TBL教学模式在医学免疫学实验教学中的应用

TBL是一种新型的教学模式。将TBL教学模式运用于本科生的免疫学实验教学中,可激发学生的学习兴趣和创造性思维,有利于培养学生的综合能力,提高教学质量。

食管鳞癌细胞对自然杀伤细胞的生物学效应的影响

目的:研究食管鳞癌原代细胞对自然杀伤细胞表型及功能的调控。方法:收集新鲜食管鳞癌组织,采用改良组织块结合酶消化法在体外培养原代食管鳞癌细胞,通过裸鼠皮下成瘤模型及免疫组织化学技术鉴定食管鳞癌细胞;收集正常人外周血单个核细胞,磁珠法负性分离NK细胞;将原代食管鳞癌细胞培养上清与NK细胞共培养(根据共培养条件分组为NC-NK,ESCC1-NK,ESCC2-NK),使用流式细胞术检测NK细胞表面及胞内分子的表达;通过裸鼠皮下成瘤及肺转移模型研究原代食管鳞癌细胞对NK细胞肿瘤杀伤作用的影响。结果:与NC-NK组比较,ESCC1-NK组、ESCC2-NK组活化型受体NKG2D(56.84±1.28,41.89±2.17,29.40±1.32)(P=0.008,P=0.001)、NKP30(45.79±1.90,19.54±1.27,26.59±1.47)(P=0.001,P=0.003)及CD16(84.82±1.38,55.95±2.29,36.07±1.97)(P=0.001,P=0.000)表达降低;NK细胞胞内效应分子颗粒酶B(94.87±1.04,80.52±0.99,78.67±2.73)(P=0.013,P=0.008)及增殖相关抗原Ki67(70.15±2.35,52.31±1.74,50.02±2.68)(P=0.017,P=0.011)表达下降;活化型受体NKP44、NKP46、CD226,穿孔素及抑制型受体NKG2A、CD158b的表达差异无统计学意义。动物实验显示:皮下瘤体体积ESCC1-NK组和NC-NK组组间有差异(F=54.689,P=0.000);ESCC1-NK处理组肺转移灶数(41.00±3.11)多于NC-NK处理组(25.25±2.32)(t=4.068,P=0.007)。结论:原代食管鳞癌细胞可能通过抑制NK细胞活化及增殖、下调NK细胞杀伤效应分子的表达来抑制NK细胞肿瘤杀伤效应,从而逃逸机体免疫监视。

乙肝歧视原因调查分析及对策研究

乙型肝炎患者和乙型肝炎携带者在社会生活中受到了严重的歧视。近年来,政府致力于解决乙肝歧视问题,保护乙肝携带者的合法权益,以创造和谐、平等的社会环境。本文就乙肝病毒携带者在社会生活中受到歧视的现象,分析造成歧视的原因进行调查研究,并提出合理的反歧视对策。

浅析乙肝携带者受歧视原因

我国乙肝病毒携带者在学习、就业等社会生活中遭受着社会歧视。本文分了信任对乙肝病毒携带者受歧视现状的影响,并提出建立信任、消除乙肝歧视的若干对策。

以能力培养为导向的本科生免疫学实验教学改革

免疫学已成为当今生命科学的前沿学科,在医学教育中具有重要的地位。为适应'以学生为中心,以能力为导向'的高等教育人才培养理念,我校在本科生免疫学实验教学中进行了教学内容、教学方法及测评方式改革,取得良好效果。

泸州市民日常用药行为现状调查及对策分析

目的通过对泸州地区市民用药现状的调查,了解市民用药意识与习惯、医学常识现状等。方法采用自行设计的网络问卷和纸质问卷,随机对432名市民进行调查。结果87.9%市民未正确处理过期药物;40.0%市民因服药期间有不良反应却未正确处理;48.3%~52.4%市民有不正确的服药行为,如漏服、擅改剂量等。结论泸州市民中存在安全用药不当的行为及隐患,相关部门应通过各种途径加强市民用药知识教育,从而实现节约医疗资源和提升市民健康水平的双重目标。

