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脂肪间质干细胞修复犬关节软骨损伤的研究
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作者 滕鑫 艾力·艾尔肯 +3 位作者 吕长荣 张欣珂 赵献军 华进联 《动物医学进展》 北大核心 2024年第1期72-76,共5页
以手术方法建立2对共4处犬关节软骨组织损伤;使用无血清细胞培养液为对照,以标记有绿色荧光蛋白的犬脂肪间充质干细胞进行移植治疗试验。病理模型犬进行常规饲养15周后,对病理模型进行取样并系统检测。结果显示,试验组较对照组有更大面... 以手术方法建立2对共4处犬关节软骨组织损伤;使用无血清细胞培养液为对照,以标记有绿色荧光蛋白的犬脂肪间充质干细胞进行移植治疗试验。病理模型犬进行常规饲养15周后,对病理模型进行取样并系统检测。结果显示,试验组较对照组有更大面积和体积的新生关节软骨组织。新生软骨样组织呈绿色荧光蛋白(GFP)阳性。试验组与对照组的新生组织HE染色显示,试验组的细胞外基质染色较对照组更加均一,基质切面更加平整光滑。透明软骨的标志性基因COL2a1的免疫荧光染色显示,试验组可见较强的COL2a1阳性染色,而对照组仅有少量微弱的阳性染色。实时荧光定量PCR检测结果显示,试验组的COL2a1含量显著高于对照组(P<0.05)。试验结果表明,直接移植原代犬脂肪间充质干细胞到关节腔可有效修复犬软骨组织缺损,为干细胞治疗临床软骨组织损伤提供了科学依据。 展开更多
关键词 间充质干细胞 软骨组织损伤 干细胞移植治疗
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LIN28调控哺乳动物干细胞和生殖细胞发育分化的研究概述
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作者 周哲 马方琳 华进联 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1105-1111,共7页
Lin28为一种保守的RNA结合蛋白质,在细胞代谢、细胞周期和多能性维持中具有重要调控作用。近年来,发现Lin28在哺乳动物原始生殖细胞形成和分化、精原干细胞的形成、自我更新和分化调控中具有不可替代的作用。本文对Lin28作用及其对哺乳... Lin28为一种保守的RNA结合蛋白质,在细胞代谢、细胞周期和多能性维持中具有重要调控作用。近年来,发现Lin28在哺乳动物原始生殖细胞形成和分化、精原干细胞的形成、自我更新和分化调控中具有不可替代的作用。本文对Lin28作用及其对哺乳动物干细胞和生殖细胞发育分化影响的研究进展作一简述。 展开更多
关键词 Lin28 Let7 细胞代谢 细胞周期 生殖细胞 干细胞 哺乳动物
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米托蒽醌甲磺酸盐预处理脂肪间充质干细胞对犬糖尿病的治疗效果评价 被引量:1
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作者 谭宁 李巴仑 +7 位作者 韩苗 李琛琛 景远翔 寇正 李娜 彭莎 赵献军 华进联 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1328-1344,共17页
本研究在高脂饮食(high-fat diet, HFD)饲喂和链脲佐菌素(streptozotin, STZ)注射的联合作用下成功建立小鼠及犬糖尿病模型,旨在探究米托蒽醌甲磺酸盐(mitoquionl mesylate, MitoQ)预处理脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal ... 本研究在高脂饮食(high-fat diet, HFD)饲喂和链脲佐菌素(streptozotin, STZ)注射的联合作用下成功建立小鼠及犬糖尿病模型,旨在探究米托蒽醌甲磺酸盐(mitoquionl mesylate, MitoQ)预处理脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells, ADMSCs)对糖尿病动物模型治疗效果的提升作用及机制。