大孔吸附树脂一次性分离杜仲叶中杜仲总苷和杜仲黄酮的研究

本文就9种大孔树脂吸附分离杜仲总苷和杜仲黄酮的工艺进行了研究,结果表明:一次性分离杜仲总苷(富含绿原酸、桃叶珊瑚苷等活性物质)和杜仲黄酮的适宜的大孔树脂为XDA-1和X-5。适宜的吸附解吸条件分别为:上柱液pH 6,吸附时间应大于10 h;XDA-1树脂用40%乙醇洗脱杜仲总苷,用80%的乙醇洗脱黄酮;X-5树脂用30%的乙醇洗脱杜仲总苷,用70%的乙醇洗脱黄酮。两种树脂的分离效果分别为:XDA-1分离杜仲总苷(其中绿原酸含量为14.23%,桃叶珊瑚苷含量为7.69%)粗品得率为8.01%,杜仲总黄酮粗品得率为4.76%,含量为15.82%;X-5分离杜仲总苷(其中绿原酸含量为15.39%,桃叶珊瑚苷含量为9.07%)粗品得率为7.35%,杜仲总黄酮粗品得率为5.11%,含量为16.15%。

绿原酸及其类似物与生物活性

绿原酸具有多种药理作用 ,是许多中药材及中成药的主要有效成分之一。评述了绿原酸在植物中的分布及其天然和合成类似物的生物活性 。

杜仲黄酮指纹图谱研究

采用HPLC指纹图谱对杜仲黄酮和银杏黄酮进行了标示,并将杜仲黄酮、银杏黄酮和沙棘黄酮HPLC指纹图谱进行了比较,发现杜仲黄酮和银杏黄酮很相近;杜仲黄酮、银杏黄酮和沙棘黄酮三者均富含槲皮素。研究认为,杜仲黄酮具有广泛的应用前景和较大的开发价值。

杜仲籽油中α-亚麻酸的含量及其生理功能

对杜仲籽油中的主要成分、α-亚麻酸的代谢产物及其生理功能进行了评述 。

大孔吸附树脂对杜仲叶中绿原酸、总黄酮的分离研究

通过对静态吸附容量和洗脱效果的选择 ,从 10种大孔吸附树脂中确定出最适于杜仲叶中绿原酸、总黄酮分离的XDA- 5树脂。研究了用该树脂吸附分离杜仲叶中绿原酸和总黄酮的方法 ,得出以下结论 :1)杜仲叶绿原酸和总黄酮的最佳分离工艺为 :上柱液pH值为 2～ 3,静态吸附时间 8h ,绿原酸最佳洗脱剂为10 %～ 15 %乙醇溶液 ,黄酮洗脱剂为 5 0 %～ 70 %乙醇溶液 ,流速为每分钟流出液体积相当于吸附剂体积的8% ;2 ) 10 %～ 15 %乙醇洗脱液经真空浓缩后 ,其固形物得率为 4 .85 % ,绿原酸含量为 36 .6 5 % ;3) 5 0 %～ 70 %乙醇洗脱液经真空浓缩后 ,其固形物得率为 4 .98% ,总黄酮含量为 2 8.34%。

安康‘紫仁’核桃响应干旱胁迫的生理评价研究

为深入了解‘紫仁’核桃响应干旱胁迫的综合能力,选取安康地区培育的‘紫仁’核桃进行干旱胁迫处理下的生理响应试验。对‘紫仁1’和‘紫仁2’分别进行PEG6000处理0、3、6、9、15 d后测定电导率、丙二醛(MDA)、抗氧化酶活性、脯氨酸等生理指标,分析‘紫仁’核桃干旱响应生理。结果表明:‘紫仁1’和‘紫仁2’在干旱胁迫后二者生理响应趋势相似,即相对电导率变大、MDA含量增多、SOD和POD活性增强、脯氨酸含量增加;‘紫仁1’在胁迫后的相对电导率及MDA含量显著高于‘紫仁2’,而‘紫仁1’的SOD和POD活性、脯氨酸含量却又低于‘紫仁2’,说明在相同PEG处理下,‘紫仁1’的综合抗旱能力低于‘紫仁2’。

杜仲次生代谢物合成积累与物候期的研究

通过对南温带和北亚热带生长的杜仲不同月份次生代谢物含量与物候期关系的研究,发现杜仲次生代谢物合成积累的第一次高峰期出现在 芽开绽期 后的70d左右;第二次高峰期出现在 落叶盛期 .当掌握了杜仲次生代谢物合成积累高峰期 最佳采收期 的物候期时,无论南方、北方,也无论高山、平原地区,就可根据这一物候期,大致估算出该地区杜仲的最佳采收期.

