激光多普勒流量计观察单侧输尿管梗阻大鼠双侧肾皮质微循环血流变化

目的:用激光多普勒流量计观察单侧输尿管梗阻大鼠双侧肾皮质微循环血流的变化,探讨梗阻侧肾间质纤维化的发病机制及健侧肾的代偿机制。方法:成年雌性SD大鼠,随机分为假手术组和模型组。假手术组仅将输尿管游离但不结扎离断,模型组行单侧输尿管结扎术。术后第7、14和21天随机选取并处死各组中的6只大鼠,观察双肾病理学改变,并检测双侧肾皮质微循环血流。结果:H-E染色显示假手术组双侧肾各时间点肾单位结构正常,间质无增宽;模型组大鼠梗阻侧肾术后7 d出现早期间质纤维化的病理改变,并随梗阻时间延长逐渐加重;健侧肾小球系膜细胞增生并随代偿时间延长逐渐增多。肾皮质微循环血流,与假手术组比较,模型组大鼠健侧肾皮质微循环血流显著增加,梗阻侧肾皮质微循环灌注量先增加后进行性降低。结论:血液流变学改变、梗阻侧肾皮质微循环血流灌注量进行性减少是肾间质纤维化的发病机制之一;而健侧肾皮质微循环血流灌注量增高,在一定程度上有利于健侧肾的功能代偿。

芳香新塔花茶对小鼠镇静催眠、生长发育及免疫器官指数的影响研究

目的:研究芳香新塔花茶对小鼠的镇静催眠、生长发育及免疫器官指数的影响.方法:用不同剂量的芳香新塔花茶灌胃,用自发活动记录法记录60 min内小鼠自发活动次数,利用阈剂量戊巴比妥钠睡眠实验法和阈下剂量戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠实验,观察芳香新塔花茶镇静催眠作用.用称重法,观察法及计量法研究芳香新塔花茶对小鼠生长发育及免疫器官指数的影响.结果:芳香新塔花茶低、中、高剂量组对小鼠走动次数、举双前肢数、入睡时间、体重,免疫器官指数作用差异显著(p<0.05)或差异极显著(p<0.01),且呈剂量依赖效应;给药组小鼠的生长发育状况更加良好.结论:芳香新塔花茶具有显著的镇静催眠、促进生长发育及免疫增强作用.

阿里红黄酮对衰老模型小鼠的抗衰老作用

目的:研究阿里红黄酮对衰老模型小鼠的抗衰老作用。方法:将小鼠随机分为6组(n=12):正常对照组,衰老模型组,阳性对照组,低、中、高剂量阿里红黄酮组。除正常对照组外,其余各组均采用D-半乳糖颈背部皮下注射建立亚急性衰老小鼠模型,用不同剂量的阿里红黄酮(100、200和400 mg/(kg·d))灌服小鼠6周后,计算衰老模型小鼠脑指数及脾脏指数、胸腺指数,测定其脑组织丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、肝组织过氧化氢酶(CAT)及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:阿里红黄酮3个剂量组可不同程度的升高衰老模型小鼠的脑指数、脾脏指数、胸腺指数、脑组织中的GSH-Px活性及肝组织中的CAT、SOD活性,降低其脑组织中的MDA含量。结论:阿里红黄酮可能通过提高机体的抗氧化能力而达到抗衰老作用。

红景天苷对人乳腺癌MDA-MB-435细胞功能的作用

目的:通过检测红景天苷对人乳腺癌MDA-MB-435细胞的增殖、凋亡、周期及运动侵袭的影响,探讨红景天苷抗人乳腺癌的作用。方法:体外培养MDA-MB-435细胞,CCK-8法筛查红景天苷对细胞的半数有效抑制浓度(IC50)。以不加红景天苷组为对照组,以IC50浓度的红景天苷组为实验组,在光镜下观察其形态改变,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,Transwell小室模型观察细胞运动和侵袭能力的改变。结果:红景天苷对人乳腺癌MDA-MB-435细胞的IC50为4 mg/m L;光镜下见红景天苷组细胞呈现坏死和凋亡形态;CCK-8法显示红景天苷组在作用24 h、48 h和72 h三个时间点均能抑制细胞的生长增殖,抑制率均高于对照组,且具有显著的时间-效应依赖性(P<0.05);流式细胞术显示红景天苷组早期凋亡率为(3.31±0.21)%、晚期凋亡和坏死率为(28.80±2.15)%,高于对照组(1.26±0.13)%和(5.56±0.78)%,差异均具有统计学意义(P<0.05);细胞周期检测发现红景天苷组细胞较对照组在G0/G1期的比例增加,停滞在S期的比例减少,G2/M期的比例减少;运动实验结果显示,红景天苷作用72 h后,红景天苷组每个视野跨膜细胞数为(39.60±3.37)个,远低于对照组(142.20±12.99)个,差异具有统计学意义(P<0.01);侵袭实验结果示红景天苷组每个视野跨膜细胞数为(4.20±1.55)个,也低于对照组(13.00±3.09)个,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:4 mg/m L红景天苷作用人乳腺癌MDA-MB-435细胞,可抑制生长增殖、诱导细胞凋亡和坏死发生、阻滞细胞周期、有效抑制肿瘤细胞的运动和侵袭。