取正常培养状态的ADMSCs及添加1μmol·L^(-1)MitoQ处理的ADMSCs,对MitoQ处理的细胞形态变化、生长、增殖、迁移及抗氧化能力等进行检测。选取48只8周龄的昆明(KM)雄性小鼠和12只中华田园犬,随机分为正常对照组(NC组)、糖尿病模型组(Diabetes组)、ADMSCs单独治疗组(ADMSCs组)和MitoQ预处理ADMSCs联合治疗组(MitoQ-ADMSCs组)。常规方法制作小鼠及犬糖尿病模型,对模型小鼠和犬分别进行ADMSCs和MitoQ-ADMSCs细胞静脉移植治疗,细胞数为2×10^(6)·只^(-1)(小鼠)和1×10^(7)·只^(-1)(犬),每周1次,连续3周。持续监测临床指标变化,治疗结束后1周收样,血清学、组织学、氧化应激及犬血清代谢组学分析。结果表明,MitoQ预处理ADMSCs不会影响其细胞形态,但能促进其生长、增殖及迁移能力,同时增强其抗氧化能力;ADMSCs和MitoQ-ADMSCs移植治疗后,发现MitoQ显著促进ADMSCs降低血糖的能力,且提高胰岛β细胞功能和机体血糖调节能力;ADMSCs经MitoQ预处理后有效减轻糖尿病伴发的肝代谢功能障碍和血脂代谢异常;ADMSCs可以减轻胰腺和肝组织损伤,促进胰岛素分泌,减轻肝糖原合成障碍和纤维化水平,而MitoQ处理能够显著改善ADMSCs治疗效果;MitoQ预处理ADMSCs能够有效提升机体的抗氧化能力,减轻氧化损伤,进而增强治疗效果;MitoQ预处理ADMSCs可以显著促进机体内与抗氧化相关的代谢物表达上调。结果揭示,MitoQ能够通过提高ADMSCs的抗氧化能力、加速组织损伤修复,从而更好地治疗小鼠及犬糖尿病。 展开更多
关键词 米托蒽醌甲磺酸盐 脂肪间充质干细胞 糖尿病
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用新型间充质干细胞制剂治疗猫创口延迟愈合
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作者 李巴仑 吕长荣 +2 位作者 颜小云 赵献军 华进联 《动物医学进展》 北大核心 2024年第2期134-137,共4页
创伤后皮肤破裂或手术后皮肤创口都可能导致伤口(或切口)延迟愈合。身体是一个不断代谢的有机体,有自己的调节机制,皮肤损伤后的愈合时间也会遵循同样的规律。如果伤口愈合过程受到负面影响,则可能导致伤口延迟愈合。伤口出现延迟愈合... 创伤后皮肤破裂或手术后皮肤创口都可能导致伤口(或切口)延迟愈合。身体是一个不断代谢的有机体,有自己的调节机制,皮肤损伤后的愈合时间也会遵循同样的规律。如果伤口愈合过程受到负面影响,则可能导致伤口延迟愈合。伤口出现延迟愈合的原因包括感染、药物、异物存留、损伤严重、营养不良、疾病、组织对合不良、年龄因素、皮肤缺损、自体敏感、脂肪液化、皮下积液等。研究建立了一种直接注射的间充质干细胞(MSCs)制剂,用于治疗1例由自体敏感导致的猫创口延迟愈合。治疗后21 d,伤口完全愈合。MSCs的局部植入成功促进了溃烂伤口的皮肤再生,并促进了毛发再生。研究结果为进一步推动干细胞治疗宠物疾病提供了切实可行的治疗剂型并提供了良好的治疗案例。 展开更多
关键词 创伤延迟愈合 间充质干细胞 褪黑素 米托蒽醌甲磺酸盐 胶原蛋白
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TGF-β通路与哺乳动物卵母细胞发育研究进展 被引量:2
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作者 牛慧敏 王丽丽 +3 位作者 张俊玉 吕珊 尚江华 雷安民 《动物医学进展》 北大核心 2018年第7期74-80,共7页
