Pronase E酶解释放糖蛋白N-糖链的方法及荧光标记衍生物的LC-MS分析

建立了一种用非特异性酶链酶蛋白酶E(Pronase E)从糖蛋白上释放N-糖链的方法.以牛胰核糖核酸酶B(Ribo B)和鸡白蛋白(Chicken Albumin)为材料,用Pronase E代替N-糖苷酶F(PNGase F)释放N-糖链.当蛋白酶质量与糖蛋白质量比为1∶1时,得到只带一个天冬氨酸(Asn)的闭环N-糖链,称其为糖氨酸(gly-can-Asn),这样既为糖链引入了天然的-NH2活性基团,同时还保持了糖链原有的还原端闭环结构.以9-氯甲酸芴甲酯(Fmoc-Cl)为衍生试剂对解离后的糖氨酸进行衍生,采用高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术(HPLC-ESI/MS)对Fmoc-Cl糖氨酸衍生物进行分析,建立了糖蛋白的Pronase E酶解、微量糖氨酸的Fmoc-Cl衍生以及糖氨酸衍生物的HPLC-ESI/MS分析方法,该方法保持了N-糖链的天然结构,便于以-NH2为功能基团进一步进行荧光标记、分离制备以及糖链与蛋白质的相互作用研究.

胡桃属植物分子系统发育和生物地理研究进展

胡桃属植物约有21种,在亚洲、欧洲和美洲均有分布,为间断分布类群。该属植物种质资源丰富,栽培历史久,具有重要的生物学意义和经济价值。综述胡桃属植物分子系统发育和生物地理方面的研究历史和进展,对美国白核桃及我国特有种麻核桃、野核桃和胡桃楸的归属及系统地位等有争议的问题进行分析,对该属植物遗传多样性、起源分布与进化历史方面的研究前景进行展望。随着分子生物技术的迅速发展,预计二代测序技术将成为研究非模式植物胡桃属系统发育和生物地理的有利工具。

蒙古扁桃的开花生物学研究

对分布于宁夏的蒙古扁桃居群进行开花动态、繁育系统、花粉与柱头活性、生殖器官解剖结构与花粉管的生长观察以及人工授粉实验,分析其传粉生物学特性,以探讨影响蒙古扁桃结实率低下的原因。结果显示:蒙古扁桃为专性异交植物;花具有花柱多型性现象,同一个体中存在长花柱花、中花柱花、短花柱花3种花柱型花,在不同个体中三型花所占比例不同且差异显著;短花柱花不可育,中花柱花与长花柱花为可育花。研究表明,大量不育花的存在、早春稀少的传粉昆虫以及荒漠地区恶劣的气候环境和破碎化的生境是导致蒙古扁桃结实率低下的主要因素。

黑三棱的生物学、药理作用及化学成分研究进展

黑三棱是中国常用中药材之一,文中综述了近年来黑三棱的生物学特性、药理作用、化学成分以及炮制方法与生药鉴别的研究进展,为黑三棱的进一步开发、利用奠定基础。

环境·生物因子对番茄生长发育影响的研究进展

除了作为人类的营养来源外,番茄作为生物反应器等方面的研究日益深入,应用价值越来越受到人们的关注。因此,该研究综述了温度、水分、光照、空气、化学物质以及生物因子对番茄生长发育影响的最新研究进展,为番茄的人工栽培、种质改造及病虫害防治等工作提供参考。

东亚七筋姑的传粉生物学研究

以陕西镇坪化龙山地区的东亚七筋姑自然居群为对象,通过重力玻片法、套袋法和人工授粉对其进行连续的传粉生物学观察和研究,以明确其散粉规律和繁育系统.结果表明,东亚七筋姑的花期在五月中下旬,单花花期2～3d,整个花序的花期随花序大小的不同而异,一般为3～7d;东亚七筋姑为虫媒传粉,其访花昆虫大多为小型昆虫,主要种类有小型甲虫、蚁类和蝇类等;东亚七筋姑自花传粉是可育的,存在异花传粉,不存在无融合生殖,自然条件下结籽率为58%,人工异株异花授粉结籽率为82%.可见,东亚七筋姑的繁育系统为兼性异交类型,需要传粉者.

