抑制连接蛋白43介导半通道活性促进脂多糖诱导的人牙髓细胞成牙本质分化

目的:探讨连接蛋白43(connexin 43,Cx43)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)成牙本质分化过程中的作用和机制。方法:建立SD大鼠上颌第一磨牙损伤模型,免疫荧光(im munofluorescence,IF)染色检测Cx43在牙髓组织损伤后修复中的表达模式变化。分别采用0、1、10、100和1 000 ng/mL LPS刺激hDPCs 6 h,筛选最适浓度,随后抑制和过表达hDPCs中Cx43的表达。实时定量PCR(qRT-PCR)及免疫印迹法检测Cx43和成牙本质分化相关因子牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)、牙本质基质蛋白1(dental matrix protein-1,DMP-1)、成骨相关转录因子(osterix,Osx)表达及细胞外信号调节激酶(extracellular signalregulated kinase,ERK)活性变化。进一步对hDPCs施以特异性Cx43通道抑制剂,检测Cx43介导的通道活性在hDPCs成牙本质分化中的作用,初步探讨Cx43调节LPS诱导的hDPCs成牙本质分化的作用和机制。采用SPSS 26.0软件包对数据进行统计学处理。结果:IF结果显示,在健康牙髓组织中,Cx43主要表达于成牙本质细胞层,牙损伤3~24 h,Cx43表达减弱,随后逐渐上调,直至正常水平;损伤后3天~2周,表达呈下调趋势,并且表达于成牙本质细胞层和固有牙髓中。以10 ng/mL LPS刺激hDPCs 6 h,可显著上调DSPP的mRNA表达(P<0.01)。抑制Cx43,可显著上调hDPCs内LPS诱导的DSPP、DMP-1和Osx mRNA表达(P<0.05);过表达Cx43,则显著抑制LPS诱导的成牙本质分化相关因子表达(P<0.01)和DSPP荧光强度。以10 ng/mL LPS激活hDPCs内ERK信号,过表达Cx43可显著减弱LPS诱导的ERK信号活性(P<0.01)。抑制Cx43介导的半通道,促进LPS诱导的hDPCs成牙本质分化相关因子mRNA表达和ERK信号活性(P<0.05);而阻断Cx43介导的细胞间通道,则抑制成牙本质分化。结论:Cx43参与调控牙髓组织的损伤后修复,并且其表达整体呈下调趋势;抑制Cx43或阻断HC,可促进LPS诱导的ERK信号活性和hDPCs成牙本质分化。

不同程度根管填充治疗牙体牙髓患者的临床疗效分析

目的对不同程度根管填充在治疗牙体牙髓患者中的临床效果进行分析。方法选取80例牙体牙髓患者作为研究对象,对这些患者进行随机均分,第一组患者为观察组,其在临床治疗中采用的是适量填充方法,第二组患者为对照组,患者在临床治疗中采用的是超量填充治疗方法,两组患者的人数都为40例。结果通过对两组患者的临床治疗效果进行对比分析可以发现,在观察组患者中,其出现轻微疼痛的患者人数占据了97.5%,而对照组患者仅为82.5%,两组患者间的数据差异具有统计学意义,即P<0.05。结论对于牙体牙髓患者,其在临床治疗中采用适量填充方法进行治疗能够有效降低患者临床治疗中的疼痛,提高患者的临床治疗效果。

