白藜芦醇的免疫调节作用

目的 探讨白藜芦醇对免疫系统的调节作用。方法 通过建立免疫抑制模型鼠来观察不同剂量的白藜芦醇对机体免疫功能的影响。结果 不同剂量的白藜芦醇均能显著提高免疫抑制模型鼠的巨噬细胞吞噬率、血清半数溶血值、机体抗体形成细胞数量、淋巴细胞转化率及抑制小鼠耳片肿胀度即正常小鼠的Ⅳ型超敏反应。结论 白藜芦醇可对免疫功能低下和免疫缺陷小鼠发挥免疫调节作用 ,并可抑制正常小鼠的Ⅳ型超敏反应。

褪黑素与免疫调节细胞的关系

目的 探讨褪黑素与免疫调节细胞之间的关系。方法 采用流式细胞计数测定外周血T淋巴细胞亚群CD4+和CD8+T细胞的百分含量、比值。结果 褪黑素可提高外周血中CD4+和CD8+T细胞的百分含量 ,调整CD4+/CD8+比值。结论 褪黑素可通过调整免疫调节细胞TH/TS 的比例发挥免疫调节作用。

白藜芦醇的抗肿瘤作用免疫学机制的初步探讨

目的:探讨白藜芦醇(Res)抗肿瘤作用的免疫学机制。方法:用MTT比色法测定肿瘤细胞生长抑制率,流式细胞术分析其细胞周期。分别采用MTT比色法、溶血分光光度法、改良的Mayer法及双抗体夹心ELISA法,检测荷瘤小鼠的免疫功能及细胞因子的水平。结果:Res可以时间-剂量依赖的方式抑制肿瘤细胞增殖、促进其凋亡,出现明显的凋亡峰和G0/G1期阻滞现象;抑瘤率最高可达42.76%。Res可增强NK细胞的杀伤力、T细胞增殖、抗体的分泌及CH50活性,并呈剂量依赖性。Res还可显著提高IL-2和TGF-β1的含量;减少IL-8和VEGF的分泌。结论:Res既可直接作用于肿瘤细胞,也可通过提高机体细胞与体液免疫应答的水平,调节细胞因子的分泌,而发挥抗肿瘤作用。

DNA核酸疫苗诱导小鼠免疫应答的作用

目的 研究DNA核酸疫苗诱导机体免疫应答的能力 ,为揭示其诱导机制奠定基础。方法 采用本室构建的单纯疱疹病毒 2型 (HSV 2 )糖蛋白D的真核表达质粒 pcDNA gD2免疫小鼠 ,通过ELISA法动态检测特异性抗体的产生及小鼠外周血Th1型细胞因子IFN γ、IL 2的水平同时进行病毒攻击实验。结果 pcDNA gD2和HSV 2免疫组小鼠从第 2周开始产生特异性抗糖蛋白D抗体 ,第 4～ 5周达到高峰 ;外周血清中IFN γ、IL 2水平明显高于阴性对照组。病毒攻击实验显示 2周内 pcDNA gD2和HSV 2免疫组小鼠无一只死亡 ,而阴性对照组小鼠全部死亡。结论 pcDNA gD2真核表达质粒可以诱导小鼠产生特异性体液免疫和Th1型细胞免疫 。

丙型肝炎病毒多CTL表位DNA疫苗免疫学特性的初步研究

目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)疫苗研制并为抗HCV感染提供实验依据。方法:从HCV J株基因组中,选取小鼠(H-2d)CTL表位基因序列,以pcDNA3.1(+)质粒为载体,构建相应的真核表达质粒,经肌肉免疫后,取受免疫小鼠血清和脾细胞,用ELISA及MTT法检测小鼠血清中IL-2和IFN水平及小鼠脾细胞的增殖活性。结果:实验组小鼠血清中IL-2及IFN水平明显高于对照组[IL-2:(208±8.88)比(106±6.06);IFN:(179.5±2.52)比(90.5±2.52),P<0.05];实验组淋巴细胞增殖指数明显高于对照组(1.56比1.13,P<0.05)。结论:本实验构建的pcDNA3.1(+)/HCV CTL真核表达质粒,经肌肉免疫后可以使受免疫小鼠细胞免疫应答水平提高,淋巴细胞增殖活性增高。

