不同海拔高度世居健康藏族人群体内氧自由基代谢的研究

目的研究不同海拔高度世居健康藏族人群体内氧自由基代谢情况。方法选取了3个不同海拔高度的健康藏族居民作为研究对象,分别为海拔3850m、海拔2500m、海拔1507m组。采用紫外可见分光光度法检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力及丙二醛(MDA)含量。结果海拔1507、2500、3850m组血清中SOD、GSH-Px活力和MDA含量比较,无性别差异(P>0.05)。与海拔1507m组比较,海拔2500、3850m组血清中SOD、GSH-Px活力较低,MDA含量较高,差异均有统计学意义(P<0.05);海拔3850m组血清中SOD、GSH-Px活力低于海拔2500m组,MDA含量高于海拔2500m组,差异均有统计学意义(P<0.01)。随着居住地海拔高度的升高,血清中SOD、GSH-Px活力呈下降趋势,MDA含量呈上升趋势。结论世居高原健康藏族人群体内存在氧化应激,对世居高原的藏族人群可考虑给予自由基清除剂,以预防高原病的发生。

内皮素-1对大鼠血管平滑肌细胞产生MCP-1的影响及其机制

目的:观察内皮素-1(ET-1)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)产生单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的影响及其机制。方法:培养大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)。细胞分为2组:ET-1刺激组:以不同浓度ET-1刺激VSMCs不同时间;阻断剂干预组:VSMCs分别与不同阻断剂[ET_AR、ET_BR阻断剂BQ123、BQ788,抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC),ERK、p38MAPK、JNK及NF-κB抑制剂PD98059、SB203580、SP600125及PDTC]预先孵育30 min,再加入ET-1刺激24 h。在预定时间,以酶联免疫吸附(ELISA)法、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法分别测定不同因素下VSMCs MCP-1蛋白质及mRNA表达量。VSMCs分别与不同阻断剂(BQ123、BQ788、NAC、PD98059、SB203580及SP600125预先孵育20 min,再加入ET-1刺激5 min,免疫印迹(WB)法测定VSMCs胞浆中细胞外调节蛋白激酶(ERK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)及其各自磷酸化蛋白质的水平。各项检测均重复3次。结果:ET-1能刺激VSMCs MCP-1蛋白质及mRNA表达,其表达量随ET-1浓度及刺激时间的增加呈升高趋势(P<0.05,P<0.01);BQ123、NAC、PD98059、SB203580及PDTC能显著抑制ET-1诱导的大鼠VSMCs MCP-1蛋白质及mRNA表达(P<0.01),而BQ788及SP600125对此作用无明显影响。BQ123、NAC与PD98059或SB203580能分别抑制ET-1刺激后VSMCs胞浆内ERK及p38MAPK的磷酸化(P<0.05,P<0.01),而ET-1对JNK的磷酸化无明显激活作用。结论:ET-1通过ETAR、ROS、ERK、p38MAPK及NF-κB诱导大鼠VSMCs产生MCP-1。

睾丸支持细胞生殖毒性研究进展

睾丸支持细胞是雄性动物睾丸曲细精管内唯一的体细胞,可以维持和调节正常的生精过程,在精子发育成熟过程中具有极为重要的作用。睾丸支持细胞结构和功能的完整性对生精细胞增殖和成熟十分关键,其改变可导致生精细胞脱落和死亡。本研究将近年来关于环境毒物、药物通过睾丸支持细胞产生生殖毒性的机制研究进行综述。

肾癌干细胞与表观遗传学调控研究进展

针对肿瘤干细胞进行靶向治疗是遏止肿瘤复发和转移的关键。表观遗传学在干细胞发育及体细胞重编程中的重要作用提示其可能在肿瘤干细胞的发生发展中发挥作用。表观基因组包含DNA甲基化、组蛋白修饰、染色体重塑和非编码RNA调控的基因表达模式,在肾癌细胞中有多种表观基因组的异常改变。目前已成功的从肾细胞癌中获得SP细胞、细胞囊球和CD105+细胞等具肿瘤干细胞属性的细胞亚群。随着对肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)遗传研究的不断深入,发现DNA序列以外的调控机制异常在肿瘤的发生发展过程中起重要的作用。对肾癌发生相关的表观遗传学的认识有助于推进新的治疗方式,而对发现新的预后和早期诊断标志将起更重要的作用。本文对目前肾癌干细胞和表观遗传学相关领域的最新研究,特别是肾癌干细胞发生和发展过程中表观遗传学可能的调控作用及机制进行综述。

内皮素-1诱导大鼠血管平滑肌细胞产生C-反应蛋白的作用

目的观察内皮素-1(ET-1)诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)产生C-反应蛋白(CRP)的作用及其机制。方法培养大鼠VSMCs,以不同浓度ET-1刺激VSMCs,并用ETA拮抗剂BQ123、抗氧化剂PDTC、p38MAPK抑制剂SB203580及ETB阻断剂BQ788进行干预,免疫细胞化学法及半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法分别测定不同浓度及不同干预因素下VSMCs中CRP蛋白及mRNA的表达。结果 ET-1能刺激VSMCs CRP蛋白及mRNA的表达增强,其效应呈浓度依赖性;BQ123、PDTC及SB203580能明显减少ET-1诱导的大鼠VSMCs CRP蛋白及mRNA的表达,而BQ788对此作用无明显影响。结论 ET-1通过ETA、活性氧(ROS)、p38MAPK诱导大鼠VSMCs产生CRP。