lncRNA TUG1对人牙髓干细胞成骨/成牙本质分化的影响

目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)牛磺酸上调基因1(taurine upregulated 1,TUG1)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)增殖及成骨/牙本质向分化的影响。方法分离培养hDPSCs,流式细胞术检测细胞表面抗原CD44、CD45、CD73、CD90、CD133、STRO-1,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和茜素红染色鉴定其分化能力。hDPSCs成骨诱导0、7、14 d收集RNA,qRT-PCR检测TUG1的表达水平。构建携带sh-TUG1的慢病毒载体pSLenti-U6-shRNA(TUG1)-CMV-EGFP-F2A-Puro-WPRE,并通过感染hDPSCs及嘌呤霉素筛选建立稳定沉默TUG1的hDPSCs细胞系,CCK-8检测hDPSCs增殖能力,ALP和茜素红染色及定量检测hDPSCs的早期ALP活性和晚期矿化结节的形成,qRT-PCR和Western blot检测成牙本质及成骨分化相关的基因牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)、牙本质基质蛋白-1(dentine matrix protein 1,DMP-1)、Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)基因及蛋白表达变化。结果成功分离、培养和鉴定hDPSCs,hDPSCs成骨向分化过程中TUG1的表达明显增加(P<0.05)。沉默TUG1后hDPSCs的增殖能力下降(P<0.05),ALP活性降低,矿化结节形成减少;成牙本质分化基因DSPP、DMP-1以及成骨分化基因Runx2、OCN、OPN表达也显著降低(P<0.05)。结论沉默TUG1可抑制hDPSCs的增殖及成骨/成牙本质分化。

Cx43通过Erk1/2促进BMP-2诱导的人牙髓细胞成牙本质分化

目的:探讨骨形态发生蛋白(BMP)-2和连接蛋白(Cx) 43在促进人牙髓细胞(hDPCs)成牙本质分化过程中的联系。方法:在hDPCs中过表达Cx43并施以300 ng/m L BMP-2刺激1 h,qRT-PCR、Western blot和免疫荧光(IF)检测成牙本质分化标记物的表达变化;检测BMP-2介导的Smad1/5/9和Erk1/2通路活性,并施加PD98059(Erk1/2抑制剂)刺激1 h,检测抑制Erk1/2后过表达Cx43对BMP-2诱导的DSPP等的表达变化影响。结果:BMP-2上调hDPCs内osterix、DSPP、DMP-1、ALP和OCN RNA水平以及osterix蛋白表达,增强hDPCs中DSPP的荧光强度。过表达Cx43明显促进BMP-2诱导的hDPCs成牙本质分化。BMP-2激活hDPCs中的Smad1/5/9通路,过表达Cx43上调hDPCs中Erk1/2磷酸化水平。抑制Erk1/2明显减弱过表达Cx43对BMP-2诱导的osterix、DSPP、DMP-1、ALP、OCN mRNA表达以及osterix蛋白水平和DSPP染色强度的增强作用。结论:Cx43通过Erk1/2促进BMP-2诱导的osterix和DSPP等表达以及hDPCs成牙本质分化。

牙髓干细胞共培养改善1-甲基-4-苯基吡啶离子诱导的神经元凋亡

背景:如何利用牙髓干细胞改善神经损伤对于神经退行性疾病的临床治疗具有重要的意义。目的:探讨牙髓干细胞共培养对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenyl pyridinium,MPP^+)诱导的神经元凋亡的影响。方法:分离培养人牙髓干细胞,进行形态观察和成脂成骨诱导分化能力鉴定;分离中脑神经元细胞,利用Transwell小室进行牙髓干细胞和神经元共培养,然后加入MPP^+干预48 h,通过Tunel染色和western blot法检测牙髓干细胞对MPP^+诱导的神经元凋亡的影响。结果与结论:(1)牙髓干细胞形态呈梭形,且能够成功向成脂成骨方向诱导分化;(2)牙髓干细胞和神经元细胞共培养后,减轻了MPP^+诱导的神经元凋亡;(3)MPP^+处理后降低了Bcl-2的表达,促进了Bax和cleaved caspase3的表达,而在牙髓干细胞共培养条件下,抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显上升,促凋亡蛋白Bax和cleaved caspase3表达明显下降;(4)结果表明,人牙髓干细胞可以保护或修复体外MPP^+诱导的神经元损伤,该保护作用可能是通过人牙髓干细胞的旁分泌作用来实现的。

