甲醛对性成熟期雄性大鼠生殖毒性的作用研究

目的探讨甲醛对性成熟期雄性大鼠生殖的影响及其作用机制。方法选用性成熟期健康SD雄性大鼠40只,随机分为甲醛染毒高(10 m g/kg.d)、中(1 m g/kg.d)、低(0.1 m g/kg.d)剂量和对照组4组。腹腔注射染毒14 d后观察睾丸重量和形态学改变,精子数量和质量改变,血液中激素含量的改变;利用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测睾丸细胞的凋亡;免疫组化方法检测睾丸F as基因的表达。结果①高剂量染毒组大鼠睾丸组织的质量明显低于对照组(P<0.05),中、高剂量染毒组睾丸曲细精管萎缩,生精上皮细胞层数减少,细胞排列紊乱;②中、高剂量染毒组大鼠精子的数量和精子活动度较对照组明显减少,精子畸形率明显增加(P<0.05);③染毒组与对照组相比,血清卵泡刺激素和黄体生成素含量轻度增高,而睾酮含量轻度下降,但差异没有统计学意义;④中、高剂量染毒组睾丸凋亡细胞较对照组明显增多(P<0.05),F as基因表达明显增加(P<0.05),且F as基因阳性表达与睾丸的凋亡指数呈正相关(r=0.8832,P<0.05)。结论甲醛对性成熟期雄性大鼠生殖系统有较明显的损伤,这种损伤可能与F as介导的睾丸生精细胞凋亡机制有关。

尾悬吊状态对性成熟期雄性大鼠生殖功能的影响

目的:探讨尾悬吊造成的模拟失重状态对性成熟期雄性大鼠生殖功能的影响及其机制,为研究太空环境对人类生殖功能的影响打基础。方法:性成熟期健康SD雄性大鼠40只,随机分为4组,每组10只,分为实验1组(尾悬吊14 d)、实验2组(尾悬吊28 d)和对照1组(自由活动14 d)、对照2组(自由活动28 d),观察睾丸的重量和形态学改变、精子数量和质量改变、血液中激素含量的改变,并利用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测睾丸细胞的凋亡。结果:各悬吊组大鼠睾丸重量与相应对照组相比明显下降(P<0.05),附睾精子数量和活动率明显减少(P<0.05),精子畸形率和凋亡率明显增加(P<0.05),卵泡刺激素和黄体生成素轻度增高,而睾酮含量明显下降(P<0.05)。但上述变化在悬吊14 d组和28 d组之间无明显差异(P>0.05)。另外,悬吊组睾丸组织生精小管萎缩,生精上皮细胞层数逐渐减少,管腔内的精子数明显减少,悬吊28 d组比悬吊14 d组改变更明显。结论:模拟失重对性成熟期雄性大鼠生殖功能有较明显的损害,这种损伤可能与引起睾丸生精细胞凋亡有关。抑制睾丸生精细胞凋亡也许可以防护失重状态下的生殖损害。

支气管肺炎患儿机体免疫功能变化的分析

目的通过对支气管肺炎患儿T细胞亚群、血清免疫球蛋白、血清补体及细胞因子变化的分析,探讨小儿支气管肺炎机体免疫功能状态及免疫学发病机制,为临床了解病情、选择适当的治疗方案提供理论依据。方法支气管肺炎组65例,男39例,女26例,年龄2个月～13岁,平均年龄4.1岁。对照组20例,男12例,女8例,年龄1～12岁,平均年龄4.3岁。应用多色流式细胞术检测T细胞亚群(CD3+、CD3+CD4+Th、CD3+CD8+Ts、CD3+CD4+Th/CD3+CD8+Ts)、应用免疫散射比浊法检测血清免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)、血清补体(C3、C4)、应用ELISA法检测血清细胞因子(IFN-γ、IL-4)。结果支气管肺炎组T细胞亚群改变明显,CD3+、CD3+CD4+Th显著低于对照组,有统计学意义(P<0.01);CD3+CD8+Ts显著高于对照组,有统计学意义(P<0.01);CD3+CD4+Th/CD3+CD8+Ts比值降低,与对照组相比,有统计学意义(P<0.05)。支气管肺炎组血清IgA、IgG水平显著低于对照组,有统计学意义(P<0.01);支气管肺炎组血清补体C3低于对照组,有统计学意义(P<0.05)。支气管肺炎组血清细胞因子IFN-γ浓度及Th1/Th2比值高于对照组,有统计学意义(P<0.05)。结论支气管肺炎患儿存在细胞免疫和体液免疫功能紊乱,对支气管肺炎患儿检测免疫功能有助于判断病情、指导治疗。