杜仲原生皮与再生皮次生代谢物含量分析

目的 探讨杜仲原生皮与再生皮的次生代谢物含量的差异性。方法 利用游标卡尺测量 17龄杜仲树的原生皮与再生皮的厚度 ,采用分光光度法测定桃叶珊瑚苷和总黄酮含量 ,采用高效液相色谱法测定绿原酸含量。结果杜仲原生皮和再生皮的内皮厚度分别为 1.6 4 6和 1.6 31mm;原生皮中绿原酸、桃叶珊瑚苷和总黄酮的含量分别为0 .4 0 2 % ,0 .781%和 0 .4 84 % ,再生皮中绿原酸、桃叶珊瑚苷和总黄酮的含量分别为 0 .4 36 % ,0 .84 9%和 0 .5 16 %。结论 原生皮与再生皮的厚度基本相同 ;

杜仲优系有效成分性状稳定性与增长率的研究

采用多项有效成分含量分析方法选择种源区和优良类型。在此基础上选择优树,繁殖无性系,建立无性系测定林,并采用多项有效成分含量和生长量(产量)指标的一、二级模糊综合评判方法,初选出14个优良无性系,1997年春季布设汉中、杨陵、咸阳3个区域试验点进行区域栽培试验。2001年6月中旬收集材料,对各区试点优良无性系的有效成分进行了测定和模糊综合评判;提出了有效成分性状增长率的概念;分析和计算了优良无性系有效成分的性状稳定性和增长率,筛选出有效成分含量高且性状稳定的优良无性系G_2、X_(11)、L_(45)、L_0、L_1。

不同品种杜仲叶中有效成分含量差异性研究

对杜仲不同品种叶中有效成分及杜仲胶含量进行了测定,并用方差分析及多重比较方法进行了分析比较,认为品种2主要有效成分绿原酸、京尼平甙酸、桃叶珊瑚甙、总黄酮的含量最高,在1%显著水平上,品种2绿原酸含量与品种3、4、5有显著差异,1、3、4、5品种间没有显著差异,京尼平甙酸和总黄酮含量与品种1、3、4、5间有显著差异,桃叶珊瑚甙含量在品种1、2、3、4、5之间都有显著差异;品种1和品种2的含胶量较高,在1%显著水平上,品种1含胶量与品种3、4、5间差异极显著,品种2与品种3、4、5间差异极显著,这两个结论为药用和胶用型优良品种选择提供了依据.

核桃JrNPR1基因的克隆与抗病响应潜力

病程相关基因非表达子NPR1(Nonexpressor of pathogenesis-related gene 1)基因,在植物抗病过程中起核心调控作用。核桃(Juglans regia)是我国乡村振兴的重要经济油料树种,其生长和产量严重受病虫害制约。为探索核桃抗病生理机制,筛选抗病基因,以‘香玲’核桃为试材,克隆获得JrNPR1基因,对其基本生物信息和病害响应进行分析,预测JrNPR1响应病害的功能。结果显示:JrNPR1基因开放读码框(ORF)长1782 bp,包含593个氨基酸,理论等电点为6.40;与杨梅(Morella rubra)、蓖麻(Ricinus communis)等同源蛋白进行多序列比对,发现均有NPR1-like-C保守结构域,且JrNPR1与杨梅和欧洲栓皮栎(Quercus suber)等的同源蛋白具有较近的进化关系。其上游1233 bp启动子中含有多种与植物抗病相关的顺式作用元件,如,WRKY71OS。在胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)、矩圆黑盘孢菌(Melanconium oblongum)、黄单胞菌(Xanthomonas campestris)等病原处理下,JrNPR1被显著诱导,且其表达在水杨酸(Salicylic acid,SA)存在下高出单一病原处理的1.31~178.89倍。表明JrNPR1基因可能是抵抗核桃炭疽病、枝枯病、细菌性黑斑病的重要基因,且涉及SA信号通路。

核桃WD40转录因子JrATG18a基因的克隆及逆境响应

WD40转录因子在植物逆境响应中具有重要作用。本研究克隆获得核桃的一条WD40家族的自噬相关蛋白(Autophagy-related protein)18a基因(JrATG18a),通过生物信息学和基因表达技术,分析不同非生物及植物激素处理下JrATG18a基因的表达规律,预测JrATG18a的基本生物功能。结果显示,JrATG18a的开放阅读框(ORF)为1371 bp,编码蛋白含456个氨基酸,分子量为50.746 k D,理论等电点为5.97。与草莓、苹果、碧桃等具有较近的进化关系。其启动子含有热激响应(HSE)、低温胁迫(LTR)、水杨酸(SA)响应等相关元件。表达分析发现JrATG18a基因在热、寒、旱、SA、茉莉酸甲酯(Me JA)、脱落酸(ABA)处理下能被不同程度的诱导,且体现出根和叶的表达差异。这些结果表明,JrATG18a基因能响应逆境参与核桃适应不良环境,可作为核桃抗逆分子育种的重要候选基因。