交联剂对一种酸蚀-冲洗粘接剂SB2的牙本质粘接性能的影响

目的:探索3种交联剂对一种酸蚀-冲洗粘接剂Adper^(TM)Single Bond 2(SB2)的牙本质粘接性能的影响。方法:72颗人离体磨牙随机分为4组(n=18),分别应用蒸馏水,碳二亚胺(EDC,1 mol/L),表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG,0.1%)和核黄素(RF,0.1%)预处理后涂布SB2,然后制作树脂粘接试件。每种预处理方式的试件分为即刻组和老化组(n=9),对老化组样本行热循环处理。分别在粘接后24 h和热循环老化后检测剪切强度,观察断裂模式,并通过扫描电镜(SEM)观察粘接界面和界面纳米渗漏。双因素方差分析和Tukey检验分析剪切强度。结果:4组即刻组剪切强度差异无统计学意义(P>0.05),老化前后EDC和EGCG组剪切强度差异无统计学意义(P>0.05)。预处理方式和老化的交互作用差异有统计学意义(P<0.05)。断裂模式及SEM观察显示EDC和EGCG组具有良好的粘接界面。结论:EDC和EGCG预处理不影响SB2的即刻剪切强度,并可维持老化后的剪切强度,改善粘接界面。

新型冠状病毒肺炎防疫期牙体牙髓病科的防控及诊疗

新型冠状病毒(novel coronavirus,SARS-CoV-2)主要经呼吸道飞沫传播和接触传播,人群普遍易感。本文通过查阅相关文献及国家对新型冠状病毒防控政策,针对牙体牙髓病科的诊疗特点、口腔医疗环境的易感性,特别是牙体牙髓病科医护人员急症处理及医患防护等方面进行探讨,为即将复工的牙体牙髓病科医务工作者提供一定指导与建议,以加强对口腔急诊过程中交叉感染的防控。

碳二亚胺联合不同粘接技术对牙本质粘接性能的影响

目的:探讨碳二亚胺(EDC)联合不同粘接技术对牙本质粘接性能的影响。方法:取离体第三磨牙64颗,随机分为8组(n=8):EWB和EWBa(无预处理+乙醇湿粘接)、E-EWB和E-EWBa(0.5 mol/L EDC+乙醇湿粘接)、E-WB和E-WBa(0.5 mol/L EDC+湿粘接)、E-DB和E-DBa(0.5 mol/L EDC+干粘接),其中,EWB、E-EWB、E-WB、E-DB为即刻组,EWBa、E-EWBa、E-WBa、E-DBa为老化组。每组6个试件,测试剪切强度,观察、记录断裂模式,剩余2个试件电镜下观察粘接界面。采用SPSS 20.0软件包对数据进行统计学分析。结果:剪切强度在EWB组和E-EWB组、E-EWB组和E-WB组间差异无统计学意义(P>0.05),E-EWB组、E-WB组大于E-DB组,差异有统计学意义(P<0.05);E-EWBa组大于EWBa组,差异有统计学意义(P<0.05),E-EWBa组、E-WBa组和E-DBa组剪切强度递减,差异有统计学意义(P<0.05)。EDC、粘接技术和老化主效应的影响均有统计学意义(P<0.05),老化因素与EDC、粘接技术之间的交互效应均有统计学意义(P<0.05)。乙醇湿粘接和湿粘接的断裂模式以树脂破坏、粘接界面破坏和混合破坏为主,干粘接以粘接界面破坏为主。扫描电镜下E-EWB组混合层最厚且致密,EWBa组、E-EWBa组混合层与粘接剂之间有微小裂隙,E-WBa组混合层内可见部分不均匀裂缝,E-DBa组中混合层裂缝明显。结论:EDC联合乙醇湿粘接获得最高剪切强度且具有粘接耐久性。

