小鼠缺血性脑卒中后microRNA-128的表达及其对p38α MAPK调控作用的研究

目的:探讨p38α蛋白在脑缺血后2 h降低的原因以及p38α蛋白水平表达是否受调于microRNA-128。方法:首先通过qPCR和Western blotting来检测p38αmRNA和蛋白的表达水平,其次通过生物信息学软件预测出p38α的表达可能受调于microRNA-128,最后进行细胞水平验证,使用携带有microRNA-128序列质粒的慢病毒载体、携带有microRNA-128反义序列质粒的慢病毒载体以及相应空质粒的慢病毒载体转染SH-SY5Y细胞,观察p38α蛋白的表达情况。结果:小鼠脑缺血后2 h p38αmRNA水平无降低,但其蛋白水平却明显下降,microRNA-128的表达水平明显升高;转染实验发现,转染microRNA-128序列质粒的慢病毒载体的细胞p38α蛋白水平明显降低,转染microRNA-128反义序列质粒的慢病毒载体的细胞p38α蛋白水平明显升高。结论:脑缺血后p38α蛋白的表达水平下降并不是因为p38αmRNA水平的降低,microRNA-128可以调控p38α蛋白的表达,可能是通过结合p38α的mRNA从而抑制其蛋白的翻译表达。