嗜金微生物研究概况

在广泛文献检索基础上,对嗜金微生物的种属、富集黄金的机理、工业应用价值及潜力进行了概述,为进一步对其开发利用提供科学资料。

月季“圣斯威辛”的快速繁殖技术研究

以"圣斯威辛"(Rosa‘St.Stwithum’)月季带腋芽的节为外植体,研究了"圣斯威辛"月季不定芽试管生根的最佳条件。结果表明:0.05mg/L NAA和3mg/L 6-BA的MS培养基中月季不定芽的诱导频率和平均每个外植体上的芽数最多,分别为95.7%和8.4个。将生长至3cm的不定芽转移到生根培养基上诱导根的形成,无激素处理的月季组培苗的平均每个不定芽生根数为6.3条,根诱导频率92%,平均根长为3.7cm。该结果与添加低浓度的IBA(0.2mg/L)对根的诱导效果没有显著性差异。高浓度的NAA和IBA诱导出大量的愈伤组织,不定根的数量显著减少。将生根的月季试管苗移栽到温室中,移栽成活率达到92%。

糖组学研究技术进展

糖组学研究通常包括聚糖组的分离与纯化、糖链组的分离和富集糖链的结构解析和定量以及糖链的性质和功能研究。根据糖蛋白组、蛋白聚糖组和糖脂组生物化学性质的不同,可相应采用分步沉淀法、硼酸亲和法、二氧化钛法、亲和层析法、体积排阻法、凝胶过滤层析和柱层析法等进行分离与纯化,进而通过植物凝集素、亲水色谱和固相萃取等技术富集高纯度且特异性的糖链。通过凝集素芯片技术、各种生物质谱及其联用并辅以糖链的衍生化标记对糖链进行结构解析,并用同位素标记法和代谢标记法对糖链进行相对定量。最后,借助糖链结构解析软件工具及糖链相关数据库进行生物信息学分析,可对糖链的生物学功能进行更全面的解析。本文对复合糖的分离纯化、结构分析以及糖组生物信息研究方法进行了综述。

黑色花卉资源概况研究

在广泛检索文献的基础上,叙述了黑色花卉的概况,综述了其主要种类和利用价值,提供了深入研究开发此类植物资源的科学依据。

茯苓和茯苓皮水和乙醇提取物的利尿作用及其活性成分的分离鉴定

目的采用化学成分的提取分离与利尿活性评价相结合方法,寻找茯苓和茯苓皮利尿活性部位并确定活性部位的主要化学成分。方法口服给予生理盐水负荷正常大鼠不同剂量的茯苓和茯苓皮的水或乙醇提取物,记录6 h尿量,测定尿液的pH值及电解质Na+,K+和Cl-的含量,并采用色谱分离法对活性部位进行化学成分分离,用NMR法对分离的化学成分进行结构鉴定。结果与对照组相比,口服茯苓皮乙醇提取物150,300和600 mg·kg-1大鼠尿量分别增加29%,21%和42%(P<0.01),K+排泄量分别减少18%,22%和27%(P<0.01),各组Na+/K+比值均升高;600 mg·kg-1组大鼠尿液Na+排泄量显著增加14%(P<0.05);茯苓水提取物50,100和200 mg·kg-1,茯苓乙醇提取物62.5,125和250 mg·kg-1及茯苓皮水提取物75,150和300 mg·kg-1无利尿作用。化学成分提取与分离结果显示,茯苓皮乙醇提取物主要包含四环三萜类化合物茯苓酸、猪苓酸C、去氢土莫酸、3-表去氢土莫酸、去氢齿孔酸、齿孔酸和去氢齿孔酮酸等。结论茯苓皮乙醇提取物具有显著的利尿作用,其主要化学成分为四环三萜类化合物。

泽泻药理与毒理作用的研究进展

泽泻是中医临床常用的一味利水渗湿药,具有利水渗湿、泄热、化浊降脂等功效。在临床上,泽泻主要用于治疗水肿、小便不利、高血脂、肾结石等症,但同时也具有一定的毒性。该文在查阅相关文献资料的基础上,对泽泻的药理与毒理作用进行了总结,以期为泽泻的进一步研究及临床合理用药提供参考。

黑果枸杞叶多糖LRLP3的结构、抗氧化活性及免疫活性

黑果枸杞叶经水提醇沉,离子交换柱层析和凝胶柱层析分离纯化,得到平均分子量为79400的均一多糖组分LRLP3.对该多糖的理化性质、结构、抗氧化活性及免疫活性的研究结果表明,LRLP3为多分支结构,主链为(1→3)βGalp,大部分半乳糖6位存在分支;支链由(1→6)βGalp,(1→4)βGalp,(1→3)βAraf,(1→3)αArap,(1→5)βAraf和(1→2,4)αRhap组成,非还原末端由αAraf,βGalp和βGlcp组成.LRLP3具有较强的还原能力,可显著清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基,有效抑制Cu2+/H2O2诱导的蛋白氧化损伤和H2O2诱导的细胞氧化损伤.LRLP3在体外对未经诱导和经刀豆蛋白(Con A)或脂多糖(LPS)诱导的小鼠脾细胞增殖均有促进作用.

