胃癌手术治疗前后血清蛋白质谱变异性研究

目的:观察胃癌手术前后血清蛋白质谱的变化,从而筛选能够快速诊断胃癌的特异性蛋白标志物.方法:选用IMAC-Cu蛋白质芯片和表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF- MS)蛋白质芯片技术,对46例胃癌患者和40名正常人的血清蛋白质谱进行分析.结果:通过对胃癌术前血清与正常人血清蛋白质谱分析发现共有14个蛋白质表达量有明显差异.并获得以热休克蛋白27、葡萄糖调节蛋白、抑制素、蛋白质二硫化物异构酶A3这4个蛋白质所组成的模板,可将胃癌与正常人正确分组,利用该模板建立胃癌诊断的分类树模型,此分类树具有两层三个叶结点,诊断胃癌的灵敏度可达95.7%,特异性可达92.5%,术后血清蛋白质谱中,原表达上调的蛋白质明显下调.结论:血清中可以筛选到快速诊断胃癌的特异性蛋白标志物,并可用以预后的判断.SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术为建立蛋白质模板用以诊断胃癌提供了可靠的技术平台.

胃癌组织中多药耐药相关蛋白mRNA的表达及MDR基因产物的检测与其临床病理关系的研究

目的通过对胃癌组织中MRP1mRNA,MRP2mRNA的表达水平及MDR基因产物的检测,进一步了解肿瘤多药耐药机制与胃癌发生发展、生物学行为和预后的关系。方法胃癌组织中MRP1mRNA,MRP2mRNA的表达采用原位杂交染色法。MDR基因产物的检测应用SP免疫组织化学法。结果67例胃癌组织中MRP1mRNA和MRP2mRNA表达阳性率分别为68.7%和71.6%,高分化腺癌和区域淋巴结未转移癌中MRP1mRNA和MRP2mRNA表达阳性率明显高于未分化腺癌和伴淋巴结转移癌(P<0.05,P<0.01),而且不同组织类型中MDR基因产物P170(P-gp),GS T-π及TOPO-Ⅱ的表达不同,有淋巴结转移的胃癌患者P-gp的表达较高,而GS T-π及TOPO-Ⅱ的表达与有无淋巴结转移无关。结论MRP1mRNA和MRP2mR-NA的表达水平与MDR基因产物的分配有密切关系,检测胃癌组织中多药耐药相关蛋白mRNA表达的同时检测MDR基因产物对了解胃癌的发生发展、生物学行为和预后,以及指导化疗均具有重要的临床意义。

细胞因子诱导的杀伤细胞对胆囊癌细胞株GBC-SD杀伤活性的影响

目的研究脐血单个核细胞体外多向诱导分化为LAK,CD3AK,CIK细胞及体外对胆囊癌细胞株GBC-SD杀瘤活性的变化。方法采用IL-2刺激诱生LAK细胞;用CD3单抗和IL-2刺激诱生扩增CD3AK细胞;加入IFN-γ,24h后加入IL-1,CD3单抗,IL-2刺激诱生CIK细胞,观察它们的扩增情况,并分析其相互关系;取培养的CIK细胞用流式细胞仪分析表型;用MTT法以胆囊癌细胞株GBC-SD为靶细胞,分组测定LAK,CD3AK,CIK细胞的杀伤活性。结果CD3AK和CIK细胞的扩增能力远大于LAK细胞(P<0.05)。CIK细胞和CD3AK相比,在前期无明显差异,至第20天左右时CIK细胞的扩增倍数显著高于CD3AK(P<0.05)。流式细胞仪分析结果显示CIK细胞培养后,其主要效应细胞CD3+CD56+细胞较培养前显著增加(P<0.05),CD8+细胞也较培养前显著增加(P<0.05)。CD3AK和CIK细胞对胆囊癌细胞株GBC-SD的杀伤活性均显著高于LAK细胞(P<0.05),而CIK细胞杀伤活性又强于CD3AK细胞(P<0.05)。结论CIK细胞具有更高的扩增能力和更强的杀伤活性,是肿瘤过继免疫治疗中更为有效的杀伤效应细胞。

胆囊黏膜和胆总管胆汁菌谱差异性与胆源性胰腺炎临床预后的关系

目的探讨胆囊黏膜与胆总管胆汁的菌谱差异性与胆源性胰腺炎临床预后的关系。方法对48例胆源性胰腺炎患者的胆囊黏膜和胆总管胆汁进行同步细菌培养和药物敏感试验。结果48例患者中胆总管胆汁需氧菌培养阳性31例(64.6%),胆囊黏膜需氧菌培养阳性13例(27.1%),两者均为阳性12例(25.0%);胆囊黏膜与胆总管胆汁所培养的菌株存在明显差异,某些菌种仅见于胆总管胆汁,而胆囊黏膜主要以L型细菌为主。结论胆源性胰腺炎感染细菌主要以大肠杆菌为主,耐药菌株的出现可能与细菌向胆囊黏膜迁移并发生变异,以L型细菌的形式潜伏于胆囊有关。在使用抗生素的同时应考虑到L型细菌的存在,这对胆源性胰腺炎的预后具有重要意义。

