血清对水牛卵母细胞体外成熟、体外受精及早期胚胎发育的影响

从屠宰场收集了本地水牛55头、黑白花奶牛22头的卵巢共获卵泡847枚,平均每个水牛卵巢回收3.67枚可用卵母细胞,约为黑白花奶牛(10.23枚/头)的1/3。试验分别采用添加与不添加血清的培养液体外成熟培养水牛卵母细胞,结果二者的成熟率无明显毒性差异(58.23%对56.67%),但体外受精后早期胚胎发育的8-细胞率有显著差异(35.4%对23.0%),表明体外成熟液中有无血清对水牛卵母细胞体外成熟率没有影响,但血清对卵母细胞的早期胚胎发育有重要影响。进一步比较成熟液中不添加血清但在受精液及胚胎液中添加血清和在各个阶段均有血清参与的早期胚胎发育率(8-细胞率),表明二者差异不显著(33.8%对35.4%)。经无血清成熟培养液培养的成熟卵母细胞可以经孤雌激活后得到早期胚胎(4细胞)。

昆明系小鼠饲养层细胞制备条件的优化

通过分离不同胚龄的小鼠胚胎成纤维细胞(MEF),对MEF进行连续传代培养,并对MEF不同的消化时间进行探讨,研究影响小鼠胚胎成纤维细胞分离与培养的因素。结果表明,分离小鼠胚胎成纤维细胞的最适胚龄是12.5 d^14.5 d;37℃条件下,用2.5 g/L胰蛋白酶作用PMEF,作用时间不应超过15min;离散贴壁的成纤维细胞,作用时间以2 min^3 min为宜;MEF在第2代~第5代增殖旺盛,7代以后细胞出现急剧下降。所以选择第3代MEF是制做饲养层的最佳时机。MEF分离方法简单,来源方便,增殖迅速,是用于胚胎干细胞分离培养的有效培养体系。

羊血涂片五种染色方法的比较

血涂片的显微镜检查是血液细胞学检查的基本方法，临床上应用极为广泛，特别是对于各种血液病的诊断具有重要的价值[1-3]。近年来，随着血细胞分析仪的广泛应用，血涂片的观察也可作为判断仪器检查结果的简易方法。血涂片的制作是一个基本实验操作，制作出染色清晰、对比鲜明的血涂片是人们一直追求的目标。染色的好坏固然与涂片的好坏有关，但染色方法的诜择对染色效果县军关莺要的。