生物化学腾讯会议与Workshop相结合教学模式的设计

探索高效的生物化学教学方式对医学生职业技能的提升至关重要。文章以生物化学期中考试总结为题材,设计腾讯会议与Workshop相结合的教学模式,其目的就是通过教师与学生之间、学生与学生之间的协作互助,一方面提高学生自主学习能力和综合学习能力,另一方面促进教师授课水平的提高。该教学模式也适于医学其他基础课的教学,为基础课程教学方法的研究提供了新思路。

医学生专业文献检索及阅读分析能力调研与提升方法探讨

目的了解西安交通大学医学生文献检索及阅读分析能力的现状,分析原因,探索提升医学生专业文献检索及阅读分析能力的方法。方法采用调查问卷的方式,对西安交通大学2013级121名医学生和2014级320名医学生进行专业文献检索及阅读分析能力调研;针对调研发现的问题进行专题讲座及实践训练;对比分析接受培训与否对学生文献检索与阅读能力的影响。结果对专业数据库缺乏了解是造成医学生文献检索能力不足的主要原因;对专业文献结构不清楚是制约学生阅读理解文献的问题之一;参与专题讲座及实践培训后学生的文献检索及阅读能力明显高于未参加专题讲座及实践培训前(P<0.05)。结论医学生文献检索与阅读能力较低;针对性的专题讲座及实践培训能够提高学生的文献检索与阅读能力,值得推广。

让理解与记忆为生物化学学习筑基

生物化学是生物学和医学本科生的专业基础课或平台课。如何实现其良好的教学效果一直是生物化学教师努力的目标。生物化学内容庞杂,从静态的生物分子到动态的代谢途径,都是生物机体中的客观存在,在理解的基础上大量记忆才能更好地掌握。引导、督促学生在思考、理解的基础上,通过端正学习态度、转述所学内容、牢记生物化学核心知识点,尝试用理论知识解释、分析相对简单的生物学现象,是学好生物化学的有效途径。

PDCA循环法在提高输血申请单合格率中的应用价值

目的探讨PDCA循环法在提高输血申请单合格率中的应用价值。方法抽取2020年1月至2021年12月的1000例输血申请单,将2020年1月至12月未实施PDCA循环法的500例输血申请单作为对照组,将2021年1月至12月实施PDCA循环法的500例输血申请单作为试验组。比较两组的输血申请单合格率、不合格项目发生情况、合理用血及输血后不良反应发生情况。结果试验组输血申请单的合格率高于对照组(P<0.05)。试验组的各项输血申请单不合格项目发生率及总发生率低于对照组(P<0.05)。试验组的合理用血率高于对照组,输血后不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。结论PDCA循环法在提高输血申请单合格率和规范临床合理用血方面的作用突出。

丹参素通过激活Wnt/β-catenin通路促进大鼠原代成骨细胞的分化

目的探讨丹参素对原代培养大鼠成骨细胞分化的影响。方法用不同浓度的丹参素(0.1~10μmol·L^(-1))处理原代培养的大鼠成骨细胞,采用MTT实验检测丹参素对成骨细胞增殖的影响;运用Real-time PCR法检测Runx2和Osterix基因mRNA的表达;利用碱性磷酸酶染色检测细胞ALP的活性;利用茜素红染色检测细胞钙化结节的形成;通过Western Blotting检测细胞核内β-catenin的含量。结果丹参素对成骨细胞的增殖无明显作用,浓度为1~10μmol·L^(-1)的丹参素能够上调Runx2和Osterix基因mRNA的表达,增强ALP的活性,促进钙化结节的形成,增强β-catenin在细胞核内的表达。结论丹参素浓度为1~10μmol·L^(-1)能够促进成骨细胞的分化,且Wnt/β-catenin信号通路被发现参与其对成骨细胞分化过程的调控。

转录因子KLF4在宫颈癌中的表达及意义

目的探讨转录因子KLF4在宫颈鳞癌中的表达及意义。方法采用组织微阵列结合免疫组织化学方法研究39例宫颈鳞癌、28例宫颈原位癌、30例正常宫颈组织中KLF4蛋白的表达及其与临床病理因素间的关系。结果KLF4蛋白在正常宫颈组织与宫颈原位癌中的表达均为阳性,在宫颈鳞癌组织中表达显著下调(P<0.05);KLF4蛋白的表达与临床病理因素不相关。结论KLF4可能作为一个抑癌基因与宫颈鳞癌的发生有关。

