高等医学院校硕士研究生招生录取现状调查分析

目的调查高等院校的医学一级学科硕士研究生的招生录取情况,为医学研究生教育改革提供资料。方法通过搜集我国99所医学院校和综合大学(不含港、澳、台地区)在2011—2016年的医学硕士招生和录取情况,按医学一级学科整理,根据实际录取人数和计划招生人数计算录取招生百分比(简称录招比)。结果 2011年以来,医学硕士研究生录招比整体呈上升趋势(位于96%~98%水平);各学科历年硕士研究生录招比中,口腔医学最高,基础医学最低;医学硕士研究生实际录取人数中,临床医学所在比例最大(平均接近48%),基础医学所占比例不足5%,医学技术和护理学所占比例最小。结论通过制定针对向基础医学等低录招比学科倾斜的改革措施,从根本上打消了报考考生的顾虑,缩小了各学科间录招比差距,有利于实现医学多学科的平衡良性发展。

通过改良RAPD技术获得黑毛石斛、蜂腰石斛和石仙桃的3条SCAR新标记

目的寻找快速区分黑毛石斛、蜂腰石斛和石仙桃的序列特征扩增区域(sequence characterized amplified regions,SCAR)新标记。方法在改良的随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,RAPD)的基础上对10个物种进行基因组DNA随机扩增、分子克隆和测序,分别设计了可鉴别3个物种的SCAR标记。结果成功筛选出3个SCAR标记,其相应的特异性标记分别为N2-12、A2-17和A6-33;其中SCAR标记N2-12在黑毛种属中扩增出约750 bp的特异性条带,SCAR标记A2-17在蜂腰石斛中扩增出约750 bp的特异性条带,SCAR标记A6-33在石仙桃种属中扩增出约600 bp的特异性条带。结论N2-12、A2-17和A6-33这3对特异性SCAR新标记能快速、准确的区分出黑毛石斛、蜂腰石斛和石仙桃这3个物种,为今后进行该中药道地药材样品的鉴定提供了实验依据。

二联体亲子鉴定罕见案例分析及应对策略

目的对亲子鉴定中二联体罕见案例进行分析并给出应对策略。方法对罕见案例样本进行DNA提取,使用AGCU EX-22试剂盒进行二联体和三联体检测;使用阅微基因36A试剂盒进行二联体检测。通过遗传测序仪进行电泳分析,GeneMapper ID-X软件进行数据分析得到短串联重复序列(short tandem repeats,STR)图谱和相应的基因座数据,并计算其累积亲权指数。结果采用AGCU EX-22试剂盒进行被检父和孩子二联体鉴定,获得累积亲权指数为7.0516×10^(2),这个值既大于0.0001又小于10000。根据《亲权鉴定技术规范》(GB/T 37223-2018),其结果是既不支持、又不能排除被检父为孩子的生物学父亲,不能出具明确的鉴定意见;增加孩子母亲样本,改为三联体鉴定后,使用相同的试剂盒进行鉴定,获得的累积亲权指数为2.6327×10^(8),大于10000,支持被检父为孩子的生物学父亲。与此同时,增加STR基因座位点,使用阅微基因36A试剂盒进行被检父和孩子的二联体鉴定,获得累积亲权指数为1.0378×10^(9),同样大于10000,亦能出具明确的鉴定意见。结论在二联体亲子鉴定中,通过增加孩子生母做三联体亲子鉴定或者是增加STR位点进行检测,都能提高累积亲权指数,帮助罕见疑难亲子鉴定案例出具明确的鉴定意见。

肿瘤表观遗传标志物的研究进展及应用现状

近年来,众多研究证明肿瘤的表观基因失调,即DNA甲基化、非编码RNA、组蛋白修饰等对肿瘤的发生、发展起至关重要的作用。肿瘤表观遗传学标志物成为新兴的肿瘤诊断、治疗和预后指标,相应的药物研发也相继进入临床阶段。本文将从DNA甲基化、非编码RNA、组蛋白修饰三个方面阐述肿瘤表观遗传学标志物的研究新进展及应用现状,为进一步的肿瘤研究及应用提供新的契机。

组蛋白修饰作为表观遗传肿瘤标志物的研究进展

核小体是由DNA和五种组蛋白形成的染色质基本结构单位。组蛋白修饰作为表观遗传学研究的重要内容,其N端尾区可通过甲基化、泛素化、巴豆酰化、乙酰化、磷酸化、ADP核糖基化、糖基化和类泛素化(small ubiquitin-like modifier SUMO)等修饰,改变染色质的状态以及调控基因的表达,进而引起肿瘤的发生与发展。组蛋白的修饰和肿瘤的关系已经得到共识,成为当前研究的热点。因此探讨组蛋白修饰和肿瘤的关系,更深入地研究疾病的致病机制,在疾病治疗中寻找靶向标志物,可为肿瘤的诊断、治疗和预后提供新方法。本文就近年来发现的各种组蛋白修饰及其可能作为表观遗传肿瘤标志物的研究进展进行了综述。

