中国新疆哈萨克族人群CSF1PO、TH01和TPOX三个STR位点的遗传多态性

目的 获得CSF1P0、TPOX和TH0 1三个短串联重复序列 (shorttandemrepeat ,STR)在新疆哈萨克族人群中等位基因频率、基因型频率及相关法医学数据。方法 应用PCR技术、4 0 g·L-1(4% )变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染技术对上述三个STR位点分型。结果 新疆哈萨克族人群CSF1P0位点有 8个等位片段 ,TPOX位点有 8个等位片段 ,TH0 1位点有 7个等位片段 ;3个位点的基因型分布均符合Hardy Weinberg平衡 ;各位点杂合度分别为 0 .875 3、0 .8777、0 .932 1,多态信息量分别为 0 .74 0 1、0 .75 6 8、0 .75 0 9。

Rab1A siRNA对SGC7901胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的观察Rab1A在胃癌组织的表达及其对胃癌细胞SGC7901增殖和凋亡的影响。方法收集35例胃癌患者的胃癌组织及正常胃组织,用real-time PCR和Western blot法检测胃癌组织和正常胃组织中Rab1A表达水平。SGC7901胃癌细胞分为对照组,阴性对照组,Rab1A siRNA 30 nmol/L组,60 nmol/L组和90 nmol/L组,分别给予无效处理、阴性对照siRNA和三种不同浓度的Rab1A siRNA,MTT法检测各组细胞增殖活力。60 nmol/L的Rab1A siRNA沉默SGC7901细胞中Rab1A的表达,流式细胞仪分析Rab1A siRNA对细胞周期和细胞凋亡的影响,Western blot法检测Rab1A siRNA对Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。结果胃癌组织中Rab1A的表达无论在mRNA水平(5.625±0.525 vs 1.000±0.000,P<0.05)还是蛋白水平(1.013±0.125 vs 0.219±0.060,P<0.05),均显著高于正常胃组织。RNA干扰48 h后,与对照组相比,30 nmol/LRab1A siRNA组的细胞增殖活力无明显变化(P>0.05),60 nmol/LRab1A siRNA组和90 nmol/LRab1A siRNA组的细胞增殖活力明显下降(P<0.05),但60 nmol/L组和90 nmol/L组间细胞增殖活力无明显差异(P>0.05)。与对照组相比,60 nmol/L siRNA组无论是G1/G0期、S期,还是G2/M期的细胞数量均无明显差异(P>0.05);与对照组相比,60 nmol/L siRNA组无论是早期凋亡细胞比例,还是晚期凋亡细胞的比例均明显上升(P<0.05);而且,与对照组相比,60 nmol/L siRNA组的Bax蛋白的表达水平显著上调(0.483±0.015 vs 0.767±0.153,P<0.05),Bcl-2蛋白的表达水平显著下调(0.703±0.021 vs 0.347±0.015,P<0.05)。结论 Rab1A在胃癌组织中的表达水平高于正常胃组织,可促进胃癌细胞SGC7901增殖,并且通过上调Bcl-2和下调Bax的表达抑制细胞凋亡。

吲哚-3-乙酸对人外周血淋巴细胞微核和SCE频率的影响

背景与目的 :研究吲哚_3_乙酸对人体外周血淋巴细胞微核和SCE频率的影响。材料与方法 :应用人体外周血淋巴细胞测定吲哚_3_乙酸诱导微核形成率试验和姊妹染色单体互换率(SCE)。结果 :各吲哚_3_乙酸处理组与阴性对照组相比 ,微核形成率和SCE差异均存在显著性。结论

新疆锡伯族与哈萨克族间3个STR位点的多态性比较

分别获得CSF1PO,TPOX和TH013个短串联重复序列STR,对新疆锡伯族和哈萨克族人群中等位基因频率、基因型频率及相关法医学数据进行比较。应用PCR技术、4%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染技术对上述3个STR位点分型。锡伯族人群CSF1PO位点有9个等位片段,TPOX位点有8个等位片段,TH01位点有8个等位片段;哈萨克族人群CSF1PO位点有8个等位片段,TPOX位点有8个等位片段,TH01位点有7个等位片段,两民族各自的3个STR位点的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡;锡伯族人群各位点杂合度分别为0.9426,0.8361,0.8853,多态信息量分别为0.8298,0.7213,0.7626;哈萨克族人群各位点杂合度分别为0.8753,0.8777,0.9321,多态信息量分别为0.7401,0.7568,0.7509。以上3个STR位点的基因频率分布在两个不同的人群中具有显著的差异。