食管鳞癌上皮细胞间质转化对NK细胞活化及其生物学作用的研究

目的探讨食管鳞癌上皮细胞间质化(EMT)对自然杀伤(NK)细胞生物学活性的影响。方法通过Western blot检测EMT化相关蛋白E-cadherin和Vimentin表达,从6株细胞系中筛选出EMT化和非EMT化食管鳞癌细胞株;收集10例正常人外周血,负性分选NK细胞;根据共培养不同的条件培养基分为RPMI 1640正常培养基刺激-NK组(NC组)、EC9706细胞上清液刺激-NK组(EC9706组)与KYSE150细胞上清液刺激-NK组(KYSE150组),将不同的条件培养基加入NK细胞共培养72h,流式细胞术检测NK细胞表面/胞内分子的表达。10ng/mL转化生长因子-β(TGF-β)处理KYSE150细胞株7d诱导EMT化后,收集KYSE150EMT和KYSE150上清液,分别与NK细胞共培养,72h后以流式细胞术检测NK细胞表面/胞内分子的表达、CD107a脱颗粒能力、靶细胞K562杀伤效应、NK细胞增殖及凋亡。结果 6株细胞系中筛选出2株EMT化和4株非EMT化的食管鳞癌细胞株,从中各选出一株(EC9706和KYSE150)用于后续实验;NK细胞负性筛选达到90%以上的纯度,T细胞<1%。不同的食管鳞癌细胞上清液刺激后,3组NK细胞表面活化型、抑制型受体,效应分子结果显示:与NC组和KYSE150组比较,EC9706组活化型受体NKP30、NKG2D、NKP44表达,颗粒酶释放均降低(P<0.05);抑制型受体NKG2A和CD158b表达增加(P<0.05);NKP46、CD226、CD16表达和穿孔素释放在3组间差异无统计学意义。与KYSE150上清刺激比较,KYSE150EMT上清刺激后,NK细胞活化型受体NKP30、NKG2D、NKP44表达,穿孔素释放均降低;CD107a脱颗粒作用、靶细胞K562杀伤效应均减弱,NK细胞Ki67增殖指数下降(P<0.05);抑制型受体NKG2A和CD158b表达增加(P<0.05);NKP46、CD226、CD16表达,颗粒酶释放及NK细胞凋亡在两组间差异无统计学意义。结论食管鳞癌细胞EMT化可能通过抑制NK细胞活化、减少NK细胞杀伤效应分子的分泌来降低NK细胞杀伤效应,从机体免疫监视中逃逸。

CLDN1在食管鳞癌中的表达及其分布异常在食管癌发生中的作用

目的检测紧密连接蛋白CLDN1在食管鳞癌组织中的表达,研究CLDN1对食管鳞癌TE-11细胞生物学功能的影响。方法应用免疫组化检测食管鳞癌组织芯片(含30例食管鳞癌组织、30例癌旁组织及30例食管远端组织)中CLDN1的表达,比较食管癌组织及癌旁组织中CLDN1的表达差异;应用Western blot检测15例食管鳞癌患者术后组织和食管癌细胞株CLDN1的表达,分析CLDN1在肿瘤细胞及正常食管上皮细胞内的分布;构建包含CLDN1shRNA序列的慢病毒并转染TE-11细胞,采用Western blot和流式细胞术检测CLDN1干扰效果及细胞内分布。通过CCK-8检测细胞增殖能力;Transwell检测细胞侵袭迁移能力;采用Rhodamine phalloidin染色TE-11细胞骨架并在激光共聚焦显微镜下观察细胞肌丝变化。结果免疫组化结果显示CLDN1在癌组织及癌旁组织中阳性表达率无明显差异(P>0.05),但在高分化和中分化的食管鳞癌组织CLDN1呈强阳性表达,低分化食管鳞癌组织CLDN1表达明显降低;Western blot检测CLDN1在TE-11细胞中主要分布在细胞核内;干扰CLDN1表达后,TE-11细胞增殖明显减慢,侵袭及迁移能力降低。激光共聚焦显微镜显示下调CLDN1表达后,TE-11细胞骨架蛋白荧光强度减弱,细胞表面肌丝减少。结论 CLDN1在食管鳞癌组织中的表达与其分化程度相关,在TE-11中具有促癌作用,其表达及分布异常与肿瘤的发生发展密切相关,有望作为食管鳞癌的重要生物标志物。