人工合成胸腺素α1静脉注射后在小鼠和大鼠体内的分布与代谢

目的研究人工合成胸腺素α1(synthetic thymosin alpha 1,sTα1)在小鼠和大鼠体内静脉注射的分布和排泄特点。方法用竞争ELISA法测定sTα1在小鼠体内静脉注射后不同时间点组织中的药物浓度和不同时间段内尿液药物累计量;同法检测sTα1在大鼠体内静脉注射后不同时间段内胆汁药物累计量。结果分布特点:小鼠sTα1静脉注射后15 min时胸腺中药物分布最高,浓度为(1 533.4±712.4)ng/g,肝、脾、胸腺次之,在脑中含量较低;静脉注射后30 min时胸腺组织中药物分布依然最高,浓度为(25 583.4±6 244.7)ng/g,脾、肾、肝中次之。sTα1静脉注射后1 h时肾脏中药物分布最高,浓度为(6 164.1±4 821.8)ng/g,胸腺浓度为(5 665.8±3 881.9)ng/g。静脉注射后2 h时肾脏分布最高,浓度为(1 408.0±1 252.7)ng/g,而胸腺中浓度仅为(306.4±268.6)ng/g,其他组织中有少量分布,脑组织中的药物浓度接近血浆药物浓度,说明sTα1可通过血脑屏障。排泄特点:小鼠静脉注射sTα1 1 mg/kg后,12 h尿累计排泄量为给药量的26.35%,大鼠静脉注射0.5 mg/kg sTα1后,胆汁中未见有药物排出。结论小鼠静脉注射sTα1后可以浓集于免疫器官胸腺和脾脏内,且可进入血脑屏障,以原型经肾排泄为主要排泄途径。

天然抗氧化剂抗血管生成作用的研究进展

血管生成(Angiogenesis)是指从已有的血管上长出新的毛细血管的过程.在这一过程中,活性氧作为信号分子起着非常重要的作用.因此从天然抗氧化剂中寻找新的血管生成抑制剂已成为近年来研究的热点,我们综述了近年来抗氧化剂的抗血管生成作用、机制以及应用前景的国内外最新研究进展.

NOX家族在X射线诱导PC-3细胞损伤中的作用

目的:研究NOX家族在X射线诱导人雄激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞损伤中的作用,寻找放疗增敏的潜在靶点。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测0、1、2、4和12 Gy X射线照射后24、48和96 h PC-3细胞存活率;采用DCFH-DA法检测0、1和4 Gy X射线照射后15、30、60和120 min时PC-3细胞中ROS的生成量;采用Western blot方法检测0、1和4 Gy X射线照射后PC-3细胞中NOX1～NOX5 5个亚型蛋白的表达情况。结果:1、2、4和12 Gy X射线照射PC-3细胞后96 h,与未照射组比较,PC-3细胞的存活率明显下降(P<0.05)。1和4 Gy X射线照射PC-3细胞60 min后,细胞内ROS水平最高,NOX抑制剂DPI及抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理可以减少ROS的生成。1和4 Gy X射线照射后PC-3细胞中NOX1、NOX2和NOX5蛋白表达显著增加。结论:X射线诱导NOX1、NOX2和NOX5蛋白过表达,细胞内产生过量的ROS是X射线诱导PC-3细胞损伤的机制之一。

异鼠李素的心血管药理作用研究进展

异鼠李素(Isorhamnetin,Iso)是一种已知黄酮类化合物,普遍发现于银杏、沙棘等多种植物的花、叶和果子中。有研究发现,Iso在保护血管内皮细胞、抑制脂肪分化、耐缺氧、抗肿瘤、抗炎及抗病毒等方面具有较好的作用。近年来,由于各种因素的作用,动脉粥样硬化及其相关心血管疾病的发病率和死亡率逐渐增加,使人们在心理和生理上都受到很大影响。而其发生机制除与遗传因素有关外,与不良生活习惯导致的内皮细胞氧化损伤、血管慢性炎症反应、脂质堆积等也有密切联系。本文综述了Iso的心血管药理作用,以期为更进一步的研究和开发Iso提供依据,并更好地将其应用于临床心血管疾病的防治。

极化液对大鼠不同血糖浓度下心肌缺血再灌注的影响

目的:探讨不同血糖浓度下大鼠心肌缺血再灌注(MI/R)心肌损伤的程度及明确极化液(GIK)对高血糖心肌MI/R的保护作用.方法:将12只健康SD大鼠,随机分为4组,每组3只,即对照组、GIK组、高血糖组、GIK+高血糖组.每组大鼠结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min.采用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测大鼠缺血再灌注心肌的心肌梗死面积.动态观察Ⅱ导联心电图QRS波、T波、ST段和心率变化.结果:TTC染色显示每组大鼠心肌都有梗死,心肌梗死面积高血糖组>GIK+高血糖组>对照组>GIK组;心电图显示高血糖大鼠心肌缺血期ST段明显抬高,再灌注后实验动物出现心律失常.GIK对正常血糖大鼠MI/R具有明显保护作用.结论:GIK对高血糖大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用有限,而对正常血糖大鼠MI/R损伤有较好的保护作用.