百里醌抗肿瘤活性及其机制研究进展

百里醌(thymoqinone, TQ)在抗癌、抗糖尿病、抗高血压、抗菌、止痛、免疫调节、抗炎、解痉挛、保肝、抗氧化等方面具有广泛的生物学效应。随着研究的深入,其抗肿瘤作用及其机制得到了更多的关注。本文综合国内外相关的研究成果,对其抗肿瘤活性、作用机制、联合用药及未来展望等作一综述。

柠檬提取物和水飞蓟素对大鼠急性酒精性肝损伤的保护作用研究

目的:探讨柠檬提取物和水飞蓟素对急性酒精性肝损伤大鼠模型的保护作用。方法:将45只成年雄性SD大鼠随机分成5组:空白组、模型组、水飞蓟素组、柠檬提取物组、联用组,每组9只。检测大鼠血清中ALT、AST含量,肝组织中MDA的含量及SOD的活力;HE染色观察肝组织病理改变。结果:与模型组相比,联用组血清ALT、AST含量明显下降、肝组织匀浆液中MDA含量降低、SOD活力升高、肝脏系数降低、肝脂肪变性明显减轻,差异均具有统计学意义(P <0.05);水飞蓟素组和柠檬提取物组血清ALT、AST含量明显下降(P <0.05),水飞蓟素组肝组织匀浆液中MDA含量降低(P <0.05)。与单用柠檬提取物组相比,联合组大鼠血清中ALT、AST含量下降更明显,差异有统计学意义(P <0.05)。结论:单独应用柠檬提取物对肝脏的保护作用较弱,而联合应用柠檬提取物和水飞蓟素对保护肝脏有一定的协同作用。

医学分子生物学多元化考试模式改革探讨

为了正确评价多元化考核模式在医学分子生物学课程中的效果和应用,以"终末笔试+实验操作+综合知识应用+平时成绩考核"的多元化考核方式代替传统的"一次考试定成绩"的考试制度,强调全过程的考核方式。结果表明,多元化考核方式的应用能提高学生学习兴趣、活跃教学气氛、启发学习思维、提高自主学习能力等。

亲子鉴定的法律与伦理问题新探

亲子鉴定已广泛应用于司法实务,在强奸致孕、无名尸源认定、拐卖妇女儿童等刑案中可提供科学支持;民事纠纷中,由个人委托的亲子鉴定带来的有关启动程序之知情同意问题、鉴定各方受到伤害的问题及科技发展所带来的生殖伦理等问题,也使亲子鉴定的科学伦理问题再次成为被关注的焦点。本文据此系统分析和阐述了亲子鉴定的研发和应用现状、在未成年人保护、辅助生殖技术中出现的生物学父亲和社会学父亲等相关法律与伦理学问题,期能达到法律、科技与伦理的统一而提升司法鉴定行业的公信力,以维护社会和家庭的和谐稳定。

乳腺癌分子基础及诊疗研究

乳腺癌是全球最常见的恶性肿瘤之一,发病率和死亡率均位居女性癌症患者首位.2020年,我国乳腺癌新发病例约41万,占全球女性新发癌症18.41%;死亡病例约11.72万,占全球女性癌症死亡总数17.10%,均数倍于西方发达国家,皆位居世界首位,由此给国家、社会和家庭带来了沉重负担.

