目的探讨重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rh GM-CSF)联合胰岛素对1型糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤创面组织中VEGF、HIF-1α及CD31表达的影响。方法选取50只健康雄性SD大鼠,按照随机数表法随机分为A组(10只)、B组(10只)、C组(10只)、D组(10...目的探讨重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rh GM-CSF)联合胰岛素对1型糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤创面组织中VEGF、HIF-1α及CD31表达的影响。方法选取50只健康雄性SD大鼠,按照随机数表法随机分为A组(10只)、B组(10只)、C组(10只)、D组(10只)、E组(10只),其中A组大鼠建立普通深Ⅱ度烫伤模型,并予以创面覆盖浸有5.0 m L生理盐水的纱布治疗;B组大鼠建立1型糖尿病深Ⅱ度烫伤模型,并予以创面覆盖浸有5.0 m L生理盐水的纱布治疗;C组大鼠建立1型糖尿病深Ⅱ度烫伤模型,并予以创面覆盖浸有5 U诺和灵30R+5.0 m L生理盐水的纱布治疗;D组大鼠建立1型糖尿病深Ⅱ度烫伤模型,并予以创面覆盖浸有25μg rhGM-CSF+5.0 m L生理盐水的纱布治疗;E组大鼠建立1型糖尿病深Ⅱ度烫伤模型,并予以创面覆盖浸有5 U诺和灵30R+25μg rhGM-CSF+5.0 m L生理盐水的纱布治疗。分别于烫伤后第3、7、11、15、21天观察各组大鼠的创面愈合情况,并采集创面组织,检测创面组织中VEGF、HIF-1α、CD31及HIF-1αmRNA的表达情况。结果烫伤后第3、7、11、15、21天各组大鼠创面均逐渐缩小或愈合,愈合率逐渐升高,其中尤以A组、E组大鼠创面组织中成纤维细胞及新生毛细血管生长速度最快,愈合最快,B组大鼠创面变化最慢,且烫伤后第11、15天,各组大鼠创面愈合率两两对比,除A组与E组及C组与D组对比,P>0.05,差异无统计学意义外,其余各组组间两两对比,P均<0.05,差异具有统计学意义。烫伤后第3、7、11、15、21天,各组大鼠创面组织中VEGF、HIF-1α、CD31的相对阳性表达量及HIF-1αmRNA的表达水平均呈先逐渐升高后降低的趋势,各组大鼠创面组织中VEGF、HIF-1α、CD31的相对阳性表达量及HIF-1αmRNA的表达水平两两对比,其中烫伤后第3、7、11、15、21天,E组大鼠创面组织中VEGF的相对阳性表达量分别与B组、C组及D组对比,P均<0.05,差异具有统计学意义;烫伤后第7、11、15、21天,E组大鼠创面组织中HIF-1αmRNA的表达水平分别与B组、C组及D组对比,P均<0.05,差异具有统计学意义。结论胰岛素联合rhGM-CSF治疗1型糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤创面,可显著提高大鼠创面组织中VEGF的表达水平、改善局部缺氧状态,从而加快新生毛细血管再生,有效减轻创面组织炎症反应程度,促进创面坏死组织清除,缩短创面愈合时间。展开更多
目的观察人骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)与猪小肠黏膜下层(SIS)的生物相容性,并检测其对人骨髓间充质干细胞增殖和分泌能力的影响。方法检测人BM-MSCs表面标记物以及多向分化能力。将第三代人BM-MSCs接种于SIS上作为为实验组,培养板单纯...目的观察人骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)与猪小肠黏膜下层(SIS)的生物相容性,并检测其对人骨髓间充质干细胞增殖和分泌能力的影响。方法检测人BM-MSCs表面标记物以及多向分化能力。将第三代人BM-MSCs接种于SIS上作为为实验组,培养板单纯培养作为对照组。计算两组细胞分别在2h、4h、6h的贴壁率。通过CCK8的实验方法分别检测共培养12h、24h、36h、48h的OD值测定细胞的增殖情况。采用Hoechst33258荧光法检测2d、4d、6d两组细胞内的DNA含量。采用RT-PCR测定2d,4d,6d两组细胞VEGF m RNA的表达情况。共培养7d后在扫瞄电镜下观察人BM-MSCs在SIS上的生长状态。结果共培养2h、4h时,实验组的细胞贴壁率与对照组贴壁率差异有统计学意义(P<0.05),共培养6h,两组贴壁率差异无统计学意义(P>0.05)。共培养12h,两组细胞增殖差异无统计学意义(P>0.05),其余各时间点两组细胞增殖差异有统计学意义(P<0.05)。各时间点实验组细胞DNA含量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。各时间点实验组VEGF m RNA的表达量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。扫描电镜观察人BM-MSCs在小肠黏膜下层上生长状态良好。结论人骨髓间充质干细胞与小肠黏膜下层具有良好的生物相容性,SIS能够促进人BM-MSCs的增殖和分泌。展开更多