RNA干扰Survivin基因对Hela细胞凋亡及抗肿瘤药物敏感性的影响

目的:研究RNA干涉Survivin基因表达对人宫颈癌Hela细胞凋亡及抗肿瘤药物敏感性的影响.方法:将Sur-vivin SiRNA片段通过脂质体的介导转染宫颈癌Hela细胞系;RT-PCR检测Hela细胞中Survivin mRNA的表达,Western Blot检测Survivin蛋白表达;确定转染成功使干扰组细胞Survivin表达下调后,以流式细胞仪检测细胞凋亡率变化;细胞计数后绘制生长曲线观察细胞增殖能力变化;MTT法检测细胞对抗肿瘤药物的敏感性变化.结果:与对照组相比,两个Survivin基因干扰组的mRNA和蛋白表达抑制率分别为55%,60%和42%,55%,表达均下降(P<0.05);细胞凋亡率分别为19%和22%,较对照组高(P<0.05);生长曲线显示干扰组的细胞增殖能力下降;同一剂量药物作用下,各组细胞对抗肿瘤药物的敏感性均有提高,其中NVB组和PDD组有统计学意义(P<0.05).结论:Survivin SiRNA片段转染进入Hela细胞后,Survivin mRNA和蛋白表达水平均下降,Hela细胞的凋亡率增加,对抗肿瘤药物的敏感性增加.

CAC1基因在人胃癌细胞和组织中的表达

目的了解CAC1(CDK-associated cullin1)基因在胃癌细胞和组织中的表达情况。方法选取人胃黏膜细胞系GES-1和人胃癌细胞系AGS、MGC803和BGC823,采用实时定量PCR法检测CAC1基因在胃癌细胞系和胃黏膜细胞系中的表达水平,比较其在胃黏膜细胞和胃癌细胞中的表达水平;选取35例胃腺癌组织及相应正常组织标本,采用原位杂交法检测CAC1基因在胃癌组织和癌周围正常组织中的表达情况,分析CAC1在胃癌组织中的表达水平与临床因素的相关性。结果胃癌细胞系和胃黏膜细胞系GES-1中均检测出CAC1 mRNA的表达,胃癌细胞系(AGS、MGC803、BGC823)中CAC1 mRNA水平明显高于胃黏膜细胞系GES-1(1.000 0±0.000 0,0.950 7±0.017 6,0.434 0±0.041 4 vs 0.201 7±0.008 2,P<0.05);原位杂交结果显示,CAC1在胃癌组织中表达水平高于癌周围正常组织(57.14%vs 25.71%,P<0.05),主要表达于肿瘤细胞的胞质。而且,其在癌组织中的阳性表达率随着临床分期增高而增高(Ⅰ-Ⅱ期表达率37.50%,Ⅲ-Ⅳ期表达率73.68%,P<0.05),与患者年龄、细胞分化程度、淋巴结转移等因素无关(P>0.05)。结论 CAC1在胃癌细胞系和胃癌组织中的表达水平明显高于胃黏膜细胞系和癌周围正常组织,其在癌组织中的阳性表达率与临床分期有关。

高密度脂蛋白代谢相关基因单核苷酸多态性研究

目的探讨中国人群高密度脂蛋白代谢相关基因单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism,SNP)的分布特征。方法对象选自中国西部5省区健康汉族个体209人,男132名、女77名,平均年龄(59±10)岁。以蛋白酶K消化、苯酚及氯仿抽提以及异丙醇沉淀的方法提取全基因组DNA。应用聚合酶链反应、限制性内切酶片段长度多态性结合测序的方法检测ATP结合盒转运体(ATP-bindingcassettetransporter,ABCA1)、胆固醇酯转运蛋白(cholesteryleastertransferprotein,CETP)以及脂蛋白脂酶(lipoproteinlipase,LPL)等高密度脂蛋白代谢相关基因SNP。结果该研究群体等位基因ABCA1-A和G的基因频率分别为53.4%和46.6%;CETP-B1和B2分别为59.0%和41.0%;LPL-H(-)和LPL-H(+)分别为18.9%和81.1%;LPL-P(+)和LPL-P(-)分别为66.0%和34.0%,符合Hardy-Weinberg平衡定律。LPL基因多态位点Hind(+)与Pvu(+)之间存在显著的连锁不平衡。将性别因素作分层分析提示CETPTaq1B基因型频率存在明显的性别差异(χ2=9.94,P=0.0075)。测序表明上述限制性内切酶片段长度多态性均系内切酶识别区域内的单核苷酸碱基替换。中国人种与白人种基因多态性分布频率对照研究发现,CETP-Taq1B等位基因频率接近,而其余3种等位基因频率分布存在显著性差异。