甲醛急性染毒对性成熟期雄性大鼠精子质量、血清性激素及睾丸间质细胞结构及功能的影响

目的探讨不同剂量甲醛急性染毒后对雄性大鼠精子质量、血清性激素及睾丸间质细胞结构和功能的影响。方法 48只雄性SD大鼠随机分为甲醛染毒高[10mg/(kg.d)]、中[1mg/(kg.d)]、低[0.1mg/(kg.d)]剂量组和对照组(注射生理盐水)4组,每组12只。腹腔注射染毒7d后,进行精子质量检测,放免法测血清激素,制备睾丸组织标本,光镜下观察睾丸组织形态,并进行统计学分析。结果与对照组相比,各剂量甲醛染毒组的精子数量、活动率显著下降(P<0.05,P<0.001),而精子畸形率显著升高(P<0.001);甲醛染毒剂量与血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)水平呈显著正相关(r=0.709,P<0.05;r=0.622,P<0.05),与血清睾酮(T)水平则呈显著负相关(r=-0.762,P<0.05);光镜下中、高剂量甲醛染毒组大鼠睾丸组织部分间质萎缩,间质细胞水肿,数量减少,并且间质细胞呈退化趋势。结论一定剂量的甲醛急性染毒对雄性大鼠精子质量、血清性激素水平、间质细胞的结构及功能都造成了明显的损伤,这也是甲醛具有生殖毒性的重要原因之一。

维生素E对尾部悬吊大鼠雄性生殖损伤的防护作用

目的研究维生素E(VE)对尾部悬吊大鼠雄性生殖损伤的防护作用。方法选用性成熟期健康SD雄性大鼠30只,随机分为对照组、尾吊组、VE+尾吊组3组。14d后观察各组大鼠的睾丸重量、形态,精子数量和质量以及血清激素含量。结果与对照组相比,尾吊组大鼠睾丸重量、精子数量和质量以及血清睾酮含量均显著下降(P<0.05)。VE可以显著改善这些指标(P<0.05)。另外,尾吊组大鼠睾丸生精小管萎缩,间质水肿。生精上皮层数减少,细胞排列松散,生精小管腔内的精子数明显减少。VE+尾吊组大鼠睾丸形态结构部分恢复正常,生精小管腔内的精子数量增多。结论VE对尾部悬吊造成的大鼠雄性生殖损伤有防护作用。

激光捕获显微切割技术在膀胱移行细胞癌相关基因研究中的应用

背景与目的 :激光捕获显微切割技术 (LCM)是获取均一目的细胞的有效方法。利用LCM技术从膀胱粘膜中分离膀胱移行上皮细胞从肿瘤间质细胞中分离膀胱癌细胞 ,进行RNA提取、纯化、浓缩以备进一步研究。方法 :采用LCM技术分别从正常膀胱粘膜及膀胱癌组织冰冻切片中获取膀胱移行上皮细胞及膀胱癌细胞 ,提取RNA ,并对微量RNA进行纯化、浓缩。然后用RT PCR验证TotalRNA中β actin基因表达水平。结果 :对照实验Ⅰ证实经LCM后RNA完整性较好 ;经对照实验Ⅱ初步确定设定条件下LCMshooting次数与可获得RNA量间对应关系。从膀胱粘膜中捕获膀胱移行上皮细胞 2 5万shootings;从膀胱癌组织中获取癌细胞 2 0万shootings。经RT PCR验证β actin基因表达表达完整。结论 :使用LCM技术能成功地获取较为均一的研究目的细胞 ,RNA完整性较好 ,能用于进一步研究中。

