心肌成纤维细胞DDR2对整合素β1调控的机制研究

目的探究心肌成纤维细胞盘状结构域受体(discoid domain receptor 2,DDR2)对于整合素(integrin)β1表达的调控分子机制。方法体外培养成年SD大鼠心肌成纤维细胞,使用RNA干扰和高表达载体分别下调和上调DDR2的表达,Western blot法检测血管紧张素Ⅱ(angiogensinⅡ,AngⅡ)作用细胞后其整合素β1、细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase,Erk1/2)和转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表达水平。其后使用Erk1/2的特异性抑制剂PD98059以及TGF-β1的RNA干扰阻断相应信号通路,Western blot法再次检测AngⅡ刺激细胞后整合素β1的表达变化。结果AngⅡ可以上调心肌成纤维细胞DDR2以及整合素β1的表达水平。DDR2的RNA干扰可以阻断AngⅡ引起的心肌成纤维细胞整合素β1的升高效应,同时降低了磷酸化Erk1/2(p-Erk1/2)和TGF-β1的表达水平。使用Erk1/2的特异性抑制剂PD98059可以削弱AngⅡ引起的心肌成纤维细胞TGF-β1和整合素β1的升高效应,而TGF-β1的RNA干扰可以削弱AngⅡ引起的心肌成纤维细胞整合素β1的升高效应。高表达DDR2可以显著性升高TGF-β1和整合素β1的表达水平,而TGF-β1的RNA干扰可以削弱DDR2上调引起的心肌成纤维细胞整合素β1的升高效应。结论AngⅡ通过DDR2-Erk1/2-TGF-β1信号途径调控心肌成纤维细胞整合素β1的表达水平,该信号途径可能在心肌损伤后结构改建中起着重要作用。