黄芪三七合剂改善结肠机械屏障紊乱治疗慢性肾病大鼠的初探

目的探讨黄芪三七合剂是否可通过改善结肠机械屏障结构紊乱而发挥治疗慢性肾病大鼠的作用。方法雄性SD大鼠30只随机分为5组:假手术组(Sham组)、模型组(I/R组)、黄芪三七合剂低剂量组(L-HSM组)和高剂量组(H-HSM组)、尿毒清组(NDQ组),采用右肾切除左肾缺血再灌注法建立慢性肾病(CKD)模型,分别于2周、4周、8周取血液测肌酐、尿素氮值,于第4周按照分组给予不同的灌胃处理,其中L-HSM组和H-HSM组分别给予黄芪三七合剂生药量18 g/(kg·d)和36 g/(kg·d),NDQ组给予尿毒清颗粒1.56 g/(kg·d),Sham组和I/R组给予等体积的蒸馏水,于第8周处死大鼠,取肾和结肠组织;检测肾功(血肌酐和尿素氮)、肾纤维化指标蛋白的表达(TGF-β1和α-SMA)、结肠组织炎症因子IFN-γ和IL-6的表达和结肠上皮紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1的表达。结果与模型组相比,高剂量黄芪三七合剂可有效恢复受损的肾功能,并能降低TGF-β1和α-SMA的蛋白表达,减轻肾纤维化;各组结肠炎症因子表达检测结果显示,模型组结肠组织中高表达的炎症因子IFN-γ和IL-6,在低剂量和高剂量黄芪三七合剂作用下均可有效降低;结肠上皮紧密连接蛋白的免疫组化和Western blot检测结果显示,与对照组相比,模型组中紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的表达均明显降低,表明黄芪三七合剂可在一定程度上恢复结肠机械屏障结构。结论黄芪三七合剂可能通过改善结肠机械屏障结构紊乱、减少炎症因子表达而起到防治慢性肾病大鼠的作用。

氧化应激对人成骨样细胞MG63活性的影响

目的建立人成骨样细胞氧化应激模型,研究氧化应激对人成骨样细胞形态和增殖活力的影响。方法用不同浓度黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶(xanthine/xanthine oxidase,X/XO)的酶促反应产生的超氧阴离子自由基(O_2^-˙)刺激人成骨样细胞MG63,建立成骨细胞内氧化应激模型,用X/XO加黄嘌呤氧化酶抑制剂羟嘌呤醇研究其对该氧化应激模型的逆转作用。运用氧化敏感性荧光探针2'7'-二氯荧光黄双乙酸盐结合流式细胞术检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成,用倒置相差显微镜和MTT实验观察研究氧化应激对成骨细胞形态及增殖活力的影响。结果 X/XO处理MG63细胞后,细胞形态发生明显破坏;在相同处理时间下,X/XO浓度越高,细胞内ROS荧光强度值越高,吸光光密度(opitical density,OD)值越低,差异具有统计学意义(P<0.05),且X/XO加羟嘌呤醇联合处理组的细胞内ROS平均荧光强度较相同浓度X/XO单独处理组明显降低(P<0.05)。在相同X/XO处理浓度下,随着处理时间的延长,细胞内ROS平均荧光强度逐渐增强,OD值明显降低,120 min时细胞内ROS平均荧光强度比对照组增加了345%。24 h时OD值为相同时间对照组的22.9%。结论 X/XO可导致人成骨样细胞氧化应激损伤,破坏人成骨样细胞的形态,抑制人成骨样细胞的增殖活力。X/XO抑制剂羟嘌呤醇可逆转X/XO引起的人成骨样细胞氧化损伤。

金创抗菌膏对糖尿病难愈性皮肤溃疡中Ⅰ、Ⅲ胶原及MMP-13表达的影响

目的:探讨金创抗菌膏对治疗糖尿病难愈性皮肤溃疡Ⅰ、Ⅲ胶原及MMP-13表达的影响。方法:32只糖尿病大鼠模型造模成功的雄性SD大鼠随机分为生理盐水组和金创抗菌膏治疗组(每组16只),另外选择16只健康雄性SD大鼠作为对照组,三组大鼠同时制作创面模型。创面造模成功后,每天每组分别换药,于第7 d、14 d,每组处死8只大鼠。HE染色观察压疮皮肤形态改变;免疫组织化学技术检测基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)的表达变化,RT-PCR技术检测MMP-13 m RNA的表达;苦味酸-天狼星红染色观察Ⅰ、Ⅲ型胶原面积变化。结果:HE染色显示金创膏组较生理盐水组更早出现肉芽组织,且成纤维细胞排列规则呈"指纹状";对照组成纤维细胞极性消失及胶原纤维排列紊乱,肉芽组织出现较晚。免疫组化及RT-PCR显示,金创抗菌膏治疗组MMP-13表达比对照组和生理盐水组均降低(P<0.05)。苦味酸-天狼星红染色显示与其它两组比较,金创抗菌膏组Ⅲ胶原面积最大,Ⅰ型胶原面积最小。结论:金创抗菌膏可以促进大鼠糖尿病皮肤溃疡的愈合,可能与调控创面皮肤Ⅰ、Ⅲ胶原基因及MMP-13的表达相关。

