猪肠道微生物对不同分子结构蛋白质饲料源氨基酸消失率的差异性

本试验旨在研究猪肠道微生物对不同分子结构蛋白质饲料源(大豆蛋白质、大豆肽、单体氨基酸)氨基酸消失率的差异性。选取3头30 kg左右的健康生长猪,屠宰后分别无菌取50 mL空肠、回肠和盲肠内容物置于500 mL厌氧基础培养基中,梯度离心获得相应肠道微生物悬混液。在250 mL锥形瓶中加入50 mL厌氧基础培养基,先取5 mL空肠微生物悬混液接种于50 mL预热的培养基中培养4 h后取5mL培养液用于氨基酸含量和酶活性测定,再加入5 mL回肠微生物悬混液继续培养4 h后取5 mL培养液用于氨基酸含量和酶活性测定,最后加入5 mL盲肠微生物悬混液继续培养4 h后取5 mL培养液用于氨基酸含量和酶活性测定。试验分为3组,分别为大豆蛋白质组(基础培养基+大豆蛋白质+微生物)、大豆肽组(基础培养基+大豆肽+微生物)和单体氨基酸组(基础培养基+单体氨基酸+微生物),另设1个负对照组(基础培养基+微生物),3个正对照组(基础培养基+大豆蛋白质、基础培养基+大豆肽和基础培养基+单体氨基酸),每组设3个重复。结果表明:空肠、回肠、盲肠中微生物对3种不同分子结构蛋白质饲料源的赖氨酸脱羧酶、精氨酸脱羧酶、组氨酸脱羧酶、甘氨酸脱羧酶、酪氨酸脱羧酶、谷草转氨酶、谷丙转氨酶和腺苷脱氨酶活性均有显著或极显著影响(P<0.05或P<0.01),单体氨基酸组酶活性整体上高于其他2组,3组间酶活性大小与氨基酸的消失率高低并不完全一致。不同分子结构蛋白质饲料源在加入不同肠道的微生物培养后氨基酸消失率存在极显著差异(P<0.01)。大豆蛋白质组的氨基酸消失率由高到低依次为:盲肠、空肠、回肠,结构较为简单的大豆肽组和单体氨基酸组的氨基酸消失率由高到低依次为:回肠、盲肠、空肠,大豆蛋白质组的总氨基酸消失率最高。综上,在肠道微生物体外培养下,3种不同分子结构形式的蛋白质饲料源之间氨基酸的消失率存在较大差异,肠道微生物对大豆蛋白质的分解更活跃。

牛磺酸转运体的调节机制及其在动物营养研究中的意义

牛磺酸(Tau)是可兴奋组织细胞中最丰富的游离氨基酸,具有广泛的生物学效应,主要通过细胞膜上的牛磺酸转运体(TAUT)转运入膜。TAUT受许多因素调节,如p53、sp1、c-Jun、Wilms肿瘤1基因(WT1)、渗透压反应元件(TonE)、核因子-κB(NF-κB)、抗氧化应激反应元件(ARE)、热应激因子1(HSF1)和蛋白激酶C(PKC)等。本文综述了TAUT的种类与结构、TAUT在转录与转录后水平上的调节机制及其在动物营养研究中的意义,以期为Tau在养殖业中的应用提供参考。

畜牧微生物学实验教学改革瓶颈与要点

针对畜牧微生物学实验教学过程中发现的问题和实验培养方案的不科学性,提出以培养学生的综合实验能力为实验课程的中心目标,就微生物学实验课程教学内容的组织与更新、实验条件建设、实验过程与结果的评价、实验教学与科研相结合等方面进行教学改革实践,设计能解决实际问题的综合性连续性实验项目,加强学生对畜牧微生物学和微生物发酵知识的掌握,增强学生实验独立实验操作能力和分析解决问题能力,变机械操作为科学探索,旨在培养学生的实验动手能力和实验思维能力,达到教学目的。

猪内源氨产生机制及其营养调控措施

猪内源氨产生过量对动物危害甚大,能引发多种炎症、抑制生长性能、降低免疫力、造成贫血和组织缺氧、丧失食欲,同时还能产生严重的环境污染。全面了解猪内源氨产生机制,并采取相应的营养调控减排措施从根本上减少氨的排放,对动物健康有着重要的意义。本文首先阐述了饲粮蛋白质降解产氨机制、肠道微生物产氨机制和谷氨酰胺的脱酰氨基作用产氨机制;然后从氨在肝脏和血液中循环过程解释其在体内的代谢过程;最后综述了目前国内外有关猪内源氨的营养调控措施,包括降低饲粮蛋白质水平、添加植物提取物和益生菌,以期为减少环境中氨的浓度及提高猪的生长性能提供理论依据。

