TETs与细胞程序性死亡相关基因在山羊妊娠早期输卵管及子宫角的表达

【目的】TET(ten-eleven translocation)家族蛋白在调控胚胎和胎盘发育等过程中具有重要作用,输卵管与子宫内膜细胞的死亡平衡会影响受精卵及早期胚胎的发育。因此探讨TETs、细胞程序性死亡相关基因和附植相关基因在妊娠早期山羊输卵管及子宫角中的表达规律及其潜在调控作用,以期为研究胚胎发育及附植的分子机制奠定基础。【方法】以合川白山羊为研究对象,采集妊娠19d(P19)山羊子宫角及输卵管组织,以空配19d(C19)为对照,利用H.E染色观察C19组和P19组山羊子宫角组织形态,利用qRT-PCR技术检测了胚胎附植相关基因(WNT5a、OPN、VEGFA)、TETs(TET1、TET2、TET3)、细胞程序性死亡相关基因(凋亡相关基因(BAX、BCL2、Caspase9)、焦亡相关基因(GSDMD、NLRP3、Caspase1)和炎症相关基因(NF-kB、TNF-α))的相对表达,并分析了TETs及细胞程序性死亡相关基因在输卵管和子宫角组织的表达相关性。【结果】H.E染色结果显示,在P19组中山羊子宫角的腺体增多,形态多变。qRT-PCR结果显示,OPN在P19组山羊子宫角中的表达量极显著高于C19组(P<0.01),BAX/BCL2的表达量显著增加(P<0.05),而WNT5a和VEGFA表达差异不显著;TET1、TET2、TET3在山羊子宫角及输卵管中均有表达,在C19组和P19组山羊子宫角中TET1及TET2的表达量极显著高于C19组和P19组中TET3的表达(P<0.01);在P19组山羊输卵管中TET2(P<0.01)、NF-kB(P<0.01)、Caspase1(P<0.01)、GSDMD(P<0.05)显著增高。相关性分析表明,输卵管中TET2与TET3(P<0.01)、NF-kB(P<0.01)、Caspase9(P<0.05)显著正相关;子宫角中,TET3与VEGFA(P<0.05)、WNT5a(P<0.01)显著负相关,胚胎附植关键基因OPN与Caspase1(P<0.01)、NLRP3(P<0.05)、GSDMD(P<0.05)显著正相关,而细胞焦亡关键基因GSDMD在输卵管与子宫角中均与Bax(P<0.05)、Caspase1(P<0.01)、NLRP3(P<0.05)呈显著正相关。【结论】在妊娠早期山羊子宫角和输卵管中TETs表达与细胞程序性死亡部分基因表达具有一定的相关性,推测TETs与细胞凋亡或焦亡的发生对输卵管、受精卵、早期胚胎及子宫的发育具有一定的调控作用。胚胎附植关键基因OPN与焦亡相关基因显著相关,暗示妊娠早期子宫角中细胞焦亡的发生可能参与胚胎附植。为研究TETs通过细胞程序性死亡相关基因在妊娠早期输卵管及子宫角中的表达规律提供了理论参考。