ISSR-PCR鉴别绞股蓝属7种植物

目的采用ISSR-PCR技术对绞股蓝属(Gynostemma B1.)绞股蓝G.pentaphyllum、五柱绞股蓝G.pen- tagynum、心籽绞股蓝G.cardiospermum、长梗绞股蓝G.longipes、喙果绞股蓝G.yixingense、疏花绞股蓝G.laxi- florum、广西绞股蓝G.guangxieme 7种药用植物进行DNA分子水平鉴定。方法CTAB法提取绞股蓝属植物总DNA,以57条ISSR引物进行PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳分析。结果筛选出产物清晰稳定的14条引物,其中引物UBC-873与UBC-895具有较高的多态性条带比率,均可独立区分7种绞股蓝属植物。结论ISSR-PCR分析可有效区分鉴别常见绞股蓝属植物。

龙骨药材的鉴别及药学研究进展

在广泛检索文献的基础上,对龙骨药材的鉴别、龙骨的药学成分、药理作用及现代临床研究进行了概述,并探讨了龙骨的药学应用前景。结果表明,目前龙骨的临床作用研究主要集中在以下几个方剂:柴胡龙骨牡蛎汤、桂枝甘草龙骨牡蛎汤等,其他方剂则研究较少,对于龙骨单剂临床作用的研究还不够成熟。该研究为龙骨的深入开发利用提供了基础资料。

三棱黄酮提取及其抗HeLa宫颈癌成分的HPLC分析

以黑三棱科植物三棱(Sparganium stoloniferum)块茎饮片为材料,分别以水提醇沉、75%甲醇浸提、100%甲醇浸提、乙酸乙酯萃取4种方法制备三棱黄酮,通过比较不同黄酮提取物对HeLa细胞增殖活性的抑制效率,确定三棱黄酮抗癌有效成分的最佳提取方法,并进一步对三棱黄酮抗癌有效成分进行高效液相(HPLC)指纹图谱分析,以优化三棱黄酮抗HeLa宫颈癌有效成分的分析检测方法。实验结果显示,除乙酸乙酯萃取样品(n=6,P>0.05)外,其他制备方法所得三棱黄酮的主要成分相近,且在MTT及细胞骨架形态实验中均可显著(n=6,P<0.01)抑制所培养HeLa细胞株的增殖活性、诱导细胞的接触生长状态消失、微丝突触减少及细胞形态不规则改变,对HeLa细胞的增殖抑制作用强度依次为:水相浸膏>75%甲醇浸膏>100%甲醇浸膏;三棱黄酮水相浸膏与100%甲醇浸膏的HPLC指纹图谱共识别18个色谱峰,其中10个为共有峰,7个色谱峰表现为与抗癌活性相对应的含量变化。

胖大海药学研究概况

在广泛文献检索基础上,对胖大海的种属、成分、药理、毒理、临床应用及禁忌等方面进行了综述,为其进一步开发利用提供资料。

应用植物形态学和AFLP分子标记鉴别陕西漆树品种

应用植物形态学和AFLP分子标记,对陕西8个漆树栽培品种和6个野生居群进行了鉴别.结果表明:从26个形态性状中筛选出3个主成分,其中:第1主成分指标7个(第5小叶长/宽、花瓣长、花瓣宽、花丝长、花丝直径、花药长和宽)贡献率为30.383%;第2主成分指标5个(小叶数、复叶长、复叶柄长、第5小叶叶柄长、顶端小叶叶柄长)贡献率为19.321%;第3主成分指标2个(第5小叶顶角角度、顶端小叶顶角角度)贡献率为13.777%.筛选的8对AFLP引物组合,均可将漆树14个样品完全区分开.植物形态学和AFLP分子标记相结合,不仅可用于漆树不同品种及野生居群间的鉴别,而且可反映其相互间的亲缘关系.

藏药角茴香属植物药学研究概况

角茴香属主要有直立角茴香(H.erectum L.)、节裂角茴香(H.leptumHook.fet Thoms.)等,使传统的藏药植物。但其药用价值、临床应用有待于进一步深入研究。在广泛文献检索基础上,笔者对中药角茴香的化学成分、药理作用及临床应用等进展作了综述,为角茴香的利用提供了参考。

大腹皮药学研究概况

在广泛文献检索基础上,对大腹皮的药理作用、临床应用及应用注意事项等进行了概述。大腹皮具有多种明显的药理作用及药用价值,今后应该加强对其药理作用的研究,以研发出更多安全有效、质量易控的大腹皮新制剂。