牛磺酸消炎抗氧化机理及其在幼龄动物中的应用

牛磺酸广泛存在于动物组织细胞内,具有消炎抗氧化生物学功能。目前研究发现牛磺酸消炎抗氧化机理包括:通过雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路促进肠黏膜修复,通过抑制Toll样受体4(TLR4)信号通路缓解肠黏膜炎症反应,通过瞬时受体电位通道M2(TRPM2)离子通道改善细胞线粒体生理功能。本文就牛磺酸消炎抗氧化机理以及在幼龄动物中的应用进行综述,以期为牛磺酸在消炎抗氧化方面研究提供参考意义。

一种猪胃肠道内容物与粪便微生物梯度离心分离方法

本试验旨在探究一种猪胃肠道内容物与粪便微生物梯度分离方法。试验首先用分离缓冲液对猪胃肠道内容物及粪便样品进行稀释,寻找最佳稀释比例,再进行梯度离心得到胃肠道内容物及粪便样品中的微生物菌体。本方法得到胃、空肠和回肠内容物样品与分离缓冲液的最佳稀释比例范围为8.0%~12.0%,样品的称取量范围为3.2~4.8 g;盲肠、结肠内容物及粪便样品与分离缓冲液的最佳稀释比例范围为2.0%~4.0%,样品的称取量范围为0.8~1.6 g。对饲喂3种饲粮蛋白质水平(12.0%、15.0%和18.0%)30 kg的猪胃肠道内容物与粪便微生物进行分离,并对其回肠内容物和粪便中微生物氨基酸组成以及胃肠道内容物与粪便中微生物多样性进行检测。结果显示:回肠内容物和粪便中微生物菌体大部分氨基酸对饲粮不同蛋白质水平的营养模式响应效果显著(P<0.05),胃肠道内容物与粪便样品微生物的聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)条带丰富和清晰。试验结果表明,该方法分离程度高,获取菌体干重多,同时还具有成本低廉、操作简单、重复性好等特点,可为更深层次的研究肠道微生物的生理功能提供方法。

肠道微生物对仔猪胆汁酸谱及胆汁酸代谢的影响

旨在研究肠道微生物对仔猪肝脏、空肠内容物和粪便胆汁酸谱及仔猪胆汁酸代谢的影响。随机选择无菌剖腹产所得仔猪11头,分为无菌猪组(GF组,5头)和粪菌移植组(FMT组,6头)。GF组始终保持无菌状态,FMT组在7日龄时口服植入健康猪源粪菌。42日龄时,采集肝脏组织、空肠内容物、新鲜粪便用于胆汁酸定量,肝脏组织与空肠组织进行胆汁酸代谢相关基因定量。结果表明:相比于GF组,FMT组仔猪粪便中的总胆汁酸水平显著高于GF组(P<0.01);FMT仔猪空肠内容物和粪便中次级胆汁酸占总胆汁酸的比例显著高于GF仔猪(P<0.05),肝脏中也发现同样的趋势(P<0.05);相比于GF仔猪,FMT仔猪肝脏中CYP7A1、BAT、FXR等与胆汁酸合成、结合与转运相关基因的下调,肠道中转运蛋白MRP2基因表达上调。由此可见,肠道微生物的转入与定植不仅能够增加仔猪胆汁酸的排泄,提高次级胆汁酸占比,改变仔猪胆汁酸谱,而且还影响胆汁酸的肝肠循环过程。