激光捕获显微切割技术应用于子宫内膜癌相关基因的研究

目的:摸索一条可行的技术路线,运用激光捕获显微切割技术(lasercapturemicrodissection,LCM)获取无间质混杂的人正常子宫内膜腺管上皮细胞与子宫内膜癌细胞,用于进行子宫内膜癌相关基因差异表达的研究。方法:采用LCM技术分别从正常子宫内膜组织及子宫内膜癌组织冰冻切片中捕获子宫内膜腺管上皮细胞及子宫内膜癌细胞,提取微量RNA,并对微量RNA进行纯化及浓缩,用RTPCR验证捕获细胞RNA中β-actin基因表达水平。结果:分别从冰冻切片中捕获子宫内膜腺管上皮细胞及子宫内膜癌细胞各50000Shootings。对照实验Ⅰ、Ⅱ证实经LCM后RNA完整性较好。确定了LCMShooting次数与可获得RNA量间对应关系。捕获细胞所提取的RNA中βactin基因表达完整。结论:通过LCM技术可以从冰冻切片中捕获单一类型的目的细胞,此过程不会造成细胞RNA明显降解,可以应用于下游的实验研究。

VEGF-C在宫颈癌的表达及其与淋巴结转移的关系

目的:了解宫颈癌的淋巴结转移机制,观察具有介导淋巴管内皮细胞增殖和淋巴管增生功能的血管内皮生长因子C(VEGF-C)在宫颈癌中的表达及其与淋巴结转移的相关性。方法:利用免疫组化染色观察VEGF-C在良性宫颈瘤及恶性宫颈癌组织中的表达。结果:在良性瘤及恶性宫颈癌组织中皆有VEGF-C的表达,但VEGF-C在宫颈癌中的表达明显高于良性瘤,VEGF-C表达与淋巴结转移密切相关。与肿瘤临床分期、肿瘤病理类型、肿瘤大小、年龄等无关。结论:VEGF-C在宫颈癌的表达上调有利于淋巴结转移的发生,此过程可能和肿瘤的淋巴管生成有关。VEGF-C的检测可作为预测宫颈癌淋巴道转移的指标之一,对VEGF-C及其受体的阻滞研究有望成为抗肿瘤淋巴管转移治疗新的有效手段。

精索静脉曲张不育患者的精液常规、精子动态参数和精浆生化指标分析

目的观察精索静脉曲张(VC)伴不育患者的精液质量和精浆生化水平的变化。方法利用计算机辅助精液分析系统(CASA)及酶免法分别检测52例VC不育患者、85例非精索静脉曲张不育患者和21例正常生育男性的精液常规、精子动态参数以及精浆酸性磷酸酶、精浆锌(Zn)、果糖、α-糖苷酶的含量。结果与对照组相比,VC组患者A级精子率、(A+B)级精子率、精子直线速度(VSL)、直线性(LIN)、侧摆幅度(ALH)、精浆锌含量、α-糖苷酶的含量与对照组相比显著下降(P<0.05)。与非VC不育组相比,VC不育组(A+B)级精子率、精子直线速度(VSL)、侧摆幅度(ALH)、精浆锌含量、α-糖苷酶的含量也明显降低(P<0.05)。并且随着精索静脉曲张程度的增加,VC患者A级精子率、(A+B)级精子率、精子曲线速度VCL、直线速度VSL、直线性LIN、平均路径速度VAP、前向性STR、侧摆幅度ALH、精浆中锌含量、α-糖苷酶的含量有下降趋势。结论 VC能够降低精子活动率、精子动态活动能力以及改变了精浆微环境,从而导致男性生育力下降。

硫酸镁对重型颅脑损伤患者血清IL1β、TNFα浓度的影响

目的研究硫酸镁对sTBI患者血清IL1β和TNFα浓度的影响,进一步探讨镁离子保护创伤神经元的机制。方法将入选病例随机分为治疗组和对照组,每组30例。对照组按常规治疗,治疗组加用硫酸镁。正常组20例,为成年健康献血员。按预设时间抽取肘静脉血,采用原子分光光度法和放射免疫法分别测定血清Mg2+与IL1β、TNFα浓度。应用SPSS13.0软件包分析数据。结果 sTBI后血清IL1β和TNFα浓度24h内即明显升高,3d达到高峰,以后逐渐下降;治疗组患者血清IL1β浓度于伤后2、3、7d和TNFα于伤后2、3d明显低于对照组(P<0.01或P<0.05)。结论 sTBI患者伤后早期即出现血清IL1β和TNFα浓度升高;早期应用硫酸镁治疗能明显抑制sTBI患者急性期炎症反应,保护神经功能。

