美国私立医学院基础医学教育概况及我国基础医学教育改革思考

介绍了美国萨巴大学医学院的基础医学教育概况,包括课程设置、教学活动、考试制度、教学评语制度等.借鉴该校的突出特点,对我国基础医学教育及教学改革提出一些设想和建议.

胚胎学教学改革与实践

陕西医学高等专科学校组胚教研室从2001年开始,建立了实验内容丰富的胚胎学实验室;采用多媒体教学形式,对部分教材内容进行了调整、重组和删减;引入"以问题为中心"的胚胎学病案讨论,取得了良好的教学效果.

Aβ诱导PC-12细胞凋亡建立阿尔茨海默病细胞模型

目的 用β 淀粉样蛋白 (Aβ2 5- 35)诱导PC 1 2细胞凋亡以建立阿尔茨海默病细胞模型。方法 体外培养大鼠嗜铬细胞瘤PC 1 2细胞 ,以不同浓度Aβ2 5 - 35诱导并于不同时间收获细胞 ,应用MTT法观察细胞活力 ,Fura 2 /AM荧光分析法检测细胞内游离Ca2 +浓度 ,Hoechst332 5 8及碘化丙啶复染分析细胞凋亡。结果 Aβ2 5- 35作用于PC 1 2细胞后 ,细胞活力逐渐下降 ,并呈时间和剂量依赖性 ;同时细胞内Ca2 +浓度显著上升 ;不同浓度Aβ2 5 - 35作用后 ,PC 1 2细胞于不同时间出现凋亡的典型形态学特征 ,该时间比Ca2 +浓度上升约晚 6～ 1 2h。结论 Aβ2 5- 35诱导后PC 1 2细胞活力下降、细胞内Ca2 +浓度上升及细胞凋亡 。

雄激素受体在大鼠睾丸发育过程中的表达及雄激素对其表达的调节作用

目的 研究发育不同阶段及二甲磺酸乙烷 (EDS)干预的雄性SD大鼠睾丸内雄激素受体 (Androgenreceptor,AR)的分布、发育模式及雄激素调控。 方法 采用免疫组织化学ABC法 ,并应用图像分析测定AR的视物平均光密度 ,以其表示核内AR相对含量。结果 特异性AR免疫染色见于睾丸间质细胞、肌样细胞、支持细胞、精原细胞、血管壁平滑肌细胞及内皮细胞。间质细胞中AR相对含量随大鼠年龄而变化 :2 1d龄居中 ,35d龄最高 ,90～ 1 2 0d龄最低 ,各组间均有显著性差异 (P <0 .0 5或P <0 .0 1 )。肌样细胞在 3个年龄组大鼠均有很强的AR表达。应用EDS消除成年大鼠内源性睾酮后 ,睾丸内所有AR阳性细胞的免疫染色均显著减弱 ,外源性睾酮替代治疗后免疫染色程度可恢复至对照组水平。结论 雄激素可促进青春期大鼠间质细胞的功能与分化 ;肌样细胞在精子发生过程中有重要作用 ;睾丸内AR的表达受内源性睾酮的调控。

性成熟期大鼠实验性精索静脉曲张对附睾显微和超微结构的影响

目的 探讨性成熟期大鼠实验性精索静脉曲张 (EVC)附睾显微和超微结构的改变及其在不育中的作用。 方法 部分结扎左肾静脉建立大鼠EVC模型 ,常规制作附睾各段光镜及电镜标本。 结果 EVC大鼠附睾各段均出现程度不同且有区段特异性的损害。光镜下主要表现有间质血管充血扩张 ,淋巴细胞浸润、积聚 ,间质内出现精子肉芽肿。附睾管萎缩 ,上皮细胞变性 ,甚至出现空泡化 ,上皮内晕、亮细胞数明显增多 ;管腔内出现大量未成熟生精细胞、畸形精子等。电镜下主要表现为主细胞内溶酶体增多、变大 ,残余小体增加 ,细胞器 (内质网、线粒体、高尔基复合体等 )受损 ,部分主细胞内出现大空泡。晕细胞、亮细胞内溶酶体也增大、增多 ,亮细胞常膨大 ,游离面突入管腔。上皮细胞游离面微绒毛稀少 ,可见局灶性断裂和破坏。上皮基膜增厚。 结论 性成熟期大鼠EVC可致附睾管上皮显微及超微结构明显改变 。

