陕西地区甲基丙二酸血症的新生儿筛查及基因突变分析

目的了解陕西地区新生儿甲基丙二酸血症的发病率、生化分型和基因突变谱。方法回顾性分析2014年1月至2019年12月在西北妇女儿童医院进行新生儿筛查的146152例新生儿中确诊为甲基丙二酸血症的患儿的临床表现和随访情况,以及酰基肉碱水平和基因突变情况。根据是否合并同型半胱氨酸升高,分为单纯型和合并型甲基丙二酸血症,并与复查时排除诊断的患儿(对照组)比较。采用Kruskal-Wallis检验和Mann-Whitney U检验进行统计学分析。结果(1)共21例患儿确诊,发病率为1/6960;单纯型11例(52.4%),合并型10例(47.6%)。8例单纯型患儿在1月龄以内发病,主要临床表现为喂养困难、呕吐、嗜睡、反应差和感染,其中5例患儿死亡。合并型患儿确诊前均未出现典型临床表现,随访发育均未见异常。(2)单纯型和合并型患儿的血丙酰肉碱、丙酰肉碱/乙酰肉碱比值及丙酰肉碱/游离肉碱比值均高于对照组[M(min~max),9.26µmol/L(3.70~37.78µmol/L)、7.27µmol/L(3.58~13.62µmol/L)与4.51µmol/L(1.48~8.69µmol/L),H=23.239;1.12(0.32~2.43)、0.74(0.36~1.90)与0.25(0.09~0.45),H=47.061;0.94(0.12~1.92)、0.56(0.18~1.03)与0.17(0.06~0.38),H=36.868;P值均<0.001]。合并型患儿的血蛋氨酸水平明显低于单纯型患儿[7.64µmol/L(3.40~19.25µmol/L)与24.22µmol/L(10.73~56.55µmol/L),U=3.000,P<0.001]。(3)21例患儿均检测到致病基因的复合杂合突变或纯合突变,包括15种MMUT基因突变和13种MMACHC基因突变。单纯型最常见的突变为MMUT基因c.323G>A(p.Arg108His),携带频率为13.6%;检出c.1676+11A>G为未报道的突变位点,为临床意义不明确的突变。合并型最常见的突变为MMACHC基因c.609G>A(p.Trp203Ter)和c.567dupT(p.Ile190fs),携带频率均为20.0%。检出c.430-2A>C和c.648_650delAGA(p.216_217delSEinsS)为未报道的突变,为疑似致病突变。结论本地区甲基丙二酸血症并不罕见。单纯型甲基丙二酸血症患儿病情更重。MMACHC基因c.609G>A和c.567dupT以及MMUT基因c.323G>A等突变热点的发现,为后续开展基因筛查、遗传咨询及产前诊断,有效降低甲基丙二酸血症的致死率和致残率奠定基础。

新一代非衍生化串联质谱法检测多种氨基酸和酰基肉碱的性能验证

目的评价新一代非衍生化串联质谱法(NeoBase^(TM) 2)检测13种氨基酸和16种酰基肉碱的性能,为其在临床的应用提供参考依据。方法检测NeoBase^(TM) 2试剂自带的已知浓度的高、低水平质控样本,进行精密度和准确度评价。对高水平质控样本进行倍比稀释,分析不同稀释浓度质控样本回收率。结果29种指标的精密度均可接受,低、高水平质控品各指标的批内变异系数分别为0.77%~6.15%和0.70%~4.38%,批间变异系数分别为1.00%~7.26%和0.76%~4.80%,均小于1/4允许总误差。除精氨琥珀酸外,其余指标的相对偏倚为0.16%~12.57%,小于1/2允许总误差,准确度可接受。除精氨琥珀酸和戊二酰肉碱外,其余指标的稀释回收率为80%~120%,实测值与预测值之间的相关系数(r)均大于0.9900。结论Neo⁃Base^(TM) 2检测多种氨基酸和酰基肉碱具有较高的精密度和准确度,有临床应用价值,可用于新生儿遗传代谢性疾病的筛查。