降植烷通过内质网应激诱导大鼠巨噬细胞自噬

目的探讨佐剂降植烷诱导自噬增强的确切机制。方法构建降植烷刺激的大鼠巨噬细胞系模型;Western blotting检测细胞模型能量代谢分子腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及内质网应激通路真核起始因子2α(eIF2α)和肌醇依赖酶1α(IRE1α)的表达与活化,及转录因子EB(TFEB)的表达及入核情况;采用二硫苏糖醇(DTT)、4-苯基丁酸(4-PBA)调控细胞内质网应激水平并观察对mTOR表达和细胞自噬的影响。结果降植烷刺激的NR8383细胞模型中,eIF2α在刺激0.5 h活化,mTOR表达在刺激后1、3 h较对照组(0 h)显著降低,AMPK及IRE1α无明显变化。降植烷刺激的NR8383细胞模型的mTOR表达下调,在4-PBA干预时表达回升,而增强的LC3-II表达受到抑制;在DTT干预细胞模型时,mTOR表达则进一步下调,同时LC3-II表达则更高。降植烷诱导细胞的TFEB表达升高并活化入核。结论降植烷可能通过诱导内质网应激实现巨噬细胞自噬增强。

大鼠TLR2胞外段(405T-573Q)多克隆抗体的制备及活性鉴定

目的制备大鼠Toll样受体2胞外段(TLR2ex,405T-573Q)的多克隆抗体并鉴定其活性。方法用反转录PCR从大鼠肝细胞中扩增长507个碱基的TLR2部分胞外段,并构建重组表达载体p ET28a-TLR2ex。在大肠杆菌BL21(DE3)中表达TLR2ex-6×His融合蛋白,该蛋白经亲和层析纯化后免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体。ELISA鉴定抗血清的效价,Western blot法检测抗血清的特异性。结果成功构建了原核表达载体p ET28a-TLR2ex,并成功表达纯化了TLR2ex-6×His融合蛋白,将该蛋白免疫BALB/c小鼠后获得抗血清;Western blot法结果显示该血清可以特异性地检出E3大鼠脾组织TLR2蛋白,ELISA测定该多克隆抗体的效价可以达到1∶76 800。结论成功制备了大鼠TLR2胞外段(405T-573Q)的多克隆抗体。

Na^+-K^+-ATP酶α1亚基DR多肽单克隆抗体的制备和应用

目的制备钠钾ATP酶(Na^+-K^+-ATPase)α1亚基DR区段(897DVEDSYGQQWTYEQR911)的单克隆抗体(mAb)并鉴定其活性。方法以合成的DR-钥孔戚血蓝素(KLH)为免疫原,免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术建立能稳定分泌抗DR的杂交瘤细胞株,制备Na^+-K^+-ATPaseα1亚基DR mAb。ELISA测定杂交瘤细胞上清中mAb效价,斑点免疫杂交、Western blot法及免疫荧光细胞化学染色法检测单克隆的特异性,采用Senso LyteFDP蛋白磷酸酶定量试剂盒检测Na^+-K^+-ATPase活性,高糖细胞损伤实验检测DR mAb对高糖引起细胞损伤的保护作用。结果成功制备3株稳定分泌抗体的阳性细胞株。选择强阳性DRm217细胞株,制备腹水进一步验证。免疫荧光细胞化学染色、免疫斑点杂交及Western blot法结果显示,DRm217 mAb能够特异性结合在细胞膜表面,识别Na^+-K^+-ATPase的DR多肽。DRm217能够提高Na^+-K^+-ATPase活性,对高糖引起的细胞损伤具有一定的保护作用。结论成功制备了针对Na^+-K^+-ATPase DR多肽的mAb。

颌下腺注射分泌表达Exendin-4的重组腺相关病毒治疗糖尿病大鼠

目的:探讨颌下腺(submandibular gland,SG)重组双链腺相关病毒(double-stranded adeno-associated virus,ds AAV)表达Exendin-4治疗2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠模型的机制。方法:对T2DM大鼠SG注射重组Exendin-4/ds AAV,于第2,4及8周采用实时荧光定量检测胰岛素及α-淀粉酶表达,第8周行SG组织内胰岛素含量分析,胰腺切除后检测血糖及胰岛素水平,采用免疫组织化学方法检测Exendin-4和胰岛素的表达。结果:重组ds AAV治疗组可观察到SG腺体明显增大,胰岛素基因表达增加,α-淀粉酶变化不显著,免疫组织化学检测Exendin-4及胰岛素阳性;重组ds AAV治疗组胰腺切除后血糖较对照组低,胰岛素分泌增加(P<0.05)。结论:重组ds AAV/Exendin-4不仅可以在SG细胞持续表达Exendin-4,而且可能诱导胰岛素表达从而降低血糖水平,同时不影响SG功能。

NDRG2在中枢神经系统疾病中的作用

N-myc下游调控基因2(N-myc down-stream regulated gene 2, NDRG2)属于NDRG家族成员,是一种与细胞增殖和应激相关的肿瘤抑制基因。NDRG2分布广泛且在全身多种组织器官中表达,有自己特有的转录方式和化学修饰。NDRG2在神经系统中含量丰富,在脑和脊髓中均有表达,能调控星形胶质细胞的增殖,并且参与神经元的发育和神经递质转运。NDRG2的表达水平和化学修饰与神经退行性疾病、缺血性脑卒中、神经系统肿瘤和精神疾病的发生发展有密切关系。但是目前NDRG2发挥生物学功能的分子机制尚未完全明了,有待进一步探索。