miR-27a过表达的血管内皮细胞来源外泌体改善股骨头坏死实验研究

目的探究miR-27a过表达的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)来源外泌体exo(miR-27a)能否促进骨再生并改善糖皮质激素(glucocorticoids,GC)诱导的股骨头坏死(osteonecrosis of femoral head,ONFH)(GC-ONFH)。方法构建exo(miR-27a),并通过透射电镜、纳米颗粒跟踪分析、Western blot和实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,qRT-PCR)进行鉴定。采用qRTPCR评估exo(miR-27a)递送miR-27a至成骨细胞MC3T3-E1的效果,ALP染色、茜素红染色及qRT-PCR评估其对MC3T3-E1细胞成骨的影响。行双荧光素酶报告基因检测验证miR-27a靶向Dickkopf WNT信号通路抑制剂2(Dickkopf WNT signaling pathway inhibitor 2,DKK2)是否为潜在机制,并在MC3T3-E1细胞内通过qRT-PCR、Western blot及茜素红染色进一步验证该机制。最后,通过SD大鼠的GC-ONFH模型验证exo(miR-27a)对ONFH的保护作用。结果透射电镜、纳米颗粒跟踪分析、Western blot和qRT-PCR检测示exo(miR-27a)构建成功。exo(miR-27a)可将miR-27a有效递送至MC3T3-E1细胞并提高其成骨能力。双荧光素酶报告基因检测示miR-27a通过直接靶向DDK2促进成骨。动物实验Micro-CT及HE染色结果显示,尾静脉注射exo(miR-27a)改善了SD大鼠GC-ONFH模型的骨坏死情况。结论exo(miR-27a)可以促进骨再生,并在一定程度上改善GCONFH。

不同植骨内固定术对胸腰椎结核患者的疗效及对其免疫功能及预后的影响分析

目的探讨不同植骨内固定术对胸腰椎结核患者的疗效及对其免疫功能及预后的影响。方法选取本院骨科收治的65例胸腰椎结核患者,根据术式不同分为研究组及对照组,其中研究组33例,采用前路病灶清除钛笼肋骨植骨钛板内固定术;对照组32例均采用前路病灶清除髂骨植骨钛板内固定术,比较2组患者的临床疗效及免疫功能预后的差异。结果研究组患者的植骨融合时间低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);与术前比较,两组术后VAS评分均显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05);研究组患者术后1个月外周血T淋巴细胞较对照组明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);术后半年,研究组的Cobb角度小于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论两种内固定术在治疗胸腰椎结核方面疗效较好,而钛笼联合肋骨植骨在促进植骨融合及维持重建生物力学的稳定性方面效果更佳,还能够改善患者的免疫功能,值得推广使用。

天麻素对SNL模型大鼠脊髓背角内HDAC1-5、pERK、p-p38及pJNK的影响

[目的]观察天麻素对SNL模型大鼠脊髓背角内HDAC1-5、pERK、p-p38及pJNK的影响。[方法]选取健康雄性SD大鼠48只,随机数字表法分成正常组、假手术组、SNL组及天麻素组,每组12只。Von-Frey细丝测量大鼠足底痛行为,免疫荧光染色观察大鼠脊髓背角内HDAC1-5的表达位置,Western Blot法定量分析脊髓背角内HDAC1-5、pERK、pJNK及p-p38 MAPK的表达水平。[结果]假手术-生理盐水组大鼠术侧后足痛阈与正常组相比无显著差异(P>0.05),SNL-生理盐水组大鼠术侧后足痛阈显著降低(P <0.05);给予天麻素腹腔注射治疗后大鼠术侧后足痛阈明显增加(P <0.05)。与假手术-生理盐水组相比,SNL-生理盐水组HDAC1-5、pERK、p-p38及pJNK的表达明显增加,差异具有统计学意义(P <0.05);腹腔注射给予天麻素可观察到HDAC1-5、pERK、p-p38及pJNK的表达得到显著降低,具有统计学差异(P <0.05)。[结论]天麻素抑制脊髓背角内组蛋白去乙酰化酶1-5的表达及pERK、p-p38及pJNK信号通路的激活,增加了大鼠术侧后足痛阈,且效果维持到停药后2 w左右,显著缓解SNL诱导的慢性神经病理性痛。