内毒素肝损伤过程中枯否细胞NF-κB和AP-1活性变化及其生物学意义

为探讨内毒素肝损伤过程中 ,枯否细胞 (Kupffercells,KCs)内主要转录因子Nuclearfactor kappaB(NF κB)、Activatorprotein 1 (AP 1 )活性的动态变化规律 ,采用健康昆明种小鼠 ,随机分组如下 :Lipopolysaccharide(LPS)尾静脉注射 3h的量效关系 :正常对照组和低 ( 1mg kg)、中 ( 5mg kg)、高 ( 1 0mg kg) 3个内毒素剂量组 ;注射 5mg kgLPS的时效关系 :正常对照、0 .5、1、3、5、8h组 .Electrophoreticmobilityshiftassay(EMSA)法检测KCs中NF κB、AP 1活性 .结果发现 ,内毒素肝损伤过程中 ,KCs中NF κB、AP 1在不同时效和量效均不同程度活化 .提示 ,二者的活化与炎症反应的调控机制紧密相关 。

内毒素肝损伤过程中NF--kB和AP--1活性变化及其对IL--6表达的调控

目的:探讨内毒素肝损伤过程中,Kupffer细胞(KC)内主要转录因子核因子-kB(nuclear factor-kappa B,NF-kB)、活化蛋白-1(activator protein-1,AP-1)活性的变化规律及其在炎细胞因子IL-6表达中的调控作用。方法:健康昆明种小鼠随机分组如下:LPS尾静脉注射3h的量效关系:正常对照组和低(1mg/kg)、中(5mg/kg)、高(10mg/kg)三个内毒素剂量组;注射5mg/kg LPS的时效关系:正常对照、0.5h、1h、3h、5h、8h组;吡咯啉烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)干预组(3h):正常对照、5mg/kg LPS、200mg/kg PDTC、200mg/kg PDTC +5mg/kg LPS.EMSA法检测KC中NF-kB、AP-1活性,ELISA法检测肝组织中IL-6的表达水平。结果:内毒素肝损伤过程中KC中NF-kB活性与LPS处理3h的量效关系为:1mg/kg LPS组即可观察到NF-kB活性,5mg/kg LPS组达峰值,10mg/kgLPS组仍可维持高活化状态;用5mg/kg LPS处理后的时效关系为:0.5h即可检测到NF-kB活性,3h活性明显增强,并可持续到至少8h;PDTC对NF-kB活性有明显抑制作用。内毒素肝损伤过程中KC中AP-1活性与LPS处理3h的量效关系为:1mg/kg LPS组即可检测到AP-1活性,5mg/kg LPS组活性与1mg/kg LPS组相比稍有减弱,10mg/kg LPS组又明显增强,三剂量组AP-1活性与对照组相比均显著增强;用5mg/kg LPS处理后的时效关系为:0.5h即可检测到AP-1活性,1h达峰值,3h减弱后,5h增强,8h又有所减弱,表现出明显的波动现象,但各时相点AP-1活性均显著强于对照;PDTC对AP-1活性有明显促进作用。内毒素肝损伤过程中,内毒素的不同剂量和作用的不同时间肝组织内IL-6水平均表现为先升高后降低的变化趋势,且各处理组均明显高于正常对照;PDTC能明显抑制IL-6的释放。相关分析显示IL-6水平的变化与NF-kB活性变化呈显著正相关,与AP-1活性变化则无明显相关性。结论:内毒素肝损伤过程中,KC中NF-kB、AP-1均不同程度活化,但NF-kB对IL-5的表达可能具有一定的调控作用,而AP-1可能并不参与IL-6表达的调控。

内皮细胞代谢与剪切作用时间的相关性

应用平行平板流动腔装置研究毛细血管内皮细胞内皮素（ＥＴ）代谢与剪切作用时间的相关关系。将培养的人胚肾小球血管单层内皮细胞置于剪应力分别为０、５×１０－５、１×１０－４和１．５×１０－４Ｎ／ｃｍ２的定常层流中剪切作用２５小时，样品中的ＥＴ分泌量用放射免疫法测定。结果表明，剪切作用时间与内皮细胞ＥＴ的代谢活动有密切相关，ＥＴ分泌量高低不仅取决于剪切应力大小，而且还取决于剪切作用时间长短。ＥＴ分泌量随着剪切作用时间的增减而非线性地增减，在０Ｎ／ｃｍ２、５×１０－５Ｎ／ｃｍ２、１×１０－４Ｎ／ｃｍ２、１．５×１０－４Ｎ／ｃｍ２时ＥＴ累积分泌量最快速最关键的时段分别是流动剪切后７．８－１７．７ｈ、５．３－１６．１ｈ、６．１－１５．６ｈ、８．１－２２．３ｈ；产生最大分泌率时刻相应发生在流动剪切后１２．８ｈ、１０．７ｈ、１０．９ｈ、１５．２ｈ，相应的最大分泌率分别为４５．４１ｐｇ／ｃｍ２．ｈ、４９．１ｐｇ／ｃｍ２．ｈ、７２．５ｐｇ／ｃｍ２．ｈ、３３．５ｐｇ／ｃｍ２．ｈＥＴ累积分泌量和分泌速率随剪切作用时间变化的关系可用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ方程来描述。获得了反映ＥＴ分泌规律的大量特征方程和特征数，为了解体内发生于血管壁的病理生?