PPARγ通路激活可增强细胞抗氧化能力和保护长程培养原代神经细胞

目的研究PPARγ通路增强对长程培养原代神经细胞凋亡的保护作用。方法以长程培养22 d的原代神经细胞建立自然衰老模型。根据不同干预方法分为衰老对照组(C组)、GW9662干预组(G组)和吡格列酮(Pioglitazone)干预组(P组)。其中GW9662干预组(G组)根据GW9662干预终浓度分为4个亚组:G(0.1):0.1μmol/Lol/L,G(1):1μmol/L,G(5)5μmol/L,G(10):10μmol/L。吡格列酮干预组(P组):根据吡格列酮干预终浓度分为4个亚组:P(0.1):0.1μmol/L,P(1):1μmol/L,P(5)5μmol/L,P(10):10μmol/L。首先应用MTT法观察各组细胞活力,应用倒置显微镜观察各组神经细胞形态,确定下一步实验的G组和P组的最终干预浓度。其次应用免疫荧光双标染色、流式细胞仪观察各组神经细胞计数、凋亡细胞比率的变化,明确PPARγ通路增强对长程培养原代神经细胞凋亡的保护作用。最后应用免疫化学法观察各组细胞抗氧化能力的变化,探讨PPARγ通路增强保护原代神经细胞的机制。结果随着GW9662干预浓度的增加,细胞活力进行性下降,其中G(1)、G(5)和G(10)组细胞活力均较C组显著降低(P<0.05)。G(1)组神经细胞形态尚完整,部分突触交织成网,最终确定后续实验G组的GW9662干预浓度为1μmol/L。加用吡格列酮干预后细胞活力较C组提高,其中P(1)、P(5)和P(10)组细胞活力较C组显著提高,差异具有统计学意义(P<0.05),但P(1)、P(5)、P(10)组3组之间比较无明显差异(P>0.05),最终确定后续实验P组的吡格列酮干预浓度为1μmol/L。G组细胞总数及神经细胞计数均较C组显著下降(P<0.05)。P组细胞总数及神经细胞计数均高于C组(P<0.05)。各组神经细胞比率均维持在80%左右,差异无统计学意义(P>0.05)。G组凋亡细胞比率明显高于C组(P<0.05),而P组凋亡细胞比率显著低于C组(P<0.05)。G组SOD活性及GSH含量较C组均显著降低(P<0.05),而MDA含量显著增加(P<0.05)。P组SOD活性及GSH含量均较C组显著升高(P<0.05),而MDA含量较C组显著减少(P<0.05)。结论 PPARγ通路是长程培养原代神经细胞的保护性通路,该通路的激活可以增强细胞抗氧化能力减少细胞凋亡保护长程培养原代神经细胞,提示针对PPARγ通路进行的药物干预有可能是临床抗神经系统衰老治疗的有效途径之一。

问题导向型教学模式在心血管药理学中的应用与探索

问题导向型教学模式是一种以学习者为中心的教学和学习模式,有利于挖掘学生的潜力,提高学生终生学习的能力。通过近6年来实践,经渐进式、分层次、整合式课程PBL教学三阶段改革历程,逐渐探索出了一条适合心血管药理学教学的新途径。通过多次问卷调查和分析,该门课程的教学效果明显提高。学生发现问题、自主学习能力增强,查阅参考文献独立解决问题的能力明显提高,投入科学研究的兴趣改善最为明显。

