Caspase-3在X线诱导的鼻咽癌细胞凋亡中的调控作用

目的探讨X线诱导后鼻咽癌CNE-2细胞凋亡存在形式以及Caspase-3酶活性、mRNA、蛋白的表达及相互之间的关系,拟阐明Caspase-3在X线诱导的鼻咽癌细胞凋亡中的调控及意义。方法用不同剂量X线照射鼻咽癌CNE-2细胞,于不同时间检测细胞形态学及早期细胞凋亡率变化,分别用比色法、Western blot、RT-PCR检测Caspase-3酶活性、蛋白含量、mRNA,同时设立酶活性抑制剂AC-DEVD-CHO对照组,观察Caspase-3酶活性被阻抑后细胞凋亡及Caspase-3表达的变化。结果(1)X线照射后鼻咽癌CNE-2细胞呈典型的凋亡特征,且早期凋亡率与射线剂量、诱导时间成正比;(2)CNE-2凋亡细胞中Caspase-3酶活性明显增高,用AC-DEVD-CHO抑制Caspase-3活性后细胞的凋亡率减少,且凋亡形态学特征不明显。(3)凋亡细胞中Caspase-3 mRNA表达量未见明显升高,而蛋白在凋亡形成后则完全裂解为17kD的活性Caspase-3,在正常细胞为32kD的pro-Caspase-3。结论X线诱导后CNE-2细胞呈典型的凋亡改变。凋亡细胞中有明显的Caspase-3激活,其Caspase-3的活性增高并非源于其转录的提高,而可能是翻译后酶前体的活化。抑制鼻咽癌Caspase-3酶活性,凋亡的发生可被抑制或是延迟。

放射治疗:肝癌治疗的有力武器

原发性肝癌在我国是常见的恶性肿瘤，约有70％的肝癌患者一经确认即失去了手术切除的机会。以往全肝的放射耐受剂量为30Gy，而此剂量不足控制肝脏肿瘤，所以，肝脏被认为是反射治疗的“禁区”，在过去，原发性肝癌的放射治疗一度被冷落。

放射抗拒性人鼻咽癌细胞系CNE-2R的建立

研究表明癌细胞经射线反复照射后能产生放射抗拒性，但鼻咽癌细胞是否可通过射线反复照射方法在分子水平获得稳定的具有放射抗拒性的新细胞系？研究拟以不同剂量反复照射人鼻咽低分化鳞癌细胞系CNE-2以期建立稳定的放射抗拒鼻咽癌细胞系CNE-2R，为研究鼻咽癌放射抗拒机理提供有力的研究工具。