转化生长因子β(TGF-β)信号通路是一个包含众多成员的多功能细胞因子的大家族,其在卵母细胞形成和发育方面发挥重要的作用。TGF-β信号通路主要是通过配体与受体结合形成复合物,从而激活相关分子调控关键基因的表达。这一系列过程包括... 转化生长因子β(TGF-β)信号通路是一个包含众多成员的多功能细胞因子的大家族,其在卵母细胞形成和发育方面发挥重要的作用。TGF-β信号通路主要是通过配体与受体结合形成复合物,从而激活相关分子调控关键基因的表达。这一系列过程包括直接参与调控作用的骨形成蛋白(BMPs)、激活素(activins)、抑制素(inhibin)、TGF-β和抗苗勒管素(AMH)。另外,还通过偶联环腺苷酸(cAMP)、激素和表皮生长因子(EGF)三个主要途径间接影响TGF-β通路对卵母细胞的发育。论文通过综述TGF-β通路对哺乳动物卵母细胞发育影响的研究进展,为相关研究提供参考。 展开更多
关键词 转化生长因子Β 卵母细胞 环磷酸腺苷
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内质网应激对哺乳动物卵母细胞成熟的影响研究进展 被引量:4
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作者 贾甜甜 文扬 +3 位作者 高蕾蕾 王丽丽 袁一田 雷安民 《动物医学进展》 北大核心 2020年第4期110-114,共5页
在卵母细胞成熟过程中以及胚胎着床前,具备特定功能的各类蛋白质必须在内质网(endoplasmic reticulum,ER)中完成折叠与修饰,这对于维持卵母细胞成熟和胚胎发育是至关重要的。然而,外界不良因素的刺激会破坏内质网功能,阻碍蛋白质合成,诱... 在卵母细胞成熟过程中以及胚胎着床前,具备特定功能的各类蛋白质必须在内质网(endoplasmic reticulum,ER)中完成折叠与修饰,这对于维持卵母细胞成熟和胚胎发育是至关重要的。然而,外界不良因素的刺激会破坏内质网功能,阻碍蛋白质合成,诱发ER应激和未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR),适当的应激反应有利于细胞恢复功能。卵母细胞和早期胚胎对各类外源刺激高度敏感,多项研究表明ER应激和UPR信号影响卵母细胞成熟和胚胎着床前发育。论文总结了ER应激、UPR信号通路及其在哺乳动物卵母细胞成熟和胚胎着床前发育中的作用和机制的现状,以期为卵母细胞体外发育成熟及人类生殖临床提供借鉴。 展开更多
关键词 卵母细胞 内质网应激 未折叠蛋白反应
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褪黑素对哺乳动物干细胞自我更新和分化的调控进展
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作者 牛博文 尚瑞 +3 位作者 张亚 刘思远 晏原 华进联 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第8期45-48,共4页
褪黑素是由松果体分泌的一种非常重要的吲哚类激素,通过神经免疫内分泌网络对机体产生重要的作用。近年来报道显示,褪黑素可能通过抗氧化等机制对干细胞的自我更新和分化进行调控。文章综合了最新的国内外研究进展,介绍了褪黑素对胚胎... 褪黑素是由松果体分泌的一种非常重要的吲哚类激素,通过神经免疫内分泌网络对机体产生重要的作用。近年来报道显示,褪黑素可能通过抗氧化等机制对干细胞的自我更新和分化进行调控。文章综合了最新的国内外研究进展,介绍了褪黑素对胚胎干细胞与诱导性多能干细胞、神经干细胞和间充质干细胞等几种研究较集中的几类干细胞的作用。 展开更多
关键词 褪黑素 干细胞 自我更新 分化 增殖
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无血清分离昆明系小鼠胚胎干细胞 被引量:3
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作者 余树民 严兴荣 +2 位作者 陈冬梅 王晗 窦忠英 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期328-332,共5页