饲粮添加β-葡聚糖对断奶仔猪生长性能和肠道微生物区系的影响

本试验旨在研究β-葡聚糖替代抗生素对断奶仔猪生长性能、肠道微生物区系和微生物氨基酸脱羧酶活力的影响。试验选取30头28日龄断奶健康的(大约克×荣昌)×长白内三元杂交阉公仔猪,随机分为3组:对照组饲喂基础饲粮,杆菌肽锌组饲喂在基础饲粮中添加100 mg/kg杆菌肽锌的饲粮,β-葡聚糖组饲喂在基础饲粮中添加400 mg/kgβ-葡聚糖的饲粮。每组10个重复,每个重复1头猪,预试期4 d,正试期为28 d。试验结果表明:与对照组相比,β-葡聚糖组和杆菌肽锌组断奶仔猪的生长性能和腹泻指数显著提高(P<0.05),料重比显著降低(P<0.05)。β-葡聚糖组与杆菌肽锌组之间仔猪的生长性能、腹泻指数和料重比均无显著差异(P>0.05)。与杆菌肽锌组相比,饲粮中添加β-葡聚糖能显著降低断奶仔猪回肠微生物色氨酸脱羧酶和赖氨酸脱羧酶活力(P<0.05)。杆菌肽锌组和β-葡聚糖组结肠微生物蛋氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶和赖氨酸脱羧酶活力显著低于对照组(P<0.05),色氨酸脱羧酶活力显著高于对照组(P<0.05)。饲粮中添加β-葡聚糖未改变结肠微生物优势菌群的组成,但提高了结肠乳酸杆菌、韦荣球菌、拟杆菌、厚壁菌、毛螺菌等有益菌的相对丰度,降低了有害菌梭状芽孢杆菌的相对丰度,且与添加杆菌肽锌效果相当。综上,在饲粮中添加400 mg/kg的β-葡聚糖提高了断奶仔猪的生长性能,降低了肠道中微生物氨基酸脱羧酶的活力,并提高了结肠微生物的相对丰度和降低了有害菌的相对丰度;β-葡聚糖在促进肠道有益菌生长方面优于杆菌肽锌。

circRNAs对哺乳动物胎盘养分转运和胎儿发育的影响

circRNAs是一类具有闭合环状结构的内源非编码RNA分子。近几年的研究发现,circRNAs在真核生物中普遍存在,它不但有一定的保守性和细胞特异性,而且还具有调控基因转录的作用。胎盘养分转运对胎儿发育非常重要,甚至决定了胎儿能否顺利产出,对日后生长发育状况也有很大影响。猪和鼠上的研究均表明,circRNAs在胎盘养分转运和胎儿发育过程中具有重要的调控作用。本文综述了circRNAs的来源、产生机制、分类、特点及其功能,并结合动物生产实际情况综述了circRNAs对哺乳动物胎盘中葡萄糖、氨基酸、脂肪酸等养分转运及胎儿发育的调控作用。

中药药渣作为畜禽饲料或饲料添加剂的研究进展

中药药渣是中药制药过程中产生的主要废弃物,每年产量高达数千万吨,传统处理方式不仅造成严重的环境危害,还使大量资源被浪费,因此,把中药药渣作为饲料原料或饲料添加剂来开发极具研究意义和应用价值。中药药渣中含有多糖、纤维素、半纤维素、木质素、粗脂肪、粗蛋白质、矿物质元素等营养物质,以及药物生物活性组分,如黄酮、生物碱、多酚和萜类等,可以应用到畜禽养殖生产中,促进动物生产和增强动物保健。本文综述近些年的相关文献,以中药药渣生产处理现状和对畜禽作用效果为重点,探索中药药渣及其生物发酵产物作为畜牧业投入品的可行性和稳定性,以期为中药药渣资源化利用提供理论参考。

瘤胃蛋白质营养调控

蛋白质是构成动物体组织和维持生命活动不可或缺的物质之一。饲料中的蛋白质在消化道内被分解成氨基酸和小肽,然后进入肠系膜静脉,汇入门静脉,经过肝脏的转化代谢后进入心脏,经血液循环运送至全身组织/器官并被利用。近年来,由于蛋白质饲料资源日益短缺,对于反刍动物而言,如何加强饲料蛋白质过瘤胃保护,提高饲料蛋白质利用效率变得尤为重要。文章主要从蛋白质的过瘤胃保护和反刍动物蛋白质营养调控两方面对反刍动物蛋白质营养研究新进展进行综述,旨在为后续相关研究提供有益的参考。