文摘目的探讨重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rh GM-CSF)联合胰岛素对1型糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤创面组织中VEGF、HIF-1α及CD31表达的影响。方法选取50只健康雄性SD大鼠,按照随机数表法随机分为A组(10只)、B组(10只)、C组(10只)、D组(10只)、E组(10只),其中A组大鼠建立普通深Ⅱ度烫伤模型,并予以创面覆盖浸有5.0 m L生理盐水的纱布治疗;B组大鼠建立1型糖尿病深Ⅱ度烫伤模型,并予以创面覆盖浸有5.0 m L生理盐水的纱布治疗;C组大鼠建立1型糖尿病深Ⅱ度烫伤模型,并予以创面覆盖浸有5 U诺和灵30R+5.0 m L生理盐水的纱布治疗;D组大鼠建立1型糖尿病深Ⅱ度烫伤模型,并予以创面覆盖浸有25μg rhGM-CSF+5.0 m L生理盐水的纱布治疗;E组大鼠建立1型糖尿病深Ⅱ度烫伤模型,并予以创面覆盖浸有5 U诺和灵30R+25μg rhGM-CSF+5.0 m L生理盐水的纱布治疗。分别于烫伤后第3、7、11、15、21天观察各组大鼠的创面愈合情况,并采集创面组织,检测创面组织中VEGF、HIF-1α、CD31及HIF-1αmRNA的表达情况。结果烫伤后第3、7、11、15、21天各组大鼠创面均逐渐缩小或愈合,愈合率逐渐升高,其中尤以A组、E组大鼠创面组织中成纤维细胞及新生毛细血管生长速度最快,愈合最快,B组大鼠创面变化最慢,且烫伤后第11、15天,各组大鼠创面愈合率两两对比,除A组与E组及C组与D组对比,P>0.05,差异无统计学意义外,其余各组组间两两对比,P均<0.05,差异具有统计学意义。烫伤后第3、7、11、15、21天,各组大鼠创面组织中VEGF、HIF-1α、CD31的相对阳性表达量及HIF-1αmRNA的表达水平均呈先逐渐升高后降低的趋势,各组大鼠创面组织中VEGF、HIF-1α、CD31的相对阳性表达量及HIF-1αmRNA的表达水平两两对比,其中烫伤后第3、7、11、15、21天,E组大鼠创面组织中VEGF的相对阳性表达量分别与B组、C组及D组对比,P均<0.05,差异具有统计学意义;烫伤后第7、11、15、21天,E组大鼠创面组织中HIF-1αmRNA的表达水平分别与B组、C组及D组对比,P均<0.05,差异具有统计学意义。结论胰岛素联合rhGM-CSF治疗1型糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤创面,可显著提高大鼠创面组织中VEGF的表达水平、改善局部缺氧状态,从而加快新生毛细血管再生,有效减轻创面组织炎症反应程度,促进创面坏死组织清除,缩短创面愈合时间。
文摘目的观察人骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)与猪小肠黏膜下层(SIS)的生物相容性,并检测其对人骨髓间充质干细胞增殖和分泌能力的影响。方法检测人BM-MSCs表面标记物以及多向分化能力。将第三代人BM-MSCs接种于SIS上作为为实验组,培养板单纯培养作为对照组。计算两组细胞分别在2h、4h、6h的贴壁率。通过CCK8的实验方法分别检测共培养12h、24h、36h、48h的OD值测定细胞的增殖情况。采用Hoechst33258荧光法检测2d、4d、6d两组细胞内的DNA含量。采用RT-PCR测定2d,4d,6d两组细胞VEGF m RNA的表达情况。共培养7d后在扫瞄电镜下观察人BM-MSCs在SIS上的生长状态。结果共培养2h、4h时,实验组的细胞贴壁率与对照组贴壁率差异有统计学意义(P<0.05),共培养6h,两组贴壁率差异无统计学意义(P>0.05)。共培养12h,两组细胞增殖差异无统计学意义(P>0.05),其余各时间点两组细胞增殖差异有统计学意义(P<0.05)。各时间点实验组细胞DNA含量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。各时间点实验组VEGF m RNA的表达量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。扫描电镜观察人BM-MSCs在小肠黏膜下层上生长状态良好。结论人骨髓间充质干细胞与小肠黏膜下层具有良好的生物相容性,SIS能够促进人BM-MSCs的增殖和分泌。