红景天苷对人乳腺癌MDA-MB-435细胞功能的作用

目的:通过检测红景天苷对人乳腺癌MDA-MB-435细胞的增殖、凋亡、周期及运动侵袭的影响,探讨红景天苷抗人乳腺癌的作用。方法:体外培养MDA-MB-435细胞,CCK-8法筛查红景天苷对细胞的半数有效抑制浓度(IC50)。以不加红景天苷组为对照组,以IC50浓度的红景天苷组为实验组,在光镜下观察其形态改变,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,Transwell小室模型观察细胞运动和侵袭能力的改变。结果:红景天苷对人乳腺癌MDA-MB-435细胞的IC50为4 mg/m L;光镜下见红景天苷组细胞呈现坏死和凋亡形态;CCK-8法显示红景天苷组在作用24 h、48 h和72 h三个时间点均能抑制细胞的生长增殖,抑制率均高于对照组,且具有显著的时间-效应依赖性(P<0.05);流式细胞术显示红景天苷组早期凋亡率为(3.31±0.21)%、晚期凋亡和坏死率为(28.80±2.15)%,高于对照组(1.26±0.13)%和(5.56±0.78)%,差异均具有统计学意义(P<0.05);细胞周期检测发现红景天苷组细胞较对照组在G0/G1期的比例增加,停滞在S期的比例减少,G2/M期的比例减少;运动实验结果显示,红景天苷作用72 h后,红景天苷组每个视野跨膜细胞数为(39.60±3.37)个,远低于对照组(142.20±12.99)个,差异具有统计学意义(P<0.01);侵袭实验结果示红景天苷组每个视野跨膜细胞数为(4.20±1.55)个,也低于对照组(13.00±3.09)个,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:4 mg/m L红景天苷作用人乳腺癌MDA-MB-435细胞,可抑制生长增殖、诱导细胞凋亡和坏死发生、阻滞细胞周期、有效抑制肿瘤细胞的运动和侵袭。

慢病毒介导CK18基因沉默对人乳腺癌BT549细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响

目的检测靶向沉默细胞角蛋白18(CK18)基因对人乳腺癌BT549细胞增殖、凋亡、侵袭运动的影响,并探讨其潜在的分子机制。方法建立CK18稳定沉默的BT549细胞株,分为3组,以CK18(CK18-sh21、CK18-sh22、CK18-sh23及CK18-sh24)靶向沉默的细胞为实验组CK18-shRNA,加入空载体的为阴性对照(sh-Con)组,未处理为空白对照(Wt)组。采用蛋白印迹法(Westernblot)对细胞系进行CK18表达鉴定。采用CCK-8法、平板克隆形成法检测CK18表达缺失对细胞增殖能力的影响;通过流式细胞技术(PE–AnnexinV双染法)检测CK18基因沉默后对BT549细胞凋亡的影响;通过PI-FACS法检测沉默CK18对BT549细胞周期的影响;采用划痕试验、Transwell法检测CK18沉默对细胞运动及侵袭能力的影响;采用Westernblot检测与侵袭转移相关的分子E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)表达情况。结果建立了CK18沉默的BT549细胞系,CK18的表达被显著抑制,CK18-sh23组相对sh-Con组抑制率最高,可达73%。与Wt组、sh-Con组相比,CK18-shRNA细胞增殖能力在24h、48h和72h降低,克隆形成能力下降,细胞运动、侵袭能力下降,细胞凋亡率和G2期细胞比例均增加(P<0.05)。与sh-Con组和Wt组比较,CK18表达降低能促进E-cadherin表达,抑制vimentin表达(P<0.05)。结论CK18基因沉默能有效抑制人乳腺癌BT549细胞的增殖、运动、侵袭,诱导细胞的凋亡,并阻滞细胞周期;CK18还可能通过诱导EMT发生参与乳腺癌BT549细胞的侵袭转移过程。

线粒体质量控制新途径:线粒体衍生囊泡

线粒体是真核细胞中非常复杂的双膜细胞器。在生理状态下,线粒体再生和降解是平衡的;细胞器中的蛋白质、脂质和DNA等组分受到损伤时,通过分裂、融合、自噬等途径维持线粒体稳态,以保持线粒体结构和功能的完整,这一过程通常称为"线粒体质量控制"。线粒体衍生囊泡(MDV)是新近发现的线粒体质量控制途径,在细胞应激早期有助于维持线粒体功能稳定,并在线粒体氧化应激中发挥重要作用。我们拟综述MDV的发现、转运途径、货物的选择以及对细胞的生理影响等。

