大鼠脊髓小胶质细胞P2X4的表达和糖尿病病理性神经痛大鼠炎症反应和疼痛阈值的关系

目的:探究大鼠脊髓小胶质细胞P2X4的表达和糖尿病病理性神经痛大鼠炎症反应和疼痛阈值的关系。方法:通过高脂饮食结合链脲佐菌素注射诱导糖尿病病理性神经痛大鼠模型并分为3组:对照组(正常大鼠,腹腔注射载体柠檬酸盐缓冲液0.25 m L/kg),模型组(糖尿病病理性疼痛模型,同上注射,n=15)和抑制剂组(大鼠糖尿病病理性模型,过鞘内导管注射米诺环素),共28 d。通过MWT评估对机械刺激的手掌反应。通过双极针电极检测实验大鼠的运动神经传导速速。通过蛋白印迹分析P2X4和BDNF蛋白表达。通过RT-PCR分析炎症因子IL-1β、TNF-α和NLRP3的m RNA表达。通过蛋白印迹分析p38MAPK和p-p38MAPK的蛋白表达。结果:第2week、4week和6week,模型组MWT较对照组降低(P<0.05),抑制剂组MWT较模型组升高(P<0.05)。第2 week,个实验组大鼠MNCV比较无差异(P>0.05),第4week和第6week,模型组MNCV较对照组降低(P<0.05),抑制剂组MNCV较模型组升高(P<0.05)。模型组P2X4和BDNF蛋白表达较对照组升高(P<0.05),抑制剂组P2X4和BDNF蛋白表达较模型组降低(P<0.05),模型组P2X4和BDNF m RNA表达较对照组升高(P<0.05),抑制剂组P2X4和BDNF m RNA表达较模型组降低(P<0.05)。模型组IL-1β、TNF-α和NLRP3的m RNA表达较对照组升高(P<0.05),抑制剂组IL-1β、TNF-α和NLRP3的m RNA表达较抑制剂组降低(P<0.05)。模型组p-p38MAPK蛋白表达较对照组升高(P<0.05),抑制剂组p-p38MAPK蛋白表达较模型组降低(P<0.05),各实验组大鼠p38MAPK蛋白表达无差异(P>0.05)。结论:大鼠脊髓小胶质细胞P2X4-BDNF信号在DNP中起重要作用,并且P2X4在DNP期间激活的脊髓小胶质细胞中表达升高,抑制小胶质细胞激活能显著降低P2X4表达和炎症水平,可防止热痛觉过敏并增加大鼠疼痛阈值。

糖尿病病理性神经痛大鼠坐骨神经中miR-133a的上调对疼痛阈值的影响及机制

目的:探究糖尿病病理性神经痛大鼠坐骨神经中mi R-133a的上调对疼痛阈值的影响及机制。方法:使用NGS测序和定量PCR分析糖尿病病理性神经痛大鼠坐骨神经中的相关mi RNA表达,预测潜在下游目标。使用mi R-133a-3p转染的RSC96细胞进行体外实验。使用微蛋白质印迹和蛋白质印迹以及免疫荧光分析验证mi R-133a-3p的作用。使用mi R-133a-3p拮抗剂分析mi R-133a-3p与DNP之间的关联。结果:mi R-133a-3p模拟物增加了RSC96细胞中VEGFR-2、p38αMAPK、TRAF-6和PIAS3的表达,并降低了NFκB p50和MKP3的表达(P<0.05)。在正常大鼠中,AAV-mi R-133a-3p通过神经内注射到坐骨神经中可诱导机械性异常性疼痛和p-p38 MAPK激活(P<0.05)。在DM大鼠中,mi R-133a-3p拮抗剂给药可减轻DNP并下调p-p38磷酸化(P<0.05)。结论:坐骨神经中mi R-133a-3p的过度表达会引起这种疼痛,mi R-133a-3p可能是患有神经性疼痛的患者的有用治疗靶点。