青春期大鼠实验性精索静脉曲张模型的建立及其对睾丸的影响

目的 研究青春期精索静脉曲张对睾丸的损害 ,探讨精索静脉曲张不育的机理。方法 通过部分结扎左肾静脉建立青春期大鼠实验性精索静脉曲张 (ELV)模型 ,分别于术后 4周和 8周研究双侧睾丸的组织学改变并进行统计学分析。结果 成功建立了ELV模型。该模型大鼠的睾丸病理损害以生精上皮退化 ,精子发生阻滞 ,生精细胞脱落 ,曲精小管萎缩 ,间质水肿最为多见。损害为双侧性 ,且有累进性特点。统计学分析显示 ,ELV大鼠左右侧睾丸平均重量和曲精小管直径均较对照组显著减小 ,睾丸间质面积较对照组显著扩大。结论 ELV大鼠双侧睾丸有严重的累进性病理改变 ,这可能是精索静脉曲张不育的主要原因之一。

产前束缚应激刺激对子代大鼠脑海马中Bax、Bcl-2、Fas和FasL表达的影响

目的确定产前束缚应激刺激对子代大鼠脑海马中Bax、Bcl-2、Fas和FasL表达的影响.方法在母鼠怀孕的13～19 d,每天进行3次束缚应激,每次45 min.于雌、雄仔鼠1月龄时对脑组织切片应用免疫组化方法检测海马中Bax、Bcl-2、Fas和FasL的表达.结果应激组Bax的表达强于对照组(P＜0.05),Bcl-2的表达弱于对照组(P＜0.05),Fas和FasL的表达两组间没有差异(P＞0.05).结论产前束缚应激刺激可使子代大鼠脑海马神经元中Bax表达上调,Bcl-2表达下调,对Fas和FasL的表达没有影响.

尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒11型L1基因的克隆及序列分析

目的克隆和分析HPV11的晚期表达基因序列L1及其编码的氨基酸序列,为HPV感染的检测和基因工程疫苗研制提供基础。方法采用PCR技术扩增了1例尖锐湿疣患者疣组织中HPV 11 L1基因,并对其进行了克隆及全序列分析。结果本例尖锐湿疣临床标本HPV 11 L1基因与GenBank收录的原型(收录号:M14119)比较有8个碱基变异。结论 中国地区尖锐湿疣HPV 11 L1基因存在着变异。

产前应激对子代大鼠学习记忆的影响

目的 确定母鼠妊娠后期慢性束缚应激对其子代学习记忆行为的影响。方法 于母鼠怀孕 13～ 2 0d ,每天进行3次束缚应激 ,每次 4 5min。分别于雌、雄仔鼠 1月龄和 3月龄时进行Morris水迷宫行为学测试 ,分析产前经历束缚应激对子代大鼠空间学习记忆能力的影响。结果 1月龄和 3月龄产前应激子代寻找平台的潜伏期较对照组均明显延长 (P <0 .0 5 ) ,1月龄子代在直线式和随机式的搜索策略上亦存在差异 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论 产前应激可损伤子代的空间学习记忆功能 。

人精子质膜孕激素受体研究

目的 :观察人精子表面孕激素受体 (PR)的定位及阳性表达率。 方法 :精子体外获能后 ,应用异硫氰酸荧光素标记的牛血清白蛋白 孕酮复合物 (P BSA FITC)染色 ,荧光显微镜观察及流式细胞术 (FCM )定量分析法 ,分别观察与孕酮 (P)结合精子形态及标记精子所占比例。 结果 :P BSA FITC染色精子的形态主要表现为 2种类型 :整个顶体区域或仅赤道区呈绿色荧光 ,顶体后区及尾部不着色。与P结合精子的百分率为 (30 2± 2 4 ) %。 结论 :人精子顶体表面有PR表达 。

