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小麦LMW-GS基因PCR初步研究
被引量:
2
1
作者
赵惠贤
郭蔼光
+1 位作者
范三红
郑雪
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2004年第1期32-36,共5页
用CTAB法提取小麦材料基因组DNA,根据基因库中公布的已知LMW-GS基因序列,设计并合成染色体位点特异的PCR引物1~7;探索出优化的PCR反应体系,即20μL反应体积中,Mg2+浓度为2.5mmol/L,dNTP浓度为200μmol/L,模板DNA30~60ng,每种引物50n...
用CTAB法提取小麦材料基因组DNA,根据基因库中公布的已知LMW-GS基因序列,设计并合成染色体位点特异的PCR引物1~7;探索出优化的PCR反应体系,即20μL反应体积中,Mg2+浓度为2.5mmol/L,dNTP浓度为200μmol/L,模板DNA30~60ng,每种引物50ng,Taq酶0.5U。利用特殊小麦材料——六倍体普通小麦(染色体组为AABBDD)、四倍体小麦(AABB)及二倍体一粒小麦(AA)和节节麦(DD)等的基因组DNA为模版,在优化的PCR反应体系下进行特异性扩增和引物验证。结果表明,引物3和引物4为小麦谷蛋白Glu-D3位点LMW-GS基因的特异引物,用其进行扩增时,循环反应条件为94℃变性1min,62℃退火1min,72℃延伸2min;扩增产物大小约为1.63kb,包括启动子和整个编码区。引物5和7为小麦谷蛋白Glu-B3位点LMW-GS基因的特异引物,用其进行扩增时,循环反应条件为94℃变性1min,64℃退火1min,72℃延伸2min;扩增产物大小约为1.45kb,包括启动子和整个编码区。
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关键词
小麦
LMW-GS基因
PCR引物
特异染色体位点
低分子量麦谷蛋白基因
下载PDF
职称材料
题名
小麦LMW-GS基因PCR初步研究
被引量:
2
1
作者
赵惠贤
郭蔼光
范三红
郑雪
机构
西北农林科技大学生命科学学院陕西省农业分子学重点实验室
出处
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2004年第1期32-36,共5页
基金
国家转基因植物研究与产业化开发专项(JY-03-A-11-01)
杨凌农业生物技术育种中心资助项目(1994-14)
文摘
用CTAB法提取小麦材料基因组DNA,根据基因库中公布的已知LMW-GS基因序列,设计并合成染色体位点特异的PCR引物1~7;探索出优化的PCR反应体系,即20μL反应体积中,Mg2+浓度为2.5mmol/L,dNTP浓度为200μmol/L,模板DNA30~60ng,每种引物50ng,Taq酶0.5U。利用特殊小麦材料——六倍体普通小麦(染色体组为AABBDD)、四倍体小麦(AABB)及二倍体一粒小麦(AA)和节节麦(DD)等的基因组DNA为模版,在优化的PCR反应体系下进行特异性扩增和引物验证。结果表明,引物3和引物4为小麦谷蛋白Glu-D3位点LMW-GS基因的特异引物,用其进行扩增时,循环反应条件为94℃变性1min,62℃退火1min,72℃延伸2min;扩增产物大小约为1.63kb,包括启动子和整个编码区。引物5和7为小麦谷蛋白Glu-B3位点LMW-GS基因的特异引物,用其进行扩增时,循环反应条件为94℃变性1min,64℃退火1min,72℃延伸2min;扩增产物大小约为1.45kb,包括启动子和整个编码区。
关键词
小麦
LMW-GS基因
PCR引物
特异染色体位点
低分子量麦谷蛋白基因
Keywords
Triticum aestivum
specific chromosome locus
LMW-GS gene
PCR
分类号
S512.1 [农业科学—作物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
小麦LMW-GS基因PCR初步研究
赵惠贤
郭蔼光
范三红
郑雪
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2004
2
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职称材料
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