白藜芦醇对免疫受抑小鼠免疫功能的影响

目的探讨白藜芦醇(Res)对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法采用MTT法、溶血分光光度法、改良Mayer法及抗体夹心ELTSA法检测免疫抑制小鼠免疫功能及细胞因子含量。结果应用白藜芦醇后,免疫抑制小鼠的NK细胞杀伤力、T淋巴细胞转化、抗体释放量、CH50活性均增加;IL-2含量显著提高,IL-8分泌减少。结论白藜芦醇能提高免疫抑制小鼠的细胞、体液免疫应答水平,调节细胞因子分泌,从多方面有效地增强免疫功能。

白藜芦醇增强机体免疫调节功能的研究

目的:对白藜芦醇的免疫调节功能进行研究,进而对其免疫调节作用和机制作进一步探讨。方法:采用动物实验观察不同剂量白藜芦醇对机体非特异性及特异性免疫调节功能的影响。结果:高、中剂量的白藜芦醇能提高NK细胞杀伤活性,而低剂量则无影响。各剂量均使抗体形成细胞(B淋巴细胞)数量增加。高、低剂量白藜芦醇不影响T淋巴细胞增殖活性,中剂量白藜芦醇可以明显提高T淋巴细胞转化率。结论:白藜芦醇在一定浓度范围内呈剂量依赖性增强小鼠机体特异性和非特异性免疫功能。

Fas/FasL系统与妊娠免疫耐受

随着免疫学的飞速发展 ,妊娠免疫耐受机制的研究不断深入。在对Fas和FasL相互作用介导的细胞凋亡在免疫特赦部位及外周免疫耐受中所起的重要作用充分认识后 ,Fas FasL系统在妊娠免疫耐受中是否发挥作用日益引起学者的兴趣。研究表明 ,妊娠期 ,FasL在胎盘中高度表达 ,且体外实验证实滋养层细胞可诱导表达Fas的淋巴细胞发生凋亡 ,为妊娠免疫耐受现象的最终阐明提供了另一可能机制。

白藜芦醇抑制胆囊癌细胞生长与诱导细胞凋亡的实验研究

目的探讨白藜芦醇(Res)对胆囊癌细胞(GBC)和正常成纤维细胞(3T3)体外增殖的影响,进而观察Res对GBC和3T3细胞凋亡的影响。方法MTT法测定肿瘤细胞生长抑制率;流式细胞术分析细胞周期,检测细胞凋亡;SABC法检测细胞bcl2、cmyc、p53蛋白表达。结果Res呈浓度依赖性抑制GBC细胞的生长与增殖(P<0.01),抑制率最高可达54%。Res能明显诱导GBC细胞凋亡,凋亡率最高为30.52%;处理组较对照组G1期细胞由34.88%上升至55.47±3.95%,S期细胞减少8.41%～17.54%,呈明显的G0/G1期阻滞现象。GBC细胞的bcl2、cmyc基因蛋白表达降低,而p53基因蛋白表达增强。结论Res能通过诱导GBC细胞凋亡而抑制其生长与增殖,但对3T3细胞无此作用。

两种小鼠肺纤维化造模方法的比较

目的 对比研究肺纤维化造模方法 ,探寻出一种较为简便可靠的方法。方法 将雾化吸入不同剂量博莱霉素处理的小鼠及进行气管给药的小鼠 ,分别于 7、14、2 8d处死后 ,取其肺叶制备病理切片 ,染色后镜检。结果 一定时间的博莱霉素雾化吸入给药及气管给药 ,均可造成肺纤维化模型。前者药物在肺内分布均匀 ,而后者分布不均。结论 气管内直接注入药物的造模方法由于药物入肺分布不均 ,造成各肺叶纤维化程度有明显差异 ;雾化吸入法操作简便 ,吸入药物在肺内分布均匀 ,是一种较为理想实用的肺纤维化造模方法。

IL-2和IL-15协同调节T细胞的增殖和LAK细胞的杀伤活性

目的 探讨IL 2和IL 1 5在免疫调控和应答中的协同作用。方法 IL 2、IL 1 5和IL 2 +IL 1 5组刺激CTLL细胞的增殖 ,3 H TdR掺入法测cpm值 ;IL 2、IL 1 5和IL 2 +IL 1 5组诱导PBMC中NK和LAK细胞的发育 ,4h51 Cr释放实验检测对K5 6 2和LiBr细胞的杀伤活性。结果 IL 2和IL 1 5都能诱导CTLL细胞的增殖和NK、LAK细胞的杀伤活性 ,IL 2和IL 1 5可明显协同上调CTLL的增殖和LAK细胞的杀伤活性。结论 IL 2和IL 1 5在免疫调控和应答中有一定的协同作用 。