核因子E2相关因子2对人永生化角质形成细胞氧化损伤的保护作用

目的探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)对过氧化氢(H2O2)诱导的人永生化角质形成细胞(HaCaT)氧化损伤的保护作用。方法用慢病毒转染方式使HaCaT过表达Nrf2(Nrf2/HaCaT),并用MTT法和抗Ki67免疫荧光染色法检测其增殖活性。实验分为Nrf2/HaCaT组和HaCaT组,每组5个样本。应用200μmol/L H2O2处理两组细胞24 h以诱导氧化损伤,并用MTT法检测细胞活性,乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞损伤情况,TUNEL染色检测细胞凋亡,ELISA法和比色法检测氧化应激相关指标Nrf2、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和活性氧(ROS),以及炎症相关因子白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、核因子κB(NF-κB)P65的含量。结果Nrf2/HaCaT细胞增殖活性显著高于HaCaT(P<0.05)。经H2O2诱导后,Nrf2/HaCaT活性较HaCaT高(P<0.05),LDH释放及凋亡率较HaCaT低(P<0.05),其上清液中的抗氧化物Nrf2、GSH和SOD水平较HaCaT高(P<0.05),而氧化产物ROS、MDA以及炎症因子IL-6、TNF-α和NF-κB P65水平较HaCaT低(P<0.05)。结论Nrf2过表达可促进HaCaT增殖及减轻H2O2诱导的细胞氧化和炎性损伤。

聚乳酸-羟基乙酸支架联合间充质干细胞治疗大鼠脑创伤

目的:探讨聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)支架联合间充质干细胞(MSCs)移植对创伤性脑损伤(TBI)大鼠的神经功能和脑组织结构的影响。方法:将SD大鼠随机分为sham组、control组、PLGA组和PLGA+MSCs组,后3组建立脑创伤模型,sham组除颅骨开窗外不做其他处理,PLGA组和PLGA+MSCs组分别在建模后移植PLGA及PLGA+MSCs。术后14 d,改良神经功能缺损评分评估神经行为功能,PET/CT评价损伤灶大小和糖代谢水平,扫描电镜观察细胞在PLGA支架上的生长情况,HE染色观察创伤灶及周边区组织病理改变,免疫组化检测GFAP和MAP2蛋白的表达情况。结果:体内和体外细胞均能在PLGA支架上生长,PLGA、PLGA+MSCs移植能改善大鼠的神经行为功能。与control组相比,PLGA组和PLGA+MSCs组创伤灶体积明显减少(P <0.05),且创伤侧与健侧对18F-FDG的标准摄取值(SUV)比值增加(P <0.05);PLGA组和PLGA+MSCs组脑组织病灶区较为致密,GFAP表达减少而MAP2表达增加(P <0.05)。此外,与PLGA组相比,PLGA+MSCs组脑组织病灶区更加致密完整,GFAP蛋白表达下降而MAP2蛋白表达上升(P <0.05)。结论:PLGA和PLGA+MSCs移植均能改善脑创伤大鼠的神经功能缺失症状、促进脑组织的修复,且PLGA+MSCs移植效果更佳。

CK18在乳腺癌血清中的表达与临床意义

目的:根据CK18在乳腺癌患者血清中的表达情况,分析其表达的临床意义,探讨CK18作为辅助诊断乳腺癌分子生物标志物的可行性。方法:随机选取2016年9～12月病理诊断为乳腺癌的患者血清和健康人的血清各26例,采用蛋白质免疫印迹方法检测CK18的表达情况,并分析其临床意义,同时比较血清中CK18与各临床因素之间的关系。结果:在26例健康血清中,CK18阳性表达25例,阳性率96%;在26例乳腺癌患者血清中,CK18阳性率表达19例,阳性率73%。比较两组血清中CK18和GAPDH相对灰度比值,乳腺癌患者血清中CK18表达高于健康人,差异有统计学意义(P <0.05),比较其CK18表达和各临床因素的关系,显示差异无统计学意义(P> 0.05)。结论:和正常人血清相比,CK18在乳腺癌血清中高表达,这可能对乳腺癌的早期诊断、疾病进展、评价生存和预后具有重要的意义。另外在乳腺癌患者血清中CK18的表达与年龄、肿瘤大小、WHO分级高低、病理类型、ER、PR、HER-2表达与否均无明显的相关性。

聚乳酸羟基乙酸支架联合间充质干细胞移植促进脑创伤修复

聚乳酸羟基乙酸(poly(lactic-coglycoli cacid),PLGA)支架是组织工程中较常用的三维支架材料。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一类具有自我更新、多向分化潜能的成体干细胞,可向神经谱系细胞分化并能朝受损部位迁移,在治疗脑创伤方面具有良好效果。本实验拟探讨PLGA支架联合MSCs移植在脑创伤模型中对神经功能修复及受损区域突触可塑性的影响。实验分组如下:假手术组、对照组、PLGA组、PLGA+MSCs组。