原发性肺软骨瘤的外科诊治分析

目的探讨原发性肺软骨瘤的临床特点及外科诊治方法。方法回顾性分析四川省人民医院2005年1月至2017年11月手术治疗且病理确诊的20例肺软骨瘤的临床资料,其中开胸手术5例,腔镜手术15例,6例行肺叶切除术,14例行肺楔形切除术。结果全组无术前确诊病例,手术均顺利完成,无围手术期死亡,2例发生并发症。手术时间(112.5±50.2)min,术中失血(58.5±31.0)m L,术后留置胸腔引流管时间(3.9±2.5)天,术后住院天数(5.4±2.3)天。随访16例,平均73.8月,1例死于非肿瘤性病变,余均无复发、转移、并发Carney综合征等。结论肺软骨瘤临床表现缺乏特异性,容易误诊,外科手术切除是诊断和治疗肺软骨瘤的有效措施。手术效果良好,但需终身随访。

食管鳞癌细胞对自然杀伤细胞的生物学效应的影响

目的:研究食管鳞癌原代细胞对自然杀伤细胞表型及功能的调控。方法:收集新鲜食管鳞癌组织,采用改良组织块结合酶消化法在体外培养原代食管鳞癌细胞,通过裸鼠皮下成瘤模型及免疫组织化学技术鉴定食管鳞癌细胞;收集正常人外周血单个核细胞,磁珠法负性分离NK细胞;将原代食管鳞癌细胞培养上清与NK细胞共培养(根据共培养条件分组为NC-NK,ESCC1-NK,ESCC2-NK),使用流式细胞术检测NK细胞表面及胞内分子的表达;通过裸鼠皮下成瘤及肺转移模型研究原代食管鳞癌细胞对NK细胞肿瘤杀伤作用的影响。结果:与NC-NK组比较,ESCC1-NK组、ESCC2-NK组活化型受体NKG2D(56.84±1.28,41.89±2.17,29.40±1.32)(P=0.008,P=0.001)、NKP30(45.79±1.90,19.54±1.27,26.59±1.47)(P=0.001,P=0.003)及CD16(84.82±1.38,55.95±2.29,36.07±1.97)(P=0.001,P=0.000)表达降低;NK细胞胞内效应分子颗粒酶B(94.87±1.04,80.52±0.99,78.67±2.73)(P=0.013,P=0.008)及增殖相关抗原Ki67(70.15±2.35,52.31±1.74,50.02±2.68)(P=0.017,P=0.011)表达下降;活化型受体NKP44、NKP46、CD226,穿孔素及抑制型受体NKG2A、CD158b的表达差异无统计学意义。动物实验显示:皮下瘤体体积ESCC1-NK组和NC-NK组组间有差异(F=54.689,P=0.000);ESCC1-NK处理组肺转移灶数(41.00±3.11)多于NC-NK处理组(25.25±2.32)(t=4.068,P=0.007)。结论:原代食管鳞癌细胞可能通过抑制NK细胞活化及增殖、下调NK细胞杀伤效应分子的表达来抑制NK细胞肿瘤杀伤效应,从而逃逸机体免疫监视。

改良管状胃代食管在开放手术治疗食管胸中下段癌中应用的短期效果

目的观察改良管状胃与传统管状胃代食管在开放手术治疗食管胸中下段癌中应用的短期临床效果,并探讨改良管状胃在临床中的安全性及可行性。方法回顾性分析2016年10月至2017年11月普胸外科收治的134例食管胸中下段癌手术患者的临床资料,按管状胃制作步骤不同分为试验组65例和对照组69例。试验组采用改良管状胃代食管,对照组采用传统管状胃代食管。记录并比较两组患者管胃壁损伤长度、手术操作时间、术中出血量、手术耗材费用、管状胃宽度、术后住院时间以及术后并发症等情况。随访3个月～1年,比较两组术后吻合口狭窄发生率、肿瘤复发率等指标。结果试验组管胃壁损伤长度、手术操作时间、手术耗材费用均低于对照组(P <0. 01);两组术中出血量、管状胃宽度、术后住院时间比较无统计学差异(P> 0. 05);两组出现吻合口瘘、心律失常、声音嘶哑、胸腔感染、术后吻合口狭窄等术后并发症,但两组并发症总发生率比较差异无统计学意义(P>0. 05)。结论与传统管状胃相比,改良管状胃可避免对管状胃壁再次损伤、缩短手术时间、降低手术耗材费用,且不会增加吻合口瘘、心律失常、声音嘶哑、胸腔感染、术后吻合口狭窄等术后并发症。

TBX3及TBX18在人源诱导多能干细胞向窦房结样细胞富集分化中的作用

目的探索过表达TBX3、TBX18在人源诱导多能干细胞(human induced pluripotent stem cells,HiPS)向窦房结样细胞富集分化的作用。方法取HiPS,采用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)检测其干性标记物OCT3/4、SOX2、NANOG表达,并与人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)比较;免疫荧光染色观察HiPS干性标记物OCT3/4、NANOG、SSEA4和TRA-1-60表达。将HiPS向心肌细胞定向分化,qRT-PCR检测心肌前体细胞特异性基因ISL1、NKX2-5(NK2 homeobox 5)以及心肌细胞特异标记物ACTN1、TNNT2表达,以成人心肌细胞(human adult cardiomyocytes,hACM)作为阳性对照;免疫荧光染色观察心肌前体细胞特异核转录因子NKX2-5,心肌细胞特异性收缩蛋白肌球蛋白(cardiac troponin,cTnT)、α-辅肌动蛋白(α-actinin),以及心房肌球蛋白轻链(myosin light chain 2A,MLC-2A)和心室肌球蛋白轻链(myosin light chain 2V,MLC-2V)表达;流式细胞术检测α-actinin阳性率。在HiPS向心肌细胞定向分化第3天(中胚层阶段),以慢病毒方式过表达窦房结相关基因TBX3、TBX18,继续培养至21 d,采用qRT-PCR检测窦房结细胞特异性标记物TBX3、TBX18、SHOX2、NKX2-5、HCN4、HCN1相对表达量,以增强绿色荧光蛋白空白病毒为对照。结果 OCT3/4、SOX2、NANOG在HiPS和ESCs中均高表达,各基因相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);OCT3/4和NANOG在HiPS中特异分布于细胞核中,SSEA4和TRA-1-60分布于细胞膜上。HiPS向心肌细胞分化5、7、21、28 d时ISL1基因以及分化7、21、28 d时NKX2-5基因相对表达量均显著高于hACM(P<0.05),分化3、5、7、21 d ACTN1和TNNT2基因相对表达量均显著低于hACM(P<0.05)。NKX2-5在绝大部分细胞核中表达;cTnT和α-actinin,MLC-2A和MLC-2V信号定位于细胞质中,并初步呈现出肌小结纹理样结构。流式细胞术检测示HiPS向心肌细胞诱导分化成功。过表达TBX3组中,TBX18、SHOX2、HCN4、HCN1较对照组表达均有上调,且SHOX2基因相对表达量差异有统计学意义(P<0.05);NKX2-5基因相对表达量虽低于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。过表达TBX18组中,各基因相对表达量与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 HiPS和hESCs的多能性相近,建立了稳定的HiPS干性维持及培养方法;成功建立HiPS向心肌细胞高效分化技术平台;尽管TBX3、TBX18在HiPS向窦房结样细胞富集分化中的促进作用不显著,但TBX3呈现出一定促进趋势,未来可进一步探索。