以昆明系小鼠胚胎为研究材料,以丝裂霉素C处理的胎鼠成纤维细胞(Mouse embryonic fibroblasts,MEF)为饲养层,在胚胎干细胞(Embryonic stemcells,ESCs)培养液中添加血清替代物(Knockout serumreplacement,KSR)以替代胎牛血清(Feta... 以昆明系小鼠胚胎为研究材料,以丝裂霉素C处理的胎鼠成纤维细胞(Mouse embryonic fibroblasts,MEF)为饲养层,在胚胎干细胞(Embryonic stemcells,ESCs)培养液中添加血清替代物(Knockout serumreplacement,KSR)以替代胎牛血清(Fetal bovine serum,FBS),并与添加FBS的培养液进行对比,研究了昆明系小鼠胚胎贴壁、ICM(Inner cell mass,ICM)集落形成以及ESCs分离的情况。结果表明,在添加KSR的培养液中,胚胎在培养3~5 d贴壁,胚胎贴壁率显著低于添加FBS的培养液;5~7 d形成ICM集落,集落未分化形态可维持2~3 d,培养10 d ICM集落仍可保持典型的未分化形态;ICM集落形成率和1代ESCs集落出现率与添加FBS的培养液相比差异不显著(P〉0.05),但2~5代ESCs集落出现率显著高于添加FBS的培养液,其中有2株ESCs在添加KSR的培养液中传到7代;所分离细胞显示碱性磷酸酶染色强阳性,Oct-4、Nanog的免疫组化染色阳性,具有ESCs的特点。结论:在ESCs培养液中添加KSR比添加FBS更有利于维持ICM集落及ESCs的未分化状态。 展开更多
关键词 昆明系小鼠 胚胎 胚胎干细胞(ESCs) 内细胞团(ICM)
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MiR-34c在奶山羊雄性生殖干细胞增殖分化中的作用 被引量:3
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作者 刘超 武思宇 华进联 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期569-577,共9页
microRNA(miRNA)在奶山羊雄性生殖细胞和精子发生过程有重要的调控功能。为研究miR-34c对雄性生殖干细胞增殖与分化中的作用,本文利用视黄酸效应基因8(Stra8)在雄性生殖细胞中随年龄增长,以其表达量上调的表达特征为指针,使用实时定量PC... microRNA(miRNA)在奶山羊雄性生殖细胞和精子发生过程有重要的调控功能。为研究miR-34c对雄性生殖干细胞增殖与分化中的作用,本文利用视黄酸效应基因8(Stra8)在雄性生殖细胞中随年龄增长,以其表达量上调的表达特征为指针,使用实时定量PCR技术筛选分析miRNAs。结果发现,miR-34c与Stra8的表达规律基本一致。在无精症奶山羊的睾丸组织中,发现miR-34c在无精症奶山羊睾丸组织中表达缺失。利用miR-34c模拟物及抑制剂转染奶山羊雄性生殖干细胞,体外转染miR-34c模拟物及其抑制剂,发现miR-34c能够下调Rarg、Stra8与c-Myc基因的表达,减缓奶山羊雄性生殖干细胞的增殖。结果提示,miR-34c可能具有调控奶山羊雄性生殖干细胞的减数分裂的作用,同时抑制其增殖。 展开更多
关键词 视黄酸效应基因8(Stra8) MIRNA miRNA前体与成熟体miR-34c 雄性生殖干细胞 奶山羊
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miRNAs与哺乳动物生殖细胞发生 被引量:3
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作者 华进联 张姗姗 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期281-285,共5页
随着小RNA组学的兴起,越来越多不曾被关注的小RNA分子,如siRNAs,miRNAs,rasiRNAs和piRNAs等先后被发现。研究显示,相对于基因、蛋白质等具有复杂结构的生物大分子而言,这些结构非常简单的微型RNA对动物正常机能的维持、细胞增殖... 随着小RNA组学的兴起,越来越多不曾被关注的小RNA分子,如siRNAs,miRNAs,rasiRNAs和piRNAs等先后被发现。研究显示,相对于基因、蛋白质等具有复杂结构的生物大分子而言,这些结构非常简单的微型RNA对动物正常机能的维持、细胞增殖、分化、凋亡、器官形成、肿瘤形成等各种生命现象都具有极其重要的影响。 展开更多