口服益生菌Escherichia coli Nissle 1917调控断奶仔猪空肠黏膜屏障功能的机理研究

旨在探讨口服益生菌Escherichia coli(E.coli)Nissle 1917调控病原菌E.coli Abbottstown攻毒或未攻毒21d断奶仔猪肠道屏障功能的机理。将20头21d断奶仔猪((6.35±0.38)kg)随机分为4组:(1)饲喂基础日粮的对照组(CON);(2)正试期口服E.coli Nissle 1917组(EcN);(3)预试期E.coli Abbottstown攻毒组(EcA);(4)预试期E.coli Abbottstown攻毒和正试期口服E.coli Nissle 1917组(EcN+EcA)。每个处理5个重复,每个重复1头仔猪。试验分为3d预试期和21d正试期。预试期EcA和EcN+EcA组的断奶仔猪接种5×10~9E.coli Abbottstown。正试期EcN和EcN+EcA组仔猪每天每头口服1×10~10E.coli Nissle 1917。试验结果表明,未攻毒的断奶仔猪中,与CON相比,口服1×10~10E.coli Nissle 1917能显著改善生长性能(P<0.05),降低腹泻率,提高oCcludin蛋白水平(P<0.05),显著降低空肠黏膜calprotectin蛋白水平(P<0.05),显著下调空肠黏膜蛋白激酶R(Protein kinase R,PKR)、toll样受体-2(Toll-like receptor-2,TLR-2)和真核起始因子-5A(eukaryotic initiation factor-5A,eIF-5A)mRNA的相对表达丰度(P<0.05),上调空肠黏膜内皮生长因子(Endothelial growth factor,EGF)、肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor,HGF)、胰岛素样生长因子(Insulin-like growth factor,IGF-I)、三叶肽因子-3(trefoil peptide factor-3,TFF-3)mRNA的相对表达丰度(P<0.05);在E.coli Abbottstown攻毒的断奶仔猪中,与EcA组相比,口服1×10~10E.coli Nissle 1917能显著改善生长性能(P<0.05),降低腹泻率,降低血清二胺氧化酶(DAO)活性(P<0.05)和一氧化氮(NO)含量(P<0.05),下调空肠黏膜PKR、eIF-5A和TLR-2 mRNA相对表达丰度(P<0.05),显著降低空肠黏膜calprotectin蛋白水平和淋巴细胞数量(P<0.05),显著提高空肠黏膜oCcludin蛋白水平(P<0.05),上调空肠黏膜IGF-I、HGF、TFF-3和EGF mRNA相对表达丰度(P<0.05)。本试验结果提示,口服1×10~10E.coli Nissle 1917能降低病原大肠杆菌攻毒或未攻毒21日龄断奶仔猪空肠黏膜屏障功能的损伤。

日粮添加绿原酸和橙皮苷对断奶仔猪生长性能与肠道功能的影响

旨在研究日粮添加绿原酸(chlorogenic acid,CHA)和橙皮苷(hesperidin,HDN)对断奶仔猪生长性能与肠道功能的影响。本研究选择40头健康长白×大白×荣昌猪三元杂交断奶阉公仔猪((28±2) d,(8.97±1.48) kg),按单因素随机分组分为4组:基础日粮组(CON)、杆菌肽组(BT)、绿原酸组(CHA)、橙皮苷组(HDN)。每组10个重复,每个重复1头,采用单栏饲养。试验期共33 d,其中预试期5 d。测定生长性能、血浆和肝生化指标、肠道黏膜组织形态、肠道黏膜相关蛋白含量与mRNA丰度、肠道微生物区系。结果表明:1)与对照组相比,日粮中添加CHA和HDN能显著提高断奶仔猪平均日增重、平均日采食量、胸腺指数和仔猪小肠长度指数(P<0.05);显著提高血浆和肝组织中总抗氧化能力、总超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽还原酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力(P<0.05)。2)CHA、HDN和BT组仔猪空肠绒毛高度和完整性上均优于对照组(P<0.05)。3)CHA组仔猪β-defensins 2蛋白水平显著高于对照组(P<0.05),CHA组仔猪空肠黏膜TNF-αmRNA丰度显著高于HDN组和对照组(P<0.05),HDN组仔猪空肠黏膜IL-8 mRNA丰度高于BT组(P<0.05)。仔猪空肠黏膜HSP_(90)和TLR4蛋白质水平以及TGF-β1 mRNA丰度各处理组间差异不显著(P>0.05)。4)CHA和HDN能维持断奶仔猪结肠微生物区系的多样性,保护肠道微生态平衡。研究结果显示,日粮添加绿原酸和橙皮苷能显著提高断奶仔猪的平均日增重、平均日采食量、空肠黏膜绒毛高度,显著降低料肉比。绿原酸通过促进肠道上皮BD2的表达发挥其抗菌作用,绿原酸通过提高TNF-α发挥抗炎作用,绿原酸和橙皮苷具有抗氧化作用,能维持断奶仔猪肠道微生物区系的多样性。