核桃抗逆基因JrGSTU23的克隆及表达分析

谷胱甘肽转移酶GST基因在植物逆境响应中具有重要作用。核桃Juglans regia是重要的经济林木,其生长和产量受环境因子的影响。为探索核桃抗逆生理机制,筛选抗逆基因,以品种‘香玲’‘Xiangling’为试材,克隆获得核桃JrGSTU23基因,并进行生物信息学和基因表达分析,预测JrGSTU23的基本生物功能。结果显示:JrGSTU23基因的开放阅读框(ORF)为684 bp,编码多肽为25.89 kDa,包含氨基酸227,理论等电点为5.20。与碧桃Prunus persica,毛果杨Populus trichocarpa等同源蛋白进行多序列比对,发现均有GST-Tau保守结构域,且与香蕉Musa acuminata和毛果杨等的Tau家族GST蛋白具有较近的进化关系;其上游2 000 bp启动子中含有多种与逆境响应相关的顺式作用元件。实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)发现,JrGSTU23在植物激素脱落酸(ABA),茉莉酸(MeJA),水杨酸(SA)和非生物胁迫氯化钠,聚乙二醇(PEG 6000),6℃等胁迫下能不同程度地被诱导表达,且在根和叶中的表达趋势不同。表明JrGSTU23受不同植物激素和非生物胁迫诱导,且具有组织表达特异性,推测其在核桃逆境响应中起到一定作用。

核桃JrEFM1转录因子响应逆境及激素的表达模式

MYB转录因子在调控植物生长发育和逆境响应方面发挥着重要的作用.通过克隆获得了核桃的1条R1-MYB类转录因子EFM基因(命名为JrEFM1),利用生物信息学和实时荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)技术,分析在不同非生物及植物激素处理下JrEFM1的表达规律,探究了JrEFM1的基本生物学功能.结果显示,JrEFM1的编码区长为1320bp,编码蛋白含439个氨基酸,分子量为48.322KDa,理论等电点为9.26.与葡萄、番薯等具有较近的进化关系.其启动子包含干旱胁迫(MBS)、热激响应(HSE)、水杨酸(SA)、玉米素(O2-site)和赤霉素响应(GARE-motif)等相关元件.对JrEFM1在干旱,冷害,热激,ABA,JA,SA处理下的表达情况进行分析,发现JrEFM1可被这些处理不同程度地诱导,同时根和叶表现出不同的转录水平.表明JrEFM1可响应逆境胁迫,并与激素信号通路相关;JrEFM1可作为核桃逆境响应机制研究及抗逆育种的优良候选基因.

核桃TT1类转录因子的筛选及干旱响应分析

TT1基因(transparent testa1)在植物逆境响应中有重要作用。核桃是重要的经济树种,其产量和质量均受环境影响。为进一步探索核桃(Juglans regia)抗逆机制,以‘香玲’核桃为试验材料,克隆获得核桃JrTT1基因,并进行基因表达和生物信息学分析,预测该基因的基本生物功能。结果表明,JrTT1-1、JrTT1-2、JrTT1-3基因的开放阅读框(OFR)分别为1014、1023、1029 bp,蛋白分子量分别为37763.51、38492.94、38136.36 u,含有氨基酸数分别为337、340、342,理论等电点分别为7.88、7.19、8.89。与其他物种的同源TT1蛋白具有较近的进化关系。且其上游1200 bp启动子中含有多种与干旱逆境响应相关的顺式作用元件。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)发现,JrTT1-1、JrTT1-2、JrTT1-3基因在PEG 6000胁迫下能不同程度地被诱导表达,且在叶和根中的表达趋势不同。表明JrTT1基因可以响应干旱胁迫诱导,并具有组织表达特异性,推测其在核桃逆境响应中具有一定作用。

核桃JrGRAS2基因响应热胁迫的表达及功能分析

GRAS转录因子在植物响应逆境中起重要作用。为更好的了解核桃(Juglans regia)在逆境胁迫下的适应机制,本研究从‘香玲’核桃转录组中克隆获得一条GRAS基因(命名为Jr GRAS2),对其在不同高温胁迫下的表达进行分析,并将该基因插入酵母表达载体p YES2中构建重组载体p YES2-Jr GRAS2,将p YES2-Jr GRAS2转入酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)INVSCI,同时以转化p YES2的重组酵母作为阴性对照,在酵母表达系统中研究该基因的抗热胁迫功能。结果显示,该基因开放读码框(ORF)全长1 296 bp,拟推导的蛋白分子量为47 405.83 Da,含有氨基酸数为431,理论等电点为5.66。在热胁迫下,Jr GRAS2基因被显著诱导,特别是在36℃胁迫0.5 h的茎内,其表达相对于对照被上调了335.5倍。对两种酵母进行热胁迫,发现转Jr GRAS2基因酵母表现出较对照更高的生存活性。表明Jr GRAS2基因具有响应热胁迫的能力,且能提高酵母的抗性,Jr GRAS2基因可作为核桃逆境应答的重要候选基因。