关键词 MIRNAS 哺乳动物 细胞发生 生殖 SIRNAS RNA分子 生物大分子 微型RNA
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褪黑素对哺乳动物卵母细胞发生与胚胎发育的影响 被引量:4
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作者 晏原 邱思源 +3 位作者 牛博文 娄银莹 尚瑞 华进联 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第9期73-75,79,共4页
褪黑素(melatonin,MT)是由哺乳动物松果体合成并分泌的一种吲哚类激素。近年来研究表明,其在卵子发生和胚胎发育过程中具有一定作用:一方面通过抗氧化作用减少细胞氧化应激损伤,另一方面通过调节相关激素代谢水平发挥作用。文章通过对... 褪黑素(melatonin,MT)是由哺乳动物松果体合成并分泌的一种吲哚类激素。近年来研究表明,其在卵子发生和胚胎发育过程中具有一定作用:一方面通过抗氧化作用减少细胞氧化应激损伤,另一方面通过调节相关激素代谢水平发挥作用。文章通过对褪黑素影响哺乳动物卵母细胞发生过程的研究进展作一系统阐述,为进一步研究其作用机理提供一定的理论依据和指导。 展开更多
关键词 褪黑素(MT) 卵母细胞 激素 胚胎发育 体外培养 抗氧化 囊胚率 氧化应激
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自噬在发育及干细胞中的作用 被引量:2
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作者 任立鹏 华进联 彭莎 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期998-1003,共6页
自噬是亚细胞膜结构发生动态变化并经溶酶体介导的细胞内蛋白质和细胞器降解的过程。通过平衡细胞内的合成和分解代谢,自噬可以维持细胞内环境稳态。干细胞是具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞,对组织器官再生和维持组织稳态有重要... 自噬是亚细胞膜结构发生动态变化并经溶酶体介导的细胞内蛋白质和细胞器降解的过程。通过平衡细胞内的合成和分解代谢,自噬可以维持细胞内环境稳态。干细胞是具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞,对组织器官再生和维持组织稳态有重要作用。近年的研究表明,自噬在维持干细胞功能方面有非常重要的作用,本文综述了自噬的形成过程和分子机制及其在发育及干细胞中的作用。 展开更多
关键词 自噬 发育 干细胞
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猫过敏原Fel d 1研究进展
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作者 田宏凯 李琛琛 +2 位作者 李巴仑 赵献军 华进联 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期4863-4871,共9页
全球有相当一部分人群因对猫过敏而受到影响,患者症状小到鼻炎,大到哮喘,甚至呼吸障碍,对过敏患者的生活造成严重影响。Fel d 1是目前公认的主要猫过敏原,是一种分泌型球蛋白,主要产生于猫的皮脂腺和唾液腺,在猫梳理毛发的过程中分布到... 全球有相当一部分人群因对猫过敏而受到影响,患者症状小到鼻炎,大到哮喘,甚至呼吸障碍,对过敏患者的生活造成严重影响。Fel d 1是目前公认的主要猫过敏原,是一种分泌型球蛋白,主要产生于猫的皮脂腺和唾液腺,在猫梳理毛发的过程中分布到猫毛上,并最终散播到空气中。为解决人类对猫过敏这一难题,相关研究人员尝试从多条途径减少Fel d 1的分泌或控制其传播,以达到缓解或消除猫过敏患者的过敏反应,如通过清洁猫毛、清洁室内环境、培育低过敏性猫、为猫注射疫苗等方法来实现。本文就猫过敏原的研究进展和对猫过敏的管理控制以及治疗措施进行综述。 展开更多