尾加压素Ⅱ与动脉粥样硬化

动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)是血管增殖性疾病的主要病理生理基础。AS的基本病理过程是动脉血管内膜脂质沉积、灶状纤维化及粥样硬化斑块形成,导致动脉血管壁变硬,管腔狭窄,引起相应组织器官的缺血、缺氧的病理性改变及血栓栓塞性疾病。在此病变过程中一些血管活性物质,如尾加压素Ⅱ(urotensin Ⅱ, UⅡ)、内皮素-1、血管紧张素Ⅱ等,均参与了血管的慢性炎症反应,并在其中发挥了尤为重要的作用。已有研究表明:UⅡ是目前已知最强的缩血管活性物质,在AS发生、发展过程中起着非常重要的作用。在AS发展过程中,斑块中及血浆UⅡ水平均呈动态性增高。因此,研讨UⅡ在AS等血管增殖性疾病中的作用及其与AS发生过程的相关机制,将为临床预防AS及其相关心脑血管疾病提供一些新的治疗途径和靶点。本文主要综述了UⅡ的生物学作用及其在AS发生、发展过程中相关的病理生理作用。

表没食子儿茶素没食子酸酯对大鼠急性心肌缺血作用研究

目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对垂体后叶素(Pit)所致大鼠急性心肌缺血的保护作用。方法:采用大鼠舌下静脉注射Pit复制急性心肌缺血模型,观察EGCG(40 mg/kg、20 mg/kg、10 mg/kg)对Ⅱ导联心电图(ECG)ST段、急性缺血性心律失常、血清心肌酶学及心肌脂质过氧化的影响。结果:EGCG(40 mg/kg、20 mg/kg)能降低Pit所致的急性心肌缺血大鼠ECGST段的抬高,对抗急性缺血性心律失常,减少心肌细胞磷酸肌酸激酶和乳酸脱氢酶的释放,提高心肌组织中超氧化物歧化酶活性,降低心肌组织丙二醛含量。结论:EGCG对大鼠急性心肌缺血具有保护作用,其机制可能与清除自由基,抑制脂质过氧化反应有关。

氟达拉滨联合不同电离辐射对肾癌细胞系786-O杀伤效果观察

目的 比较氟达拉滨（FA）联用不同电离辐射对肾癌细胞系786-O的DNA双链损伤作用异同和药物放射增敏效应。方法 FA联用X射线、重离子处理786-O细胞,流式细胞术检测γH2AX细胞分数和周期分布,中性彗星电泳法检测细胞DNA双链损伤程度,克隆形成法比较不同处理对细胞存活影响。单因素方差分析或Dunnet’s t检验比较组间差异。结果 与单纯给药和单纯照射相比,FA联合不同电离辐射可增强细胞DNA双链损伤程度,表现为γH2AX水平均显著提高（P=0.007、0.001）;重离子联用则可将细胞周期阻滞在放射敏感时相G2＋M期（P=0.020、0.060）,并显著增加G2＋M期γH2AX表达量（P=0.000、0.000）;彗星电泳表明DNA亚致死性损伤随着药物与射线的联合应用而显著增加（P=0.030、0.020;0.020、0.030）;FA可降低放射后细胞克隆形成率（P=0.000、0.030;0.001、0.040）。结论 FA增强X射线和重离子束的放射效应具有不同特点,其增强重离子束的放射杀伤作用尤为明显。

不同海拔高度世居藏族和移居汉族人群氧自由基代谢的对比分析

目的比较不同海拔高度世居健康藏族和移居汉族人群体内氧自由基代谢的差异。方法对不同海拔高度世居健康藏族和移居汉族人群检测血清总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性及活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量。结果世居藏族人群血清 T-AOC、SOD、GSH-PX 活性及 NO 含量均显著高于移居汉族(P<0.05或 P<0.01),其血清 ROS 及 MDA 含量均显著低于移居汉族(P<0.05或 P<0.01)。结论推测高原世居藏族人群体内自由基代谢相对平衡和稳定,可能是遗传适应基础在高原低氧环境的一种表现形式。

动物实验报告规范——ARRIVE 2019简介

作为提高动物实验报告质量的工具,ARRIVE指南自2010年发布以来得到了众多专家学者的认可。限于ARRIVE 2010部分条目过于繁琐,导致研究人员在其实际应用中遇到诸多困难。为此,指南制定专家重新对ARRIVE指南进行修订,即ARRIVE 2019。本文对ARRIVE 2019进行详细介绍,以便于国内研究人员充分利用ARRIVE指南改进动物实验的设计、实施与报告规范,提高动物实验的可重复性和结果的再现性。