黄芩苷对人牙周膜细胞RANKL-OPG表达的影响及其作用机制

目的研究黄芩苷对人牙周膜细胞核因子-κB受体激活物配基和骨保护素(RANKL-OPG)表达的影响及其作用机制。方法首先构建转化生长因子βⅡ型受体(TGF-βⅡR)靶向siRNA真核表达载体,转染正常人外周血T细胞,使T细胞表面的TGF-βⅡR基因沉默,继而将转染与未转染靶向性TGF-βⅡR基因沉默的T细胞和正常人牙周膜成纤维细胞置于加有黄芩苷和内毒素的培养基中,分为6组:①正常牙周膜成纤维细胞+内毒素+转染siRNA1的T细胞+黄芩苷;②正常牙周膜成纤维细胞+内毒素+转染siRNA1的T细胞;③正常牙周膜成纤维细胞+内毒素+正常T细胞+黄芩苷;④正常牙周膜成纤维细胞+内毒素+正常T细胞;⑤正常牙周膜成纤维细胞+黄芩苷;⑥正常牙周膜成纤维细胞。共培养48h,RT-PCR检测牙周膜细胞RANKL和OPG的表达,计算RANKL/OPG比值。结果①酶切鉴定正确的克隆测序结果与设计的目的序列完全一致;②转染siRNA1的T细胞组的TGF-βⅡRmRNA的表达被明显抑制;③RANKL/OPG的比值在各组间的差异有统计学意义(P<0.01)。结论成功构建了TGF-βⅡR靶向siRNA真核表达载体并成功转染T细胞;黄芩苷可以降低牙周膜细胞表面RANKL/OPG比值;TGF-β的信号传导在黄芩苷影响牙周膜成纤维细胞表面的RANKL/OPG表达过程中起着重要作用;黄芩苷并非只通过TGF-β信号传导通路,而是亦通过其他通路对牙周膜成纤维细胞表面的RANKL/OPG进行调控。

白细胞介素-10基因多态性与侵袭性牙周炎相关性的系统评价

目的:系统评价白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)基因rs1800872、rs1800871和rs1800896位点单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)与侵袭性牙周炎(aggressive periodontitis,AgP)相关性。方法:计算机检索Pub Med、Web of Science、Embase、The Cochrane Library、中国生物医学文献数据库、中国期刊全文数据库、中国科技期刊数据库及万方数字化期刊全文数据库,收集关于IL-10基因rs1800872、rs1800871和rs1800896位点SNP与AgP相关性的病例-对照研究,检索时限均为从建库至2015年8月。由2位研究者按照纳入与排除标准独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的方法学质量后,采用Rev Man 5.3软件进行Meta分析。结果:共纳入11个病例-对照研究,其中rs1800872:病例组389例,对照组570例;rs1800871:病例组380例,对照组553例;rs1800896:病例组526例,对照组745例。Meta分析结果显示,IL-10基因rs1800872、rs1800871和rs1800896位点SNP与AgP无统计学相关性。结论:IL-10基因rs1800872、rs1800871和rs1800896位点SNP可能与AgP无相关性。

牙龈卟啉单胞菌肽酰精氨酸脱亚氨酶的克隆与表达

目的:构建牙龈卟啉单胞菌外膜蛋白肽酰精氨酸脱亚氨酶(PAD)克隆表达重组子,转化于大肠杆菌BL21中,并在最适宜条件下诱导表达。方法:以牙龈卟啉单胞菌ATCC33277全基因组DNA为模板,利用PCR技术获得目的基因PAD,将扩增得到的PAD基因定向插入线性克隆载体PMD18-T Vector中,得到克隆重组子PMD18-T-PAD。经PCR和双酶切鉴定正确的克隆重组子PMD18-T-PAD与表达载体PET-28a经Xhol和Ncol双酶切后,在一定连接体系下,连接构建表达质粒PET-28a-PAD。鉴定正确的原核重组表达质粒PET-28a-PAD,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,在不同浓度异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)及时间诱导下表达融合蛋白。以抗His Tag单克隆抗体为一抗,Western免疫印迹鉴定。结果:DNA测序结果表明,PAD与NCBI核酸数据库中收录的PAD序列同源性达100%;37℃,IPTG浓度为0.5mmol/L,250r/min振摇培养6h的诱导条件下,PAD可高效表达。结论:本实验成功构建了PAD的克隆表达重组子,并在大肠杆菌中表达了PAD蛋白,为进一步研究PAD的免疫学性能及相应的抗体制备奠定了基础。

锥形束CT辅助诊断慢性牙周炎牙槽骨缺损的准确性研究

目的 评价锥形束CT在辅助诊断慢性牙周炎牙槽骨缺损中的准确性及其与根尖X线片、曲面体层X线片和临床检查结果的一致性,以期为锥形束CT在辅助诊断慢性牙周炎骨缺损中的应用提供依据.方法 采用单纯随机抽样法纳入2012年12月至2013年12月就诊于西安交通大学医学院附属口腔医院牙周黏膜科并确诊为慢性牙周炎的患者75例,分别进行锥形束CT、根尖X线片及曲面体层X线片检查,用华海MedViewer及EzlmPlant软件测量牙槽骨缺损的高度,同时行全口牙周探诊检查,确定附着丧失水平及釉质牙骨质界至牙槽嵴顶的距离,作为影像学检查结果的临床评判指标.对临床测量值及锥形束CT测量牙槽骨的缺损值行配对t检验,采用单因素方差分析评价4种方法检测近远中牙槽骨缺损的结果,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 共纳入1 494颗牙,8 964个位点,3种影像学方法中仅锥形束CT可以检测出唇（颊）或舌（腭）侧牙槽骨破坏;对近远中向牙槽骨缺损的测量结果显示,锥形束CT[近中：（5.5±0.4）mm,远中：（5.6±0.8）mm]与根尖X线片[近中：（5.1±0.6）mm,远中：（5.1±0.8）mm]、锥形束CT与全口曲面体层X线片[近中：（4.9±0.4）mm,远中：（4.9±0.8）mm]的测量结果相比差异均有统计学意义（P值均＜0.01）,临床探诊[近中：（5.5±0.6）mm,远中：（5.5±0.6）mm]与根尖X线片及全口曲面体层X线片相比差异亦有统计学意义（P值均＜0.01）,但临床探诊与锥形束CT的测量结果相比差异无统计学意义;锥形束CT与临床探诊对不同区域1 494颗牙齿牙槽骨缺损差异的检出情况一致,两种方法检测不同区域牙齿及1 494颗牙不同位点的牙槽骨缺损差异均无统计学意义（P值均＞0.05）,两种方法不存在牙位及位点差异性.结论 锥形束CT与临床探诊在评价不同牙位及不同位点的牙槽骨缺损中一致性最高;锥形束CT在判断慢性牙周炎骨缺损方面与临床检查结果具有较高的一致性,优于根尖X线片和曲面体层X线片.

牙隐裂综合治疗临床疗效观察

目的观察牙隐裂综合治疗的临床疗效。方法对2001年5月至2004年1月来沈阳市口腔医院就诊的107例牙隐裂患者的122颗患牙,采取调、带环黏固后根管治疗加全冠修复的方法修复,随访2年,复查治疗效果。结果122颗患牙中,成功91颗(74.59%),好转28颗(22.95%),失败3颗(2.46%),有效率达97.54%。结论对隐裂牙进行综合治疗,特别是采取调、带环黏固后根管治疗加全冠修复的方法疗效确切,值得推广应用。