三维DSA及仿真内窥镜技术在血管疾病教学中的应用

三维DSA图像具有显示血管解剖清晰、立体感强的特点。文章结合血管疾病的特点，详细介绍了其在血管疾病教学应用中的优势。

HCV感染后肝硬化组织中整合素α3和αM的表达水平、部位及其意义

目的:通过观测HCV感染后肝硬化组织中整合素α3β1亚单位和αMβ2亚单位表达水平和部位,研究其在肝硬化发生、发展中的分子标志意义.方法:在知情同意的前提下,选择3例用于肝移植的正常供肝组织作为正常对照组,选择12例HCV感染后肝硬化门脉高压症患者,其中Ch ild分级A级8例,B级2例,C级2例,术中取肝组织,分为α3和αM组,分别用免疫组化法检测肝组织中整合素α3,αM表达水平和部位,比较两者表达水平和部位的变化.结果:正常肝组织中无整合素α3,αM表达.HCV感染后肝硬化,整合素αM阳性表达高于α3,差异有显著性(P<0.05).α3阳性表达区域类似基底膜结构,位于肝细胞和窦状内皮细胞(sinusoidal ep i-thelial cells,SEC)膜表面,主要分布于小叶中央静脉周围,αM阳性表达区域位于肝细胞和SEC膜表面和近膜胞质,分布于门管区和小叶中央静脉周围之间.而且新生基底膜两侧的肝细胞和SEC细胞表面或近膜的胞质内都有明显的α3,αM阳性表达.不同Ch ild分级之间α3,αM表达无显著性差异(P>0.05).结论:整合素α3,αM与HCV感染后肝硬化肝窦毛细血管化形成过程有密切关系,αM可作为重要的检测指标.

PBL教学模式在解剖学教学中的探索和应用

探讨以问题为基础的学习(problem-based learning,PBL)教学模式在解剖学教学中的应用。解剖学作为重要的医学基础课程,引入PBL教学时,在课程设置、教师角色、教学过程和成绩考核等方面都带来新的挑战,在探索实践中,总结了一些心得体会与同行讨论。

可卡因对性成熟期雄性大鼠生殖功能的损害

目的探讨可卡因对性成熟期雄性大鼠生殖功能的影响及其作用机制。方法选用性成熟期健康雄性SD大鼠30只,随机分为实验组和对照组,每组15只。实验组大鼠以15mg/kg剂量每天皮下注射可卡因28d。观察动物体质量、睾丸质量改变,检测血液中激素含量的变化,利用原位缺口末端标记(TUNEL)法检测睾丸细胞的凋亡,免疫组化方法检测睾丸Fas基因的表达。结果(1)实验组大鼠体质量、睾丸质量明显低于对照组(P<0.05);(2)实验组与对照组相比,睾酮含量明显降低(P<0.05);(3)实验组睾丸细胞凋亡较对照组明显增多(P<0.05),Fas基因表达明显增加(P<0.05),且Fas基因阳性表达与睾丸细胞的凋亡指数呈正相关(r=0.9012,P<0.05)。结论可卡因可致大鼠生殖器官发育和生殖内分泌功能损害,造成生精细胞凋亡,增殖能力下降,可能与Fas介导的睾丸生精细胞凋亡机制有关。

SPO11基因单核苷酸多态性与陕西回族人群非梗阻性无精症相关性研究

目的探讨SPO11基因单核苷酸多态性在陕西回族非梗阻性无精症人群中的分布及其与无精症发病风险的关联。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,分析40例陕西回族非梗阻性无精症患者和45例陕西回族正常对照男性SPO11基因SNP位点(rs28368082)的基因分型和等位基因频率,以及其与非梗阻性无精症发病的相关性。结果 SPO11基因SNP位点(rs28368082)的CC,CT两种基因型频率在病例和对照组中分布存在显著性差异(P=0.048),携带CT基因型的个体患非梗阻性无精症的风险是CC基因型的7.76倍(95%CI=0.89～66.58)。结论SPO11基因SNP位点(rs28368082)与陕西回族人群非梗阻性无精症发病风险存在关联,可能是陕西回族人群非梗阻性无精症的遗传易感基因之一。

从教育技术资源发展的几个阶段看对人员的要求

结合多年工作经验,对教育技术由电化教育、视听教育到网络教育所经历的几个阶段进行描述及在不同阶段对教育技术人员的要求.指出多媒体远程教育将对传统教育产生革命性变革的同时,也对教育技术人员赋予了新的重任.