磨牙根管预备中ProTaper机用镍钛锉的应用分析

目的研究磨牙根管预备中ProTaper机用镍钛锉的应用效果。方法选取108例磨牙牙髓炎患者(108颗牙)作为研究对象,分组比较根管预备平均操作时间、疼痛率及根管充填质量。结果对比对照组,研究组根管预备平均操作时间更短,疼痛率更低,根管充填适充率明显更高(P<0.05)。结论磨牙根管预备中ProTaper机用镍钛锉的应用效果显著,可缩短根管预备时间,减轻疼痛,还可提升根管充填质量,值得推广应用。

探究制作假壁安装橡皮障进行根管预备患者的配合

探讨制作假壁安装橡皮障进行根管预备的配合及效果。方法 选取我院收治的需要对双侧下颌第一磨牙进行根管预备的患者62例作为研究对象,以随机数字表法将本批次患者分为观察组及对照组,两组均使用橡皮障进行根管预备,对照组采取常四手操作配合,观察在对照组基础上采取了引导患者进行配合的方式,对比两组治疗满意度及治疗前后负性情绪。结果 观察组治疗满意度高于对照组(P<0.05),观察组治疗负性情绪评分低于对照组(P<0.05)。结论 在口腔科临床工作之中对制作假便装橡皮障实施根管预备,并与患者进行有效配合的效果比较良好。

连接蛋白43与牙髓组织炎症和修复关系的研究进展

连接蛋白43(Cx43)是一种跨膜蛋白,在多种组织的生理和病理过程中发挥重要作用。Cx43通过形成间隙连接通道和半通道,分别介导相邻细胞间以及细胞与细胞外环境间的通讯。Cx43在牙髓组织的感染及炎症反应过程中发生表达变化,并能够促进牙髓细胞的成牙本质分化,表明Cx43在牙髓感染与修复过程中可能发挥一定作用。本文就Cx43在炎症与修复过程中的功能以及在牙髓组织中的作用进行综述,探讨Cx43在牙髓组织炎症与修复反应过程中的作用机制,以寻求分子靶向疗法在牙髓疾病治疗中的可行性。

EDTA对纤维桩粘接的影响

纤维桩具有良好的性能,常应用于残冠残根的修复治疗。牢固的粘接是纤维桩修复远期成功的重要保证。桩道预备过程中产生的玷污层是影响纤维桩粘接的重要因素。乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)用于桩道清理具有独特的优势。本文就EDTA及EDTA与其他的材料和技术的联合运用进行综述,为纤维桩的临床粘接提供一定的参考。

含不同溶剂的碳二亚胺对丙酮基酸蚀冲洗粘接系统粘接性能的影响

目的:探索水、乙醇、丙酮作选择溶剂时,碳二亚胺(carbodiimide,EDC)对丙酮基酸蚀冲洗粘接系统粘接性能的影响。方法:选择64颗离体第三磨牙,按照预处理剂种类及是否老化,随机分为8组(n=8),S0、S0a:去离子水;S、Sa:EDC水溶液;E、Ea:EDC乙醇溶液;B、Ba:EDC丙酮溶液。预处理后,采用Prime Bond NT完成粘接试件制备。S0、S、E、B为即刻组,S0a、Sa、Ea、Ba组进行冷热循环5000次老化处理。每组随机选取6个试件,测定剪切强度,观察断裂模式,剩余2个试件在SEM下观察粘接界面微观形貌。采用SPSS 20.0软件包对剪切强度进行统计学处理。结果:S组剪切强度大于S0组,Sa组大于S0a,差异有统计学意义(P<0.05),S、E、B组之间差异无统计学意义(P>0.05)。Sa、Ea、Ba组剪切强度依次增大,差异有统计学意义(P<0.05)。EDC、老化、溶剂单独主效应有统计学意义(P<0.05),EDC和老化之间有交互效应(P<0.05)。即刻组断裂模式以混合破坏为主,老化组以界面断裂为主。SEM下观察即刻组混合层均匀完整,S0a组裂纹最大,Ba组仅少量裂纹。结论:水、乙醇和丙酮作溶剂的EDC预处理,可提高丙酮基酸蚀冲洗粘接系统即刻和老化后粘接强度;丙酮作溶剂时,可最大限度地提高老化后粘接强度。