高频超声心动图评价5/6肾切除大鼠心脏结构和功能的变化

目的:通过5/6肾切除拟建立慢性肾心综合征大鼠动物模型,应用高频超声心动图动态检查其心脏的收缩与舒张功能,评价高频超声心动图在5/6肾切除造模大鼠慢性肾心综合征研究中的价值。方法:将健康SD大鼠24只随机分成假手术组和模型组两组;模型组采取5/6肾切除,假手术组模拟手术过程但不切除肾。于10周后,对2组大鼠行经胸超声心动图监测;然后经腹主动脉抽取动脉血以测定血肌酐和尿素氮;然后采用颈脱位法处死大鼠,取其心、肾进行形态学观察。结果:第10周末存活的模型组大鼠一般情况较假手术组差;高频超声可以清晰显示大鼠心脏结构,模型组大鼠心脏左室在舒张末期的内径(LVIDd),与假手术组比较有明显增加(P<0.05),模型组左室射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)比假手术组均有降低(P<0.01),其余指标差异无统计学意义;模型组大鼠血清肌酐和尿素氮测值均较假手术组显著升高(P<0.01);模型组肾组织大部分肾小球萎缩、纤维化,肾小囊变狭窄其壁增厚,心肌细胞肥大变粗、排列分布不均匀、闰节不清晰等病理改变。结论:5/6肾切除可建立慢性肾心综合征大鼠动物模型;高频超声心动图可较好地评价造模大鼠的心脏结构及心功能的变化。

微量元素锶改善大鼠非酒精性脂肪肝的机制研究

目的探讨微量元素锶改善大鼠非酒精性脂肪肝的机制。方法 50只SD大鼠随机分为对照组、模型组、18 mg/L锶组、36 mg/L锶组和辛伐他汀组。对照组进食普通饲料,其余4组进食高脂饲料,第6周起给予18 mg/L和36 mg/L锶组浓度分别为18 mg/L和36 mg/L含锶饮用水,第11周起进行灌胃,18 mg/L和36 mg/L锶组分别灌浓度为18 mg/L和36 mg/L含锶水3 m L/kg体重,辛伐他汀组灌辛伐他汀10 mg/kg体重,对照组与模型组灌生理盐水3 m L/kg体重。第14周末处死大鼠,检测血清TG、TC、LDL-C和肝组织TG、TC含量,并行肝组织油红O染色观察脂肪变性情况,免疫组化检测肝组织GRP78、SREBP2、HMGCR和LDLr蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组的血清TC、LDL-C和肝TC、TG均升高(P<0.05),与模型组比较,36 mg/L锶组血清TC、LDL-C和肝TC、TG均降低(P<0.05)。油红O染色显示模型组肝组织含大量的红染脂质颗粒,18 mg/L锶组、36 mg/L锶组及辛伐他汀组红染颗粒均较模型组不同程度减少(P<0.05)。免疫组化结果显示:模型组大鼠肝组织GRP78、SREBP2、HMGCR和LDLr蛋白表达水平,18mg/L锶组大鼠肝组织GRP78、SREBP2和LDLr蛋白表达水平,36 mg/L锶组大鼠肝组织LDLr蛋白表达水平及辛伐他汀组大鼠肝组织SREBP2和LDLr蛋白表达水平均明显高于对照组(P<0.05)。36 mg/L锶组大鼠肝组织GRP78、SREBP2和HMGCR蛋白表达水平明显低于模型组,而LDLr蛋白表达水平明显高于模型组;辛伐他汀组大鼠肝组织GRP78和HMGCR蛋白表达水平明显低于模型组(P<0.05);而18 mg/L锶组大鼠肝组织GRP78、SREBP2、HMGCR和LDLr蛋白表达水平较模型组无显著差异(P>0.05)。结论长期较高浓度锶摄入可改善脂代谢紊乱,减轻NAFLD,其作用机制可能与调节内质网应激、HMGCR活性和LDLr的功能等有关。