一氧化氮对培养的大鼠垂体黄体生成素和卵巢雌二醇释放的影响

目的 探讨一氧化氮对垂体前叶黄体生成素 (LH)及卵巢雌二醇 (E2 )释放的调节作用。方法 在大鼠垂体组织培养液及卵巢组织培养液中分别加入不同浓度的一氧化氮生成抑制剂N 硝基 L 精氨酸 (NNLA)或N 硝基 L精氨酸甲酯 (NAME)和一氧化氮供体硝普钠 (SNP) ,孵育 6 0min ,收集培养液 ,用放射免疫法测定其中LH、E2 含量。结果 NNLA增加垂体组织培养液中的LH含量 ,NAME可增加卵巢组织培养液中的E2 的含量 ,而SNP则使LH及E2 含量减少 ,这些作用具有剂量依赖性。当NNLA或NAME的浓度为 5× 10 -3 mol·L-1时 ,LH及E2 含量分别增加至基础水平的 5 .5倍及 2 .0倍 ,而当SNP浓度为 5× 10 -3 mol·L-1时 ,LH及E2 含量则分别减至基础水平的 5 0 %及 36 %。结论 一氧化氮抑制垂体前叶LH及卵巢E2 的释放 ,可能在垂体及卵巢的功能调节中起重要作用。

青春期大鼠实验性精索静脉曲张对附睾雄激素受体的影响

目的 研究实验性左侧精索静脉曲张(ELV)对附睾雄激素受体的影响。方法 建立青春期大鼠 ELV模型,通过免疫组化及蛋白印迹方法,研究ELV 4周组、8周组与正常对照组附睾雄激素受体表达之间的差异。结果 雄激素受体分布于附睾管各段上皮的细胞核内,ELV 4 周组附睾内雄激素受体的表达比 4 周正常对照组明显增强(P<0.01),而ELV 8周组附睾内雄激素受体表达比ELV 4周组及8周正常对照组均减弱(P<0.01),同组左右侧附睾间未见雄激素受体表达有明显差异(P>0.05)。结论 青春期大鼠ELV可导致雄激素受体表达异常,这可能是造成不育或生育力低下的原因之一。

围排卵期单次小剂量米非司酮对人类植入期子宫内膜的影响

目的:探讨小剂量米非司酮用于紧急避孕的理论基础。方法:11名具正常生育能力的健康妇女随机分为两组:LH—2组(n=5)和LH+2组(n=6),于对照周期和实验周期分别在LH—2或LH+2一次性口服安慰剂和米非司酮10mg,在两个周期的LH+7各取一次子宫内膜,利用形态学、免疫组化、凝集素组化等手段,研究用药前后子宫内膜发育、孕酮受体(PR)着色及双花扁豆凝集素(DBA)结合的改变。结果:服用米非司酮未扰乱正常的月经节律,但明显抑制了子宫内膜的发育。腺上皮PR的着色于服药后显著加强,而DBA的结合则明显减弱。结论:单次小剂量来非司酮可影响子宫内膜的发育及分泌活性,这可能正是其有紧急避孕效果的基础。

C型尼曼-匹克病小鼠脑内胶质细胞的变化

目的 研究C型尼曼 匹克病 (Niemann PickdiseasetypeC ,NPC)脑内胶质细胞的变化及其与神经退行性变的关系。方法 应用组织蛋白酶D(Cat D)和胶质原纤维酸性蛋白 (GFAP)抗体 ,对生后不同年龄的NPC小鼠和正常小鼠的脑组织切片进行免疫组织化学PAP法染色 ,观察小胶质细胞和星形胶质细胞在不同脑区的变化。结果 NPC小鼠脑内Cat D深染的小胶质细胞和GFAP免疫反应性星形胶质细胞的数量随着年龄增加 ,出现细胞肿胀 ,尤其在大脑皮质、丘脑、脑干和黑质等最为显著。两种胶质细胞在分布区域上重叠 ,且与神经元严重损伤、丢失的脑区相吻合。