丙型肝炎病原学检测的临床应用效果评价

目的 了解我国丙型肝炎病毒感染的病原学诊断现状 ,探讨合理有效的临床应用模式。方法 用酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测抗HCV抗体 ,用荧光定量反转录聚合酶链式反应 (FQRT PCR)技术定量检测HCV RNA ,用速率法检测ALT水平。结果 188份抗HCV IgG阳性标本中 10 3份HCV RNA阳性 (大于 10 3 拷贝·mL-1) ,阳性率 5 4 .7% ;10 7份HCV RNA阳性标本中 ,有 4份抗HCV IgG阴性 (3.7% ) ,二者一致率 6 9.8% ,不一致率 30 .2 % ;HCV RNA载量与ALT水平无明显相关性。结论 用ELISA检测抗HCV IgG筛查丙肝病人会有 3.7%的病毒血症者漏检 ,且有 4 5 .2 %的假阳性 (无传染性 ) ;用抗HCV IgG阳性加ALT升高作为诊断丙型肝炎现症患者价值有待探讨 ;抗HCV IgG的出现与否与HCV RNA载量无关。

小鼠淋巴细胞体外抗弓形虫作用的实验研究

目的 :了解小鼠淋巴细胞体外抗御弓形虫速殖子的效果。方法 :采用大鼠脾细胞培养技术 ,以乙酰螺旋霉素作为阳性对照 ,观察淋巴细胞本身以及加入扁桃酸 (MA)后 ,对虫体侵入淋巴细胞及在淋巴细胞内增殖的影响。结果 :与其他体细胞相比较 ,淋巴细胞在受到弓形虫侵害时 ,仍可抑制和杀灭弓形虫。当存在免疫作用的情况下 ,安全剂量的MA抑制弓形虫侵入的作用不显著 ,但抑制细胞内弓形虫增殖的作用显著。结论 :以细胞介导的免疫作用是宿主抗弓形虫感染的重要因素 ,因此 ,应注重提高机体的细胞免疫 ,同时加用药物 。

抵抗素、血脂及有关生化指标在2型糖尿病患者中的变化

目的探讨抵抗素、血脂及肝功能指标在2型糖尿病患者内环境紊乱中的变化情况。方法70例2型糖尿病患者(2DM组)和15例正常人(对照组)分别采取清晨空腹静脉血,应用酶联免疫吸附试验测定抵抗素,放射免疫分析法测定胰岛素,全自动生化分析仪检测血糖、血脂及肝功能指标。结果①2DM组的空腹血糖平均为(8.85±3.21)mmol/L,空腹胰岛素平均为(11.12±4.54)mU/L,抵抗素平均含量为(23.06±9.34)μg/L,均显著高于对照组(P<0.01)。②2DM组的胆固醇、三酰甘油及尿微量白蛋白分别为(5.51±1.37)mmol/L、(2.48±1.60)mmol/L和(28.49±41.18)mg/24h,均显著高于对照组(P<0.05)。而谷丙转氨酶、谷草转氨酶、高密度脂蛋白胆固醇和脂蛋白a在两组之间无明显差异(P>0.05)。结论糖尿病患者存在内环境的紊乱,其体内含有较高浓度的抵抗素,并存在血脂代谢异常和尿微量白蛋白的增高。

血小板因子4对环磷酰胺诱导化学损伤小鼠骨髓细胞的保护作用

目的 探讨血小板因子 4 (PF4 )对环磷酰胺 (CTX)诱导化学损伤小鼠骨髓的保护作用及机制 .方法 环磷酰胺2 0 0 mg· kg- 1 ,腹腔一次性注射 ,造成药物损伤模型 .给 CTX前给予 PF4预处理 ,给药后动态观察小鼠外周血白细胞数的变化 ,并于第 5和第 8日 ,分别用流式细胞仪 (FCM)测定骨髓有核细胞 DNA的含量及细胞周期变化 .结果 注射 CTX后 4 d,外周血白细胞降至最低点 ,然后逐渐回升 ,但 PF4处理组与单独 CTX处理组比较无差异 (P>0 .0 5 ) .第 5日 PF4处理组的骨髓有核细胞中 ,G0 / G1 期细胞的百分率较 CTX组明显提高 ,细胞的坏死、凋亡率下降 (P<0 .0 1) ,而与 PBS对照组基本相同 (P>0 .0 5 ) .第 8日 PF4处理组的骨髓有核细胞数较单独 CTX处理组增加明显 (P<0 .0 1) .结论 PF4对CTX损伤的小鼠骨髓细胞有保护作用 ,可作为肿瘤患者使用烷化剂化疗时的骨髓防护剂 .