关键词 过敏 Fel d 1 症状 管理 治疗
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小鼠卵母细胞和胚胎不同冷冻方法的比较研究
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作者 虞莲 卓玛拉姆 +2 位作者 邓增卓玛 李建强 雷安民 《畜牧兽医杂志》 2023年第2期5-8,10,共5页
探讨程序化冷冻与玻璃化冷冻对小鼠GV期卵母细胞及二细胞期胚胎的复苏率及其发育潜能的影响。通过小鼠的卵母细胞与早期胚胎的不同冷冻方法的比较,为后续阿旺绵羊的胚胎冷冻保存提供参考。采用程序化冷冻与玻璃化冷冻技术,分别冷冻小鼠G... 探讨程序化冷冻与玻璃化冷冻对小鼠GV期卵母细胞及二细胞期胚胎的复苏率及其发育潜能的影响。通过小鼠的卵母细胞与早期胚胎的不同冷冻方法的比较,为后续阿旺绵羊的胚胎冷冻保存提供参考。采用程序化冷冻与玻璃化冷冻技术,分别冷冻小鼠GV期卵母细胞及二细胞期胚胎,复苏后培养,比较不同冷冻处理后的复苏率、成熟率与囊胚率。小鼠GV期卵母细胞程序化冷冻复苏率(48.00%±5.29%)显著低于玻璃化冷冻复苏率(65.00%±5.00%),有统计学差异(P=0.0147<0.05);而程序化冷冻后复苏卵母细胞的发育成熟率略高于玻璃化冷冻组,但无统计学意义。小鼠二细胞期胚胎程序化冷冻组复苏率(76.00%±2.00%)显著高于玻璃化冷冻组复苏率(70.00%±2.00%),有统计学差异(P=0.0213<0.05);冷冻后复苏胚胎发育的囊胚率程序化冷冻略低于玻璃化冷冻及对照组,但无统计学意义。 展开更多
关键词 卵母细胞 二细胞期胚胎 程序化冷冻 玻璃化冷冻
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波尔山羊卵母细胞和早期胚胎的端粒酶活性
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作者 敬晓棋 雷安民 +1 位作者 屈雷 窦忠英 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期627-630,共4页
利用端粒重复序列扩增(TRAP)法进行了山羊卵母细胞和附植前胚胎的端粒酶活性的测定;结果表明,山羊卵母细胞和早期胚胎的端粒酶活性都为阳性。TPG定量比较发现,卵母细胞的TPG最低,为25.348U;4-细胞的TPG为273.832U,至8-细胞时,TPG又降低... 利用端粒重复序列扩增(TRAP)法进行了山羊卵母细胞和附植前胚胎的端粒酶活性的测定;结果表明,山羊卵母细胞和早期胚胎的端粒酶活性都为阳性。TPG定量比较发现,卵母细胞的TPG最低,为25.348U;4-细胞的TPG为273.832U,至8-细胞时,TPG又降低到56.117U,随后快速升高,桑椹胚的TPG为251.111U;囊胚的端粒酶活性最高,TPG为519.46U。 展开更多
关键词 端粒酶活性 波尔山羊 早期胚胎 端粒重复序列扩增法
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内质网应激与哺乳动物雄性生殖 被引量:7
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作者 崔艳华 华进联 彭莎 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期879-885,共7页
内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)激活未折叠蛋白反应,维持哺乳动物细胞的胞内稳态,过度持续的ERS导致细胞凋亡。最新研究表明,ERS对哺乳动物雄性生殖有重要的调节作用,包括对精母细胞、睾丸结构及精子发生的影响。ERS是... 内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)激活未折叠蛋白反应,维持哺乳动物细胞的胞内稳态,过度持续的ERS导致细胞凋亡。最新研究表明,ERS对哺乳动物雄性生殖有重要的调节作用,包括对精母细胞、睾丸结构及精子发生的影响。ERS是研究生殖细胞生存和凋亡的新通路。雄性不育可能是由过度ERS引起的。本文通过简述ERS的最新研究进展,分析雄性生殖与ERS的关系,并从ERS调控雄性生殖角度提出新的理解和展望。 展开更多