包装、臭氧和保鲜剂处理对‘大红袍’鲜花椒呼吸强度与贮藏效果的影响

为筛选延长鲜花椒贮藏寿命的适宜包装以及臭氧与保鲜剂的适宜浓度,以‘大红袍’鲜花椒为材料,采用聚乙烯PE20(厚20μm)、PE30(30μm)和PE50(50μm)包装袋以及臭氧(O3,5、15、30 mg/L)、二氧化氯(ClO2,15、40、80 mg/kg)和双乙酸钠(C4H7NaO4,100、200、400 mg/kg)处理后于(0±0.5)℃贮藏,测定其冷藏期间的感官品质、褐变率和呼吸强度的变化。结果表明:PE20包装对抑制鲜花椒的褐变和保持感官品质具有较好效果;15 mg/L O3、40 mg/kg ClO2和100 mg/kg C4H7NaO4的处理效果较好,尤以40 mg/kg ClO2处理可显著抑制鲜花椒的呼吸强度和褐变率,保鲜效果最佳,冷藏42 d时褐变率为42%。综上,聚乙烯PE20包装袋及40 mg/kg ClO2对鲜花椒的保鲜效果最好。

1-MCP处理对‘大红袍’鲜花椒冷藏生理与品质效应的影响

以凤县‘大红袍’鲜花椒为试材,对照、低温(0℃)1.0μL·L^(-1) 1-甲基环丙烯(1-methylcyclopropene,1-MCP)处理24 h和常温(28℃)1.0μL·L^(-1) 1-MCP处理12 h,对其(0±1)℃冷藏期间感官品质、褐变率、呼吸强度、乙烯释放量、叶绿素含量、出油率及粗蛋白质含量、丙二醛(MDA)含量和脂氧合酶(LOX)活性等指标的变化进行监测,以期为其1-MCP保鲜技术提供参考。结果表明:低温1.0μL·L^(-1) 1-MCP处理加速了鲜花椒的褐变速度,贮藏24 d时褐变率显著高于对照;常温1.0μL·L^(-1) 1-MCP处理使鲜花椒贮藏期由24 d延长至48 d,显著抑制其呼吸强度和褐变率,延缓其叶绿素降解和MDA含量的积累,降低其LOX活性峰值,感官品质最优,48 d时褐变率仅为5.3%,对其出油率和粗蛋白质含量无显著影响。

元宝枫油成分、加工工艺及功能性研究进展

元宝枫油是一种优质、高档的保健食用油。2011年,卫生部批准元宝枫油为新资源食品。研究表明元宝枫种子含油率超过40%,油中不饱和脂肪酸含量达90%以上,其中亚油酸含量为37.35%,神经酸含量为5.52%,维生素E含量达125 mg/100 g,对人体具有多种医疗保健作用。综述了元宝枫油的成分、加工工艺及功能性的研究现状,并展望其开发前景,为元宝枫油的进一步加工、应用提供理论参考。

构树转录因子BpbZIP1的鉴定及镉胁迫响应分析

重金属污染不仅影响土壤有效面积,限制植被分布,也会对食物链和人体健康造成危害,其中镉(Cd)污染尤为突出。选择重金属耐受性强的植物应用于尾矿区的土壤修复亟待进行。构树(Broussonetiapapyrifera)是重金属污染土壤的先锋树种,为探明构树响应重金属胁迫的分子机制,本研究从构树中克隆获得1个碱性亮氨酸拉链(basicleucinezipper,bZIP)转录因子(命名为BpbZIP1),对其基本生物信息、Cd胁迫响应及转化酵母的功能进行分析,预测BpbZIP1响应Cd的功能。结果显示,BpbZIP1基因开放阅读框长1713 bp,编码的蛋白含570个氨基酸,分子量为62902.38 Da,等电点为4.62。与拟南芥(Arabidopsisthaliana)AtbZIP1具有较近的进化关系。在150μmol·L^(-1)CdCl_(2)处理下,BpbZIP1基因能被不同程度的诱导表达,在3 h时BpbZIP1在根中的表达为对照的17.4倍。将BpbZIP1转入酵母能显著提高转基因酵母的抗Cd能力,当浓度高于0.6%时,转基因酵母的生长活力是对照的1.54~1.71倍。以上结果表明BpbZIP1基因能积极响应Cd胁迫,其表达可改善Cd胁迫耐受力,是构树Cd胁迫响应的重要基因。