LPS对小鼠枯否细胞核因子-κB活性的促进效应

为探讨细菌胞壁主要内毒素脂多糖 (Lipopolysaccharide ,LPS)对与炎症反应紧密相关的核因子 -κB(NF -κB)活性的影响 ,从正常对照和不同剂量的LPS刺激后不同时相的小鼠中分离出其肝脏枯否细胞 (Kupffercell,KC)。用凝胶迁移率改变分析法 (Electrophoreticmobilityshiftassay ,EMSA)检测KC核提取物中NF -κB的活化与LPS的量效、时效关系。结果发现 :刺激 3h后 ,低剂量的 (1mg/kg)LPS ,即可检测到NF -κB活性 ;中剂量组 (5mg/kg)的NF -κB活性达峰值 ,高剂量组 (10mg/kg)则仍可维持NF -κB的活化状态。中剂量 (5mg/kg)刺激 0 .5h即可检测到NF -κB活性 ,3h时NF -κB活性达峰值 ,并可持续到至少 8h。表明抑制NF -κB的过度活化可能有助于炎症的治疗。

PDTC对LPS诱导小鼠肝组织IL-6表达的抑制作用

以小鼠肝组织为材料,采用酶联免疫吸附测定法检测不同剂量LPS诱导肝组织中IL-6水平的动态变化,并观察了抗氧化剂吡咯啉烷二硫代氨基甲酸盐(Pyrrolidinedithiocarba-mate,PDTC)对肝组织IL-6表达的影响。结果表明:注射5mg/kgLPS后3h,肝组织IL-6的水平达峰值,PDTC能有效抑制肝组织中IL-6的表达。因此,抗氧化剂有望成为炎症疾病治疗中一类很有应用前景的药物。

在非光合条件下外源蔗糖能促进蚕豆的气孔开放(英文)

:蚕豆植株经暗饥饿处理 40h后 ,取其下表皮 ,再用超声波“原位分离”下表皮上的保卫细胞对 ,然后在无菌、非光合条件下 ,用外源蔗糖处理蚕豆下表皮上的保卫细胞对 ,考察其对气孔开放的效应。结果发现 ,在 1d的无菌培养过程中 ,蔗糖显著促进了气孔的开放。 1 0 0mmol/L的蔗糖在 1 0mmol/L的MES NaOH/KOH (pH 6 .1 )缓冲液中 ,开度分别增加 2 .0 /2 .6 μm ;在 1 μmol/L的气孔开放促进剂fusicoccin (FC)的存在下 ,1 0 0mmol/L的蔗糖在MES NaOH/KOH (pH 6 .1 )缓冲液中分别增加开度 5 .0 /5 .5 μm。不同浓度 (5 2 0 0mmol/L)的蔗糖处理结果表明 :气孔开度的增加与蔗糖浓度呈一定的正相关 ,浓度为 1 0 0mmol/L的蔗糖处理表现出最大促进作用。同时还初步观察到 ,蔗糖可维持保卫细胞存活率和叶绿体的完整性。

不同品种大麦营养生长与营养成分动态变化

以双啤、西南 86 911、2 0 0 0 / 2 - 6 - 2 3个品种为材料 ,研究不同生长时期大麦叶片中蛋白质、叶绿素、维生素C、SOD酶活性等成分的变化。结果表明 :3种大麦品种在幼苗生长期 ,生长至第 15d时 ,蛋白质、维生素C、叶绿素含量均达到最高。在第 15d ,西南 86 911比双啤、2 0 0 0 / 2 - 6 - 2两个品种的蛋白质和维生素C的含量高 ,而双啤在前期 (10～ 15d)SOD活性均比西南 86 911和 2 0 0 0 / 2 - 6 - 2都显著提高 ;收获大麦幼苗以 2