革兰氏阴性益生菌大肠杆菌Nissle 1917益生机理及其在仔猪方面的应用

革兰氏阴性菌大肠杆菌(E.coli)Nissle 1917(EcN)是非乳酸益生菌中研究最多的益生菌。EcN血清型为O6∶K5∶H1,具有独特的基因组、半粗糙O6-脂多糖(LPS)表型、K5型荚膜、3种不同的菌毛(F1A、F1C和卷曲菌毛)。EcN具有小菌素和铁摄取系统等特殊适应性因子,在与其他微生物竞争中起关键作用。EcN能长期稳定定植于肠道,与肠上皮细胞相互作用,发挥免疫调节生物学功能。本文就EcN的特征、定植机制、免疫调节机理和在仔猪方面应用的研究现状进行综述,以期为益生菌EcN和其他益生革兰氏阴性杆菌在动物方面研究和应用提供参考。

胶红酵母产类胡萝卜素固态发酵工艺

【目的】优化胶红酵母固态发酵底物与发酵条件,提高类胡萝卜素产量,改善发酵产物营养价值,降低生产成本。【方法】选用胶红酵母TZR2014作为发酵菌种,采用Design-Expert软件的Mixture-Design设计固态发酵底物的配比,各底物原料的范围如下:麸皮50%—80%、豆粕6%—20%、玉米粉3%—15%、米糠2%—14%、玉米浆2%—10%、硫酸铵0.4%—2.5%、磷酸二氢钾0.05%—0.5%和硫酸镁0.03%—0.3%,通过固态发酵工艺生产类胡萝卜素,并根据类胡萝卜素的产量来确定最优的发酵底物。确定最适发酵底物配比后,利用L16(45)正交设计对发酵条件进行优化设计,各参数的范围如下:接种量5.0%—12.5%、发酵时间60.0—96.0 h、发酵温度26—32℃、p H4.0—7.0、含水量60.0%—75.0%,根据试验结果确定胶红酵母产类胡萝卜素的最优发酵条件。研究优化的胶红酵母固态发酵工艺对发酵产物粗纤维、粗蛋白质、水分、粗脂肪、粗灰分、钙、磷和氨基酸等营养物质的影响。【结果】胶红酵母发酵产物中类胡萝卜素含量与固态发酵底物中麦麸的添加量呈显著负相关(r=-0.336,P=0.045),与发酵底物中玉米浆的添加量呈显著正相关(r=0.344,P=0.040),与发酵底物中米糠添加量为正相关(r=0.329,P=0.050)。发酵产物中胶红酵母活菌数与底物中豆粕含量呈显著正相关(r=0.510,P=0.001)。接种量、发酵温度、p H、底物含水量对胶红酵母活菌数均有极显著的影响(P<0.01),但其中发酵温度对胶红酵母菌体数影响最大,其次是底物含水量,之后依次是接种量和p H。发酵时间、发酵温度和p H均显著影响发酵产物中类胡萝卜素含量(P<0.05),其中发酵温度对发酵产物中类胡萝卜素含量影响最大,p H次之,发酵时间影响最小。经过发酵工艺的优化,发酵产物中类胡萝卜素产量提高到4 535μg·kg-1,发酵产物中的活菌数为3.79×109 CFU/g;发酵后粗纤维、粗蛋白质、粗灰分、苏氨酸、谷氨酸、脯氨酸含量均显著高于发酵前(P<0.05),而组氨酸、水分、粗脂肪含量显著低于发酵前(P<0.05)。【结论】胶红酵母固态发酵产类胡萝卜素底物的最佳配比为麦麸52.5%、豆粕20.0%、玉米粉3.00%、米糠14.0%、玉米浆10.0%、硫酸铵0.40%、磷酸二氢钾0.05%和硫酸镁0.04%;最佳发酵条件为菌液接种量5.0%、发酵时间72.0 h、发酵温度28.0℃、p H 6.0、底物含水量60.0%。经过优化胶红酵母发酵工艺,类胡萝卜素产量得到显著提高,并且发酵产物营养价值得到明显改善。