显微镜下抛光对纳米树脂边缘密合性的影响

目的:评价显微镜下不同抛光系统及时机对树脂边缘密合性的影响。方法:选择2020年5~10月于门诊就诊患者,80颗患中龋的磨牙,随机分组,每组均20颗患牙,A组为充填后采用抛光轮套装OptraPol进行即刻抛光,B组为充填后采用OptraPol进行延迟抛光(1天后),C组为充填后采用树脂抛光轮套装Composite polishing kit进行即刻抛光,D组为充填后采用Composite polishing kit进行延迟抛光。半年后观察树脂密合性。结果:四组树脂充填后抛光半年后成功率无统计学差异(P>0.05)。结论:OptraPol和Composite polishing kit抛光系统在显微镜下不同时机抛光对复合树脂修复体边缘密合性无显著影响。

骨形态发生蛋白9对人牙周膜干细胞增殖分化及信号通路的影响

目的研究骨形态发生蛋白9(BMP9)对人牙周膜干细胞增殖分化及信号通路的影响。方法体外培养人牙周膜干细胞(hPDLSCs),将细胞分为空白组、绿色荧光蛋白(GFP)组、BMP9组、BMP9+5μmol·L-1SP组及BMP9+10μmol·L-1SP组;GFP组用携带绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-GFP)感染细胞,BMP9组、BMP9+5μmol·L-1SP组及BMP9+10μmol·L-1SP组则用携带BMP9的腺病毒(Ad-BMP9)感染;BMP9+5μmol·L-1SP组及BMP9+10μmol·L-1SP组在BMP9组的基础上分别加入5,10μmol·L-1抑制剂SP600125。用逆转录定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Runx2、OPN和OCN基因的表达,用碱性磷酸酶(ALP)染色试剂盒法检测ALP活性,用蛋白免疫印迹法检测JNK信号通路相关蛋白表达情况。结果GFP组、BMP9组、BMP9+5μmol·L-1SP组、BMP9+10μmol·L-1SPALP活性水平分别为3.87±0.16,8.11±0.62,8.09±0.61,8.07±0.59;Runx2基因表达水平分别为1.07±0.01,2.13±0.02,1.87±0.02,1.85±0.02;OPN基因表达水平分别为1.06±0.01,4.72±0.24,3.86±0.22,3.69±0.25;OCN基因表达水平分别为1.01±0.01,4.26±0.27,3.84±0.23,3.66±0.17;BMP9组ALP活性显著高于其余3组,BMP9组Runx2、OPN、OCN基因表达水平显著高于其余3组。Westernblot检测显示,GFP组、BMP9组、BMP9+5μmol·L-1SP组、BMP9+10μmol·L-1SP组p-JNK蛋白相对表达量分别为0.24±0.03,0.32±0.04,0.21±0.03,0.19±0.02;JNK蛋白相对表达量分别为0.26±0.03,0.51±0.04,0.33±0.03,0.26±0.03;与BMP9组比较,随着SP600125浓度增加,JNK蛋白条颜色逐渐变浅。结论BMP9能够促进hPDLSCS细胞增殖、分化,对Runx2、OPN、OCN基因表达有促进作用,对JNK信号通路有促进作用。

根管显微镜结合超声根管器械下采用四手操作的护理方法

探讨根管显微镜结合超声根管器械下采取四手操作的护理措施。方法 选取我院收治的显微镜下根管内断针取出术82例口腔根管内断针患者,随机平均分为观察组及对照组,对照组采取常规护理,观察组在对照组的基础上应用四手操作护理,对比手术成功率及护理满意度。结果 观察组各牙齿手术的成功率均高于对照组(P<0.05),观察组护理满意度高于对照组(P<0.05)。结论 根管显微镜结合超声根管器械下采取四手操作护理可有效提升手术成功率和病人满意度。