因在PK-15细胞中得到了有效表达。
关键词
BCL10基因
克隆
表达分析
真核表达
Keywords
BCL10 gene
cloning
expression analysis
eukaryotic expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人天然免疫基因BCL10的猪同源物的识别、克隆与初步表达分析
何建锋
张彦明
段会娟
曹金锁
张德礼
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2008
5
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