响应重力负荷变化的抗肌萎缩表达载体构建

目的:为了验证‘肌肉生长抑制素’启动子(PM)对去负荷(失重)的响应能力,观察PM调控下的抗萎缩蛋白(mM)表达载体在肌细胞去负荷时的表达水平及抗萎缩活性。方法:首先,构建了PM调控下的荧光素酶表达载体(pGL3-PM-Luc),检测模拟失重下荧光素酶基因在肌细胞中的表达水平,验证PM对重力负荷变化的响应。随后,构建了PM调控下的mM表达载体‘pGL3-PM-mM’,观察模拟失重下mM在肌细胞中的表达及其对肌细胞增殖的影响。结果:模拟失重下,‘pGL3-PM-Luc’转染的肌细胞荧光素酶表达提高了29%,‘pGL3-PM-mM’载体转染的肌细胞,mM表达上调了2.6倍,细胞增殖活性提高了24%。结论:PM在失重条件下可开启下游基因的表达,依此特点构建的mM表达载体,其mM的表达能随负荷减少而增加,且可促进肌细胞的增殖活性。