酪氨酸羟化酶在C型尼曼-匹克病小鼠小脑中的异常表达

目的 探讨C型尼曼 匹克病 (NPC)小脑中酪氨酸羟化酶 (TH)异常表达的时间、部位及其与临床表现的关系。 方法 应用TH抗体 ,对不同周龄NPC小鼠和正常小鼠的脑组织切片进行免疫组织化学染色 ,部分相邻切片以抗维生素D依赖性钙结合蛋白抗体染色。 结果 1～ 3周NPC小鼠小脑的浦肯野细胞 (PC)未见明显减少 ,TH染色阴性。 5周时PC开始减少 ,8～ 11周期间PC显著丢失 ,但小脑蚓小结和蚓垂有较多的PC存活。 8周后 ,部分存活的PC及其树突树出现TH免疫反应。其轴突局部球形膨大 ,树突不规则 ,弯曲、断裂、局部膨大 ,树突树萎缩。 结论 NPC1基因突变引起小脑PC严重丢失 ,存活的PC有形态改变和异常基因活动 ,提示其功能不正常 。

米非司酮对人类围植入期子宫内膜整合素表达的影响

目的:观察具有正常生育能力的妇女服用米非司酮后对围植入期子宫内膜整合素表达的影响,以探讨小剂量米非司酮用于紧急避孕可能的作用机制。方法:以具有正常生育能力的健康妇女为研究对象。11名自愿受试者随机分为两组:LH—2组(n=5)和LH+2组(n=6),于对照周期和实验周期分别在LH—2或LH+2一次性口服安慰剂和米非司酮10 mg,在两个周期的LH+7各取一次子宫内膜,利用免疫组化技术,研究每位受试者用药前后子宫内膜整合素α_1、α_4、β_3亚基表达的改变。结果:LH—2组于用药后整合素α_1、α_4亚基在子宫内膜腺上皮的表达增强,而LH+2组于用药前后无显著差异。两组整合素β_3亚基的着色于用药前后均无显著差异。结论:米非司酮干扰了整合素在“植入窗”内的正常表达,提示米非司酮的避孕效果在于损伤了子宫内膜的感受态。

对组胚实习课教学的思考

从教师队伍、教学方法、教学手段及双语教学等几个方面,对新形势下作为形态学科的组织胚胎学教学进行了一些探索.

产前束缚应激对子代大鼠学习记忆能力的影响

方法：本研究以性成熟的正常Sprague-Dawley大鼠作为亲代大鼠。雌雄鼠以3：1合笼，次日将阴道涂片发现精子者取出单笼喂养，并记为孕0d。子代于产后21d断奶，雌雄分笼饲养。整个实验过程中大鼠自由摄食饮水，室温恒定于23℃±3℃。将妊娠大鼠分为两组：对照组(C组，n=10)及应激组(PS组，n=10)。

γ-射线诱导HL-60细胞凋亡的观察

目的 观察γ-射线诱导HL-60细胞凋亡的时间和剂量效应，以探求辐射诱发肿瘤细胞凋亡分子机制。方法 分别以2.5、5、7.5、10、15Gy γ射线照射HL60细胞，于照后继续培养3、6、9、12、24、27、30h，分别收获细胞。电泳检测DNA梯状带；流式细胞术(FCM)细胞凋亡定量并观察细胞周期变化；Hoechst 33258-PI复染荧光显微镜计数凋亡细胞及已死亡细胞百分率。结果 HL-60细胞受照后死亡方式主要是凋亡，其首先阻滞在G２／M期并由此走向凋亡；DNA梯状带及FCM检测结果发现，细胞凋亡具有时间和剂量依赖性；Hoechst 33258PI染色法检测结果与FCM检测的凋亡细胞随剂量的加大及时间的推移而增多的结果并不呈平行关系。结论 γ-射线诱导HL-60细胞凋亡时间和剂量效应关系的确立为进一步探讨该凋亡途径分子机制奠定了基础。