外周血单核细胞CD58和CD58mRNA表达与HBV感染关系的研究

为了探讨PBMCCD58(LFA3)表达与乙型肝炎病毒感染关系,应用逆转录荧光定量聚合酶链反应(RTFQPCR)法和流式细胞术分别检测43例HBV感染者(慢性肝炎轻度组12例,中度组11例,重度组10例,重型乙型肝炎组10例)和11例正常对照的外周血单核细胞(PBMC)CD58mRNA及CD58+细胞百分率的水平,同时检测血清ALT、AST水平。结果显示,乙型肝炎各组患者PBMCCD58mRNA及CD58+细胞百分率水平较正常对照组明显增高,差异均有显著性(P<0.05);CD58水平由低到高依次分别为慢性乙型肝炎轻度组、中度组、重度组及重型乙型肝炎组,各组患者间相比较,差异亦有显著性(P<0.05);乙型肝炎患者PBMCCD58mRNA及CD58+细胞百分率水平与血清ALT、AST呈显著正相关。因此,乙型肝炎患者PBMCCD58mRNA及CD58+细胞百分率水平与疾病严重程度及肝细胞损伤严重程度有关。

流式细胞仪检测乙型肝炎患者外周血单个核细胞CD58^+细胞百分率的研究

目的应用流式细胞术检测乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)CD58+细胞百分率,并探讨其与乙型肝炎的关系。方法采用直接免疫荧光法常规提取PBMC,应用流式细胞仪分别检测43例HBV感染者及11例正常对照的PBMCCD58+细胞百分率,同时检测血清ALT、AST水平。结果乙型肝炎各组患者PBMCCD58+细胞百分率较正常对照组明显增高(P<005);乙型肝炎患者PBMCCD58+细胞百分率与血清ALT、AST呈显著正相关。结论乙型肝炎患者PBMCCD58+细胞百分率与疾病严重程度及肝细胞损伤严重程度有关。

树突状细胞在胆囊癌组织内浸润的研究

目的通过对胆囊癌组织中树突状细胞浸润情况的研究,阐述树突状细胞与肿瘤免疫之间的关系。方法采用免疫组化SP法。结果树突状细胞在胆囊癌组织的浸润程度与年龄、性别和病理组织学类型无关,与病理分化程度呈负相关关系(P<005)。结论树突状细胞在胆囊癌组织的浸润程度与病理分化程度、Nevin分期、肝浸润及淋巴结转移存在密切的关系。树突状细胞的定量检测可作为估计胆囊癌预后的标志。

血清sICAM-1测定在判定乙型肝炎不同临床类型中的意义

目的 :观察血清sICAM - 1水平在HBV感染者不同临床类型中的变化及其意义 .方法 :采用双抗体夹心ABC -ELISA法 ,对 74例不同临床类型HBV感染者及 10例正常对照者血清中可溶性细胞间粘附分子 - 1(sICAM 1)进行了定量测定 .结果 :急性肝炎 13例血清中sICAM - 1含量 (680± 2 4 8)μg·L-1明显高于正常对照组 (2 0 4± 4 6) μg·L-1(P <0 0 1) ;4 6例慢性肝炎患者血清中sICAM - 1含量 (675± 3 11) μg·L-1明显高于正常对照组 (P <0 0 1) ;其中慢性肝炎轻度 19例 ,sICAM - 1含量 (445± 12 0 ) μg·L-1;慢性肝炎中度 18例 ,sICAM - 1含量为 (63 4± 182 ) μg·L-1,明显高于慢性轻度组 (P<0 0 1) ;慢性肝炎重度 9例 ,sICAM 1含量 (93 1± 2 80 ) μg·L-1,明显高于慢性轻度组 (P <0 0 1) .5例无症状携带者sICAM 1含量 (2 12± 72 ) μg·L-1,与正常对照组差别无显著性 (P >0 0 5 ) ;10例自然恢复组含量为 (2 4 3± 86) μg·L-1,与正常对照组差别无显著性 .血清中sICAM 1含量与ALT含量呈明显正相关 ;而E抗原阳性组与E抗原阴性组差异无显著性 .结论 :血清中sICAM - 1水平测定可作为判别乙型肝炎临床类型的指标 ;sICAM 1含量与肝脏损伤程度成正比 ,sICAM