关键词 内质网应激 雄性生殖 哺乳动物
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猪L-Myc基因的分子克隆及在细胞重编程中的应用 被引量:1
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作者 李珍珍 崔怡 +3 位作者 高祎 成德 刘亚军 王华岩 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第17期3566-3575,共10页
【目的】克隆猪L-Myc基因,并在蛋白水平表达的情况下探索其在细胞重编程中的作用,为深入研究猪L-Myc基因替代c-Myc诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPSC)奠定基础。【方法】先通过NCBI序列比对,采用RT-PCR克隆猪L-Myc基因... 【目的】克隆猪L-Myc基因,并在蛋白水平表达的情况下探索其在细胞重编程中的作用,为深入研究猪L-Myc基因替代c-Myc诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPSC)奠定基础。【方法】先通过NCBI序列比对,采用RT-PCR克隆猪L-Myc基因cDNA,生物信息学分析猪L-Myc基因与人和小鼠的同源性,构建融合表达载体pEGFP/L-Myc-C1,通过载体转染和免疫印记检测猪L-Myc基因cDNA的蛋白水平表达;再将L-Myc基因装入逆转录病毒载体中,分别使用不同的转录因子诱导猪胎儿成纤维细胞(porcine embryo fibroblast,PEF),通过形态变化和碱性磷酸酶(AP)染色验证猪L-Myc基因在细胞重编程中的作用。【结果】①获得了1 113 bp的猪L-Myc基因cDNA,编码364个氨基酸,理论分子质量为40 kD;②生物信息学分析显示猪L-Myc基因与人和小鼠高度同源;③免疫印记检测结果说明猪L-Myc基因cDNA能够在蛋白水平表达;④细胞诱导试验和AP染色结果显示转录因子Oct4、Sox2、Klf4和L-Myc(OSKL)组合诱导的细胞阳性克隆率明显高于Oct4、Sox2和Klf4(OSK)组合的阳性克隆率。【结论】获得了猪L-Myc基因,并且该基因在蛋白水平表达且在细胞重编程过程中起到了重要的作用。 展开更多
关键词 猪L-Myc基因 诱导多能干细胞(iPSC) 原癌基因 致瘤性 融合蛋白
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共表达外源OCT4/SOX2可激活人胚肾细胞中内源NANOG的表达 被引量:1
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作者 李珍珍 成德 +1 位作者 高祎 王华岩 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期833-840,共8页
自2006年诱导多能干细胞(iPS)技术诞生以来,采用病毒等载体进行的诱导方法已取得了成功.但是,其致瘤性的影响限制了病毒载体的推广与应用,而采用非病毒载体诱导iPS细胞成为研究的热点.本研究通过2个启动子的独立启动,构建了带有绿色荧... 自2006年诱导多能干细胞(iPS)技术诞生以来,采用病毒等载体进行的诱导方法已取得了成功.但是,其致瘤性的影响限制了病毒载体的推广与应用,而采用非病毒载体诱导iPS细胞成为研究的热点.本研究通过2个启动子的独立启动,构建了带有绿色荧光标记的OCT 4/SOX 2共表达诱导载体(pOct4/Sox2-EGFP).将该载体转染HEK 293FT细胞后,阳性克隆明显表达绿色荧光.并通过RT-PCR、免疫荧光等方法证明其中的转录因子OCT 4和SOX 2能在转染细胞中高效表达,同时诱导受体细胞中内源NANOG的转录表达.本研究说明,OCT 4/SOX 2共表达载体能激活NANOG基因的内源表达,暗示着非病毒不整合载体pOct4/Sox2-EGFP本身或与其它转录因子和小分子结合可用于诱导成体细胞的重编程.因此,本研究为下一步应用质粒载体诱导体细胞重编程为iPS细胞的研究奠定了工作基础. 展开更多
