猫疱疹病毒1型RPA-Cas12a-LFD检测方法的建立及初步应用

猫疱疹病毒1型(feline herpesvirus-1,FHV-1)为水痘病毒属的双链DNA包膜病毒,是引起猫上呼吸道感染的主要病原之一。本研究以重组聚合酶扩增(RPA)、Cas12a反式酶切反应和侧流层析试纸条(LFD)显示技术为基础,旨在建立靶向FHV-1 TK基因的RPA-Cas12a-LFD快速可视化检测方法。根据FHV-1 TK基因的保守片段序列设计RPA引物和合成crRNA的引物,并通过反应体系验证、RPA-Cas12a-LFD检测灵敏度和特异性分析,以及临床样本的符合检测,评价FHV-1 RPA-Cas12a-LFD方法的有效性。结果显示,建立的FHV-1 RPA-Cas12a-LFD方法可以特异性地检出FHV-1(与其他猫相关病原无交叉反应),灵敏度极高(最低检测限为2.35×10^(-1) copies·μL^(-1)),检测时间短,结果可视化。该方法对20份表现明显症状的患猫呼吸道样本的FHV-1检出率(35%,7/20)高于现有的TB Green qPCR方法(25%,5/20),对其中5份阳性样本的检测符合率为100%。综上表明,成功建立的FHV-1 RPA-Cas12a-LFD检测方法的特异性好和敏感性极高,不需要特殊的检测设备,可以作为FHV-1现场快速检测的有效工具。

NLRP3炎症小体及其下游炎症因子在犬乳腺肿瘤组织中的表达

本研究旨在明确NLRP3炎症小体及下游炎症因子在犬乳腺肿瘤中的表达及临床意义。采用RT-qPCR方法检测45例犬乳腺肿瘤组织(15例良性肿瘤和30例恶性肿瘤)以及16例肿瘤旁正常乳腺组织中的NLRP3、Caspase-1、IL^(-1)β和IL^(-1)8 mRNA的表达水平,并分析NLRP3与肿瘤临床病理学特征的关系(肿瘤大小、肿瘤类型、组织恶性分级和预后)。结果显示,与肿瘤旁正常乳腺组相比,NLRP3炎症小体及下游炎症因子mRNA在肿瘤组织中均存在不同程度的表达上调,且恶性肿瘤的NLRP3(P=0.006)和Caspase-1(P=0.048)相对表达量均显著高于良性肿瘤。在恶性肿瘤中,NLRP3炎症小体的转录表达在肿瘤类型(P=0.029)和恶性等级(P=0.049)中存在显著差异。本研究提示,NLRP3炎症小体的表达上调可能导致犬乳腺组织发生肿瘤化和肿瘤恶变,是疾病诊断和恶性特征评估的重要指标之一。

68例犬乳腺肿瘤病例的回顾性分析

为了解目前犬乳腺肿瘤(Canine mammary tumor,CMT)的临床诊断和治疗现状,研究回顾分析了68例CMT病例的疾病相关因素、临床病理学特征以及治疗预后的情况.结果显示,老龄的小型犬(10.2±2.9岁)依然是高发群体,其中以贵宾犬最为多见,动物发病年龄与生育史和绝育状况无关.乳腺肿瘤可在多个乳区发病,其中R3-R5乳区的发病率最高(13.76%~21.78%)(p=0.047).对不同乳区采集的109份肿瘤病料按体积进行临床分级(T1-T3),单发肿瘤组(ST)的T1级肿瘤的平均体积大于双瘤组(DT)和多瘤组(MT)(p=0.002);组织病理学鉴定出良性肿瘤为35份,恶性肿瘤为74份.与良性肿瘤相比,恶性肿瘤的平均体积更大,表现恶性形态和侵袭性生长.在恶性肿瘤病例中,接受局部切除和乳腺全切的肿瘤比例为75.68%(56/74)要高于单个切除的比例24.32%(18/74),术后无病存活率(68.00%~72.73%)相对更高.肿瘤的手术切术范围与肿瘤组织学类型(p=0.000)、恶性分级(p=0.049)有关.结果表明,犬乳腺肿瘤的发病显示出年龄、品种、体型和部位偏好;手术切除依然是犬乳腺肿瘤有效的治疗方法,大范围切除适用于高恶性等级的肿瘤治疗,预后更好.

犬冠状病毒、星状病毒感染诊治

1发病情况病犬为11月龄雄性未绝育杜宾犬,已完成四联疫苗免疫。患犬呕吐和腹泻,排水样粪便(3~4次/d),呕吐食物及黄色消化液(2~3次/d)。患犬经阿莫西林、益生菌、蒙脱石散和驱虫药治疗未愈。2临床检查2.1体格检查病犬精神尚可,脱水程度约6%,口腔黏膜粉红。触诊右侧前腹部,病犬稍敏感。患犬体温38.4℃,BCS:5/9,未发现体外寄生虫。