硝苯吡啶在铁超载HK-2细胞氧化应激中的作用及机制

目的研究硝苯吡啶对HK-2细胞铁超载引起的氧化应激的作用和可能的机制。方法 HK-2细胞分成空白组、铁超载组、硝苯吡啶组和共处理组,用柠檬酸铁铵和(或)硝苯吡啶处理细胞24 h后检测细胞丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性,谷胱甘肽(GSH)含量,细胞内铁含量以及二价金属离子转运蛋白1(DMT1)和膜铁转运蛋白1(FPN1)的表达。结果与铁超载组相比硝苯吡啶组和共处理组MDA含量降低(P<0.05),T-SOD活性增加(P<0.05),GSH含量增加(P<0.05),细胞内铁含量降低(P<0.05),DMT1表达增加(P<0.05),FPN1表达增加(P<0.05)。结论硝苯吡啶在铁超载HK-2细胞的氧化应激中有保护作用,这一作用与硝苯吡啶促进DMT1和FPN1的表达、降低细胞内铁含量有关。

周期素Cyclin G2在小鼠睾丸生精上皮中的表达特点

目的:观察细胞周期素Cyclin G2在不同发育期小鼠睾丸生精上皮细胞中的表达特点,初步探讨其在精子发生过程中的生理意义。方法:分别选取3周龄、5周龄、7周龄、12月龄雄性昆明小鼠睾丸组织,运用免疫组化方法观察分析Cyclin G2在小鼠生精上皮中的表达。结果:Cyclin G2在3周龄小鼠生精上皮中表达低(%Area=15.238);在5周龄小鼠生精上皮中,Cyclin G2表达增加(%Area=41.344),并且定位于胞质;在7周龄小鼠生精上皮中,Cyclin G2进一步增加(%Area=50.102),并在生精上皮末端为甚,在曲细精管中部形成一条鲜明的棕色深染条带;12月龄小鼠生精上皮中,Cyclin G2回到较低水平(%Area=30.994),但仍高于3周龄。以上结果进行t检验,P<0.05为差异具有统计学意义。结论:Cyclin G2在生精上皮中的表达特点提示其与精子发生相关,可能参与了生精过程停止和减数分裂过程的调控。

人特异性CHRFAM7A基因抑制小鼠肾缺血再灌注损伤炎症反应

本研究探讨人特异性CHRFAM7A基因抑制小鼠肾缺血再灌注损伤早期炎症作用及其机制。12只野生型(wild type,WT) C57BL/6成年雄性小鼠随机分为2组:野生型假手术组(WT Sham)和野生型肾缺血再灌注损伤(WT RIRI)组。12只性别、年龄匹配的CHRFAM7A转基因(transgenic mice,GT)小鼠也随机分组为:转基因型假手术组(GT Sham)和转基因型肾缺血再灌注损伤(GT RIRI)组,每组各6只。除WT和GT假手术组仅行剖腹手术外,所有小鼠均夹闭双侧肾蒂40 min,再灌注24 h后,留取各组小鼠血清及肾组织标本。生化分析仪检测血清中的尿素氮(BUN)和肌酐(Scr)水平; ELISA法检测白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和胱天蛋白酶7水平;免疫组织化学染色法检测高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达水平;苏木-伊红(HE)染色和原位末端标记法(TUNEL)染色观察肾组织病理损伤;流式检测HK-2细胞凋亡率。结果显示,与WT Sham组对比,WT RIRI组血清中,BUN、Scr、IL-8和TNF-α含量增加(P <0. 0001);肾组织中,胱天蛋白酶7水平增高(P<0. 001),HMGB1平均光密度值增加(P<0. 0001),肾组织细胞凋亡指数(AI%)增高(P<0. 0001)。与GT Sham组对比,GT RIRI组血清BUN、Scr、IL-8和TNF-α含量增加(P <0. 05,P <0. 0001,P<0. 01,P<0. 01);肾组织中,胱天蛋白酶7水平明显增高(P<0. 01),HMGB1平均光密度值增加(P<0. 0001),肾组织细胞AI%增高(P=0. 0005)。与WT RIRI组对比,GT RIRI组血清中的BUN、Scr水平降低(P<0. 0001),IL-8、TNF-α、HMGB1和胱天蛋白酶7的水平明显下降(P<0. 01,P<0. 0001,P<0. 0001,P<0. 01),肾组织细胞凋亡指数(AI%)下降(P=0. 0003).与pLVX空载质粒+氯化钴组相比,pLVX-CHRFAM7A+氯化钴组的凋亡率(19. 31%±1. 45 vs 34. 92%±4. 21,P <0. 001)明显下降。上述结果表明,人特异性CHRFAM7A基因在小鼠肾缺血再灌注损伤中,通过抑制早期的炎症反应,对肾组织发挥保护作用。