牛磺酸对早期断奶仔猪生长性能和肠道健康的影响

本试验旨在研究牛磺酸(Tau)对早期断奶仔猪生长性能、血清指标、肠道黏膜形态结构和相关基因表达的影响及其机制,并对比Tau和谷氨酰胺(Gln)的添加效果。选择(17±2)日龄断奶、平均体重为(5.17±0.04) kg的健康"(长×大)×荣昌"早期断奶仔猪30头,随机分为3个组,每组10个重复,每个重复1头猪。对照组(CON组)饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加0.1%Tau(T组)和1.0%Gln(G组)。试验期17 d,其中预试期3 d。结果表明:1)与对照组相比,饲粮中添加Tau和Gln能显著提高早期断奶仔猪的平均日增重和平均日采食量(P<0.05),降低腹泻率,Gln的效果优于Tau。2) T组早期断奶仔猪的血清白蛋白(ALB)含量显著高于对照组和G组(P<0.05);与对照组相比,T和G组的血清碱性磷酸酶(AKP)活性显著提高(P<0.05),血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性显著降低(P<0.05)。3)与对照组相比,T和G组早期断奶仔猪的血清甘油三酯(TG)含量显著降低(P<0.05)。4) T组早期断奶仔猪的血清超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于对照组和G组(P <0.05); T和G组的血清过氧化氢酶(CAT)活性显著高于对照组(P<0.05),G组效果较好。5)与对照组相比,除色氨酸(Try)、组氨酸(His)、异亮氨酸(Ile)、苯丙氨酸(Phe)、缬氨酸(Val)和谷氨酸(Glu)外,T和G组早期断奶仔猪的血清必需氨基酸(EAA)含量均呈升高趋势,血清非必需氨基酸(NEAA)含量均呈降低趋势;其中,饲粮中添加Tau对血清赖氨酸(Lys)、蛋氨酸(Met)和精氨酸(Arg)含量的提高效果显著优于Gln。6) T和G组早期断奶仔猪的空肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度显著高于对照组(P<0.05),隐窝深度显著低于对照组(P<0.05)。7) T和G组早期断奶仔猪空肠和回肠黏膜的β-连环蛋白(β-catenin) mRNA相对表达量显著低于对照组(P<0.05),G组最低。本试验结果表明,饲粮中添加0.1%Tau或1.0%Gln能提高早期断奶仔猪的生长性能,促进肠道发育,添加1.0%Gln的效果略优于0.1%Tau。

维生素D通过Wnt信号通路对肠道发育调控机制的研究进展

Wnt信号通路广泛存在于脊椎和无脊椎动物体内,对动物机体各组织器官发育,如肝脏、肾脏、肠道等起着至关重要的作用。维生素D是一组脂溶性类固醇衍生物,维生素D不直接作用于靶器官,而是通过与维生素D受体(VDR)结合从而发挥其生物学效应。近年来研究表明,VDR可以通过影响Wnt信号通路的传导进而影响肠道发育,本文就VDR对Wnt信号通路的影响、Wnt信号通路对肠道发育的调控机制等方面作一综述,以期为Wnt信号通路在肠道发育调控研究提供参考。