关键词 诱导多能干细胞(iPS) NANOG基因 pOct4/Sox2-EGFP
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抗猪繁殖与呼吸障碍综合征基因编辑猪研究进展 被引量:2
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作者 李双喜 华进联 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期50-57,共8页
猪繁殖与呼吸障碍综合征是由猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的一种病毒性传染病。该病是影响我国生猪产业健康发展的最重要的三大疫病之一。目前对于该病的防控主要依赖... 猪繁殖与呼吸障碍综合征是由猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的一种病毒性传染病。该病是影响我国生猪产业健康发展的最重要的三大疫病之一。目前对于该病的防控主要依赖于养殖场内外部生物安全体系,采取合理措施降低病毒的污染,切断病毒传播途径。从保护易感动物的角度而言,抗病育种也是疫病防控的重大策略之一。近年来,随着基因编辑技术的发展和成熟,分子育种作为猪抗病育种的核心技术,已显示出其独特的优势。国内外多个研究团队已利用分子育种技术在抗PRRS育种方面取得很多突破性进展。本文以PRRSV受体为切入点,综述当前猪抗PRRS育种的研究现状,以期为PRRS的防控和猪的抗病育种研究提供参考和线索。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征 抗病育种 CRISPR/Cas9 CD163
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黄芪甲苷通过抑制卵泡颗粒细胞凋亡缓解糖尿病雌鼠生殖损伤 被引量:2
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作者 任雪华 文扬 +2 位作者 虞莲 田佳卉 雷安民 《动物医学进展》 北大核心 2021年第12期65-71,共7页
利用链脲佐菌素(STZ)制备1型糖尿病(T1D)模型小鼠,随机分为模型组和治疗组。治疗组按单次50 mg/kg剂量黄芪甲苷(astragalosideⅣ)每天灌胃2次,连续1周。然后从各组卵母细胞体内外发育能力与卵巢组织结构来探究灌胃黄芪甲苷对糖尿病雌性... 利用链脲佐菌素(STZ)制备1型糖尿病(T1D)模型小鼠,随机分为模型组和治疗组。治疗组按单次50 mg/kg剂量黄芪甲苷(astragalosideⅣ)每天灌胃2次,连续1周。然后从各组卵母细胞体内外发育能力与卵巢组织结构来探究灌胃黄芪甲苷对糖尿病雌性小鼠生殖系统的影响。结果显示,黄芪甲苷灌胃可以显著提高T1D雌鼠的超数排卵数量,治疗组平均每只排卵数12.6枚±1.7枚,显著高于模型组1.6枚±1.2枚(P<0.05),并且卵母细胞形态接近于正常小鼠。同时灌胃黄芪甲苷也可以提高T1D雌鼠GV期卵母细胞体外发育能力,治疗组GVBD率为32.9±5.9、PB1率为13±4.1,均高于模型组GVBD率(13±2.3)、PB1率(0.8±0.79)(P<0.05)。对各组体外发育各个阶段卵母细胞进行ROS检测,发现模型组相对于对照组卵母细胞ROS含量明显上升而后又快速下降,而治疗组则与对照组相似,说明T1D雌鼠与正常小鼠卵母细胞ROS的变化规律不同,而黄芪甲苷可以改变这种差异。结合卵巢切片HE染色结果,推测这种T1D雌鼠ROS的异常可能与T1D雌鼠卵巢中颗粒细胞的异常凋亡有关,导致卵母细胞提前激活,而黄芪甲苷可以通过抑制颗粒细胞凋亡,从而改善T1D对雌性生殖系统造成的损伤。 展开更多
关键词 1型糖尿病 黄芪甲苷 颗粒细胞 凋亡
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