原发性胆囊癌的治疗进展

1777年Stoll首先报道了尸检发现3例胆囊癌，历经二百余年的历史，尽管目前对原发性胆囊癌的早期诊断率偏低，根治性手术切除率不高，中晚期外科治疗效果较差，但较之20世纪六七十年代的水平已有提高，对胆囊癌的认识以及基础研究取得了明显进展。

努力提高胆囊癌的早期诊断率

胆囊癌是胆道恶性肿瘤中最常见的一种类型,近30年来,虽然外科手术技术不断进步和发展,而术后总体5年生存率却没有明显的改善.临床上所面对的病例大约80%为中晚期患者的格局改变较少,努力提高早期诊断率是改善预后的关键.

脐血源性CIK细胞的体外增殖及其对人胆囊癌细胞株GBC-SD杀伤活性的实验研究

目的探讨脐血CIK细胞的体外增殖活性及其对人胆囊癌细胞株GBC-SD的杀伤作用。方法通过在脐血单个核细胞中加入IFN-γ、IL-2和CD3单克隆抗体进行细胞培养,获得多种细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine inducde killer cells)即脐血CIK细胞。用流式细胞仪对细胞作动态表型分析,用MTT法测定其抗肿瘤活性,并与CD3AK作对比分析。结果脐血CIK细胞在培养2周左右获得大量增殖,CD3^-、CD56^+双阳性细胞大量增殖达1000倍以上;CIK细胞及其培养上清抗人胆囊癌细胞株GBC-SD活性明显优于CD3AK细胞,其抑瘤率为85%与62.8%(P<0.05),早期培养过程中加入G-CSF可以显著提高CIK细胞的增殖活性。结论脐血CIK细胞是一种新型、高效的免疫杀伤活性细胞,其对人胆囊癌细胞株GBC-SD具有明显的细胞毒作用,研究脐血CIK细胞对胆囊癌的过继性免疫治疗具有重要的临床意义。

多西他赛联合表阿霉素与多西他赛联合顺铂一线治疗晚期乳腺癌的临床研究

目的评价多西他赛联合表阿霉素（TE方案）与多西他赛联合顺铂（TP方案）一线治疗局部晚期或转移性乳腺癌患者的疗效和安全性。方法88例患者按2：1随机进入TE组和，TP组。TE组患者药物剂量为多西他赛75mg／m^2，表阿霉素60mg／m^2；TP组患者药物剂量为多西他赛75mg／m^2，顺铂75mg／m^2。21d为1个周期，2个周期末评价近期疗效及安全性。结果TE组可评价近期疗效者55例，其中CR3例，PR26例，SD22例，PD4例。TP组可评价近期疗效者27例，其中CR1例，PR16例，SD9例，PD1例。TE组和，TP组近期有效率分别为48．3％和60．7％（P=0．2788），临床受益率分别为85．0％和92．9％（P=0．4899），中位肿瘤进展时间（TTP）分别为10个月和8个月（P=0．7119）。Ⅲ、Ⅳ度不良反应主要为中性粒细胞减少，TE组和TP组发生率分别为66．7％和53．6％（P=0．2373）；其次为脱发，TE和TP组分别为30．0％和10．7％（P=0．0508）。结论TE方案与TP方案一线治疗局部晚期或转移性乳腺癌的疗效和安全性相当。

胆囊癌确定治疗的思维程序

1976年，Nevin等首先提出了原发性胆囊癌的临床病理分期和分级方案，其依据是胆囊癌组织浸润生长和扩散的范围以及细胞的分化程度。由于其简便实用，很快为广大外科学者认同并广泛采用。具体分为5期3级，分期和分级与预后单独相关，分期和分级的相加值与预后有明显的相关性，数值越高，预后越差。

胆囊癌胆总管内种植转移致梗阻性黄疸三例

海南省人民医院1992至2003年共收治3例原发性胆囊癌胆管内种植转移引起梗阻性黄疸的病例，报告如下。 临床资料 患者均为女性，年龄分别为53、75、66岁，首发症状均为“无痛性逐渐加重黄疸”，病史10～15d。前2例CT增强扫描报告“胆总管下端肿瘤（恶性）”；入院诊断：胆管下端癌。术中见肝外胆管扩张，2例胆总管下端肿瘤直径分别为1．2cm和1．5cm，切除胆囊标本观察均未见明显新生物，只有1例胆囊颈部有局限性硬节。