牛磺酸替代部分谷氨酰胺在早期断奶仔猪饲粮中的应用效果及作用机理研究

本试验旨在研究牛磺酸(Tau)替代部分谷氨酰胺(Gln)对早期断奶仔猪生长性能、血清指标、肠道黏膜形态和肠道损伤修复相关基因表达的影响。试验选用40头早期断奶仔猪,随机分为4组:对照组(1.0%Gln)、Ⅰ组(0.1%Tau+0.4%Gln)、Ⅱ组(0.1%Tau+0.6%Gln)、Ⅲ组(0.1%Tau+0.8%Gln)。饲养试验为期21 d,其中预试期3 d。结果表明:与对照组相比,Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组的平均日增重分别提高了4.96%(P<0.05)、12.84%(P<0.05)和7.54%(P<0.05),平均日采食量分别提高了1.14%(P>0.05)、4.33%(P<0.05)和1.28%(P>0.05),料重比分别降低了4.64%(P<0.05)、8.25%(P<0.05)和6.19%(P <0.05)。早期断奶仔猪饲粮中添加0. 1%Tau替代0.6%、0.4%和0.2%Gln后日均纯利润分别提高了30%(P<0.05)、42%(P<0.05)和26%(P<0.05)。Ⅱ组肝脏指数、胸腺指数、空肠重量指数和回肠重量指数显著高于其他组(P<0.05)。Ⅱ组和Ⅲ组血清白蛋白浓度显著高于对照组和Ⅰ组(P<0.05);与对照组相比,Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组血清谷草转氨酶活性显著降低(P<0.05);Ⅱ组血清碱性磷酸酶活性显著高于其他组(P<0.05);Ⅱ组和Ⅲ组血清甘油三酯浓度显著低于对照组和Ⅰ组(P<0.05);Ⅱ组血清过氧化氢酶活性显著高于其他组(P<0.05),血清超氧阴离子自由基清除能力和总抗氧化能力显著高于对照组(P<0.05);与对照组相比,Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组血清超氧化物歧化酶活性显著升高(P <0.05)。与对照组相比,血清必需氨基酸(EAA)中赖氨酸(Lys)、蛋氨酸(Met)、精氨酸(Arg)、半胱氨酸(Cys)、组氨酸(His)、异亮氨酸(Ile)、苯丙氨酸(Phe)、缬氨酸(Val)和苏氨酸(Thr)浓度均有不同程度的升高,血清非必需氨基酸(NEAA)中丙氨酸(Ala)、天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)和甘氨酸(Gly)浓度也均有不同程度的升高。Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组回肠绒毛高度显著高于对照组(P<0.05)。Ⅱ组空肠β-连环蛋白(β-catenin)基因的相对表达量显著低于对照组(P<0.05)。由此得出,早期断奶仔猪饲粮中复合添加Tau和Gln的效果优于单独添加Gln,其中以0.1%Tau替代0.4%Gln(Ⅱ组)时效果最佳,可获得最大的经济效益。

一种快速定量检测氨基酸脱羧酶活力的比色方法及其应用

本试验旨在探究一种快速定量检测氨基酸脱羧酶活力的比色方法。试验采用脱羧酶标准品进行标准曲线的制备,再用待测样品的吸光度值和标准曲线计算样品氨基酸脱羧酶活力。采用本试验建立的检测氨基酸脱羧酶活力的比色方法,对猪结肠微生物和脑组织样品进行氨基酸脱羧酶活力的测定;通过对未知样品的氨基酸脱羧酶活力进行测定,验证该方法的准确性。结果显示:以酪氨酸脱羧酶标准品建立了线性关系较好的氨基酸脱羧酶活力标准曲线:y=0.4789 x+0.1126,R 2=0.9980。不同氨基酸脱羧酶活力与构建的酪氨酸脱羧酶活力标准曲线相似度高,说明本方法对多种氨基酸脱羧酶活力有广泛的适用性。采用本试验建立的比色方法快速地测定出了猪结肠微生物和脑组织中氨基酸脱羧酶活力;并且,使用该方法测得的未知样品的氨基酸脱羧酶活力落入已构建的标准曲线范围中,说明本方法的准确性较高。由结果可知,本试验建立的比色方法是检测氨基酸脱羧酶活力的一种快速方法,成本低廉,操作简单,对仪器要求不高,方法可靠,适用于多种样品中氨基酸脱羧酶活力的测定,可为研究动物组织、微生物培养液、细胞培养以及血液样本中的氨基酸脱羧酶活力提供有效的测定方法。

日粮添加抗菌肽buforin Ⅱ对病毒性腹泻断奶仔猪小肠黏膜屏障和TLR-2信号途径的影响

将15头体质量为(5.42±0.72)kg的21d病毒性腹泻断奶仔猪随机分为3组,对照组饲喂基础日粮,试验组分别在基础日粮中添加100mg/kg新霉素和1.0mg/kg抗菌肽buforinⅡ,饲养期10d。每个处理5个重复,每个重复1头仔猪。结果显示,与对照组和新霉素组相比,日粮添加抗菌肽buforinⅡ能显著降低病毒性腹泻断奶仔猪腹泻指数,显著降低血清IgA、IgM和IgG的浓度、空肠黏膜sIgA的浓度(P<0.05);显著下调病毒性腹泻断奶仔猪空肠和回肠黏膜TLR-2、PKR和eIF-5A mRNA相对表达丰度(P<0.05);显著提高病毒性腹泻断奶仔猪空肠和回肠绒毛高度、绒毛高度/隐窝深度、GSH-Px、NOS、SOD、GR和T-AOC浓度(P<0.05)以及空肠黏膜occludin蛋白水平(P<0.05)。结果表明,日粮抗菌肽buforinⅡ能减轻病毒对断奶仔猪空肠黏膜屏障功能的损伤作用。