血小板反应蛋白2联合血清白蛋白早期诊断川崎病冠脉扩张的价值

目的研究血小板反应蛋白2(TSP-2)联合血清白蛋白(ALB)对川崎病患儿冠脉损害的早期预测价值。方法将我院2014年4月至2017年7月收治的68例川崎病患儿作为川崎病组,同期发热非川崎病患儿34例与健康儿童34例作为发热组和健康组。川崎病组根据超声心动图表现分为冠脉扩张组与非冠脉扩张组。所有研究对象于同一时间取清晨空腹血离心进行实验室指标(ESR、ALT、AST、CRP、WBC)浓度的检测,酶联免疫吸附法检测TSP-2、TSP-1的浓度。同时绘制ROC曲线,分析TSP-2联合ALB对冠脉扩张的预测价值。结果川崎病组血浆TSP-2水平为(33.79±6.86)μg/L,明显高于发热组(21.471±4.94)μg/L和健康组(16.59±1.69)μg/L,差异有统计学意义(F=126.86,P<0.01)。川崎病组血浆TSP-1水平为(11.27±4.28)μg/L,明显高于发热组(6.73±2.78)μg/L和健康组(3.36±1.11)μg/L,差异有统计学意义(F=66.02,P<0.01)。冠脉扩张组血浆TSP-2水平为(35.32±7.68)μg/L,非冠脉扩张组为(30.31±5.57)μg/L,两组比较差异有统计学意义(t=3.06,P<0.01)。TSP-2单独预测冠脉扩张ROC曲线下面积为0.704,联合白蛋白ROC曲线下面积为0.770。结论 TSP-2水平的升高能够早期预测诊断川崎病并发冠脉损伤,TSP-2升高联合血清ALB降低更具诊断价值。

正五聚体蛋白3评估小儿脓毒症严重程度及心血管功能损害的价值

目的探讨正五聚体蛋白3(PTX3)在诊断和评估小儿脓毒症严重程度及心血管功能损害的价值。方法选取2015年2月至2017年2月入住的72例患儿,按感染程度分为3组,非脓毒症组32例,脓毒症组28例,严重脓毒症组12例;根据PTX3浓度分组,轻度升高组29例,中度升高组32例,重度升高组12例。收集患儿入住重症监护室第1天血浆PTX3浓度、肌钙蛋白、脑钠肽(BNP)、肌酸激酶、白细胞(WBC)、C-反应蛋白(CPR)、降钙素原(PCT)等实验室指标和预后情况,采用Spearman等级相关分析法分析脓毒症患儿感染程度与不同程度PTX3升高组之间的相关性;采用方差分析法判断不同程度PTX3升高组患儿心肌酶变化和不同感染严重程度患儿各炎性指标的比较;PTX3与不同炎性指标诊断疾病和预测预后的能力采用ROC曲线。结果患儿炎症感染程度与PTX3升高程度存在相关性(r=0.641,P=0.00);3组患儿的PTX3、CRP、PCT等指标随着感染程度的加深而呈升高趋势(P<0.05);在诊断脓毒血症方面,PTX3、PCT、CRP、WBC在ROC曲线下面积分别为0.729、0.668、0.627、0.552(P=0.001、0.015、0.066、0.451);在不同PTX3升高组之间,心肌酶学评价指标肌钙蛋白、BNP、肌酸激酶等原始值均随着PTX3指标的升高而升高,组间差异均有统计学意义(P<0.05);在预测脓毒症患儿预后方面,PTX3和BNP在预测预后ROC曲线下面积分别为0.784(P=0.000)和0.618(P=0.110),PTX3在预测预后方面特异度和敏感度方面均高于BNP。结论脓毒症患儿血浆PTX3水平在诊断和评估疾病严重程度具有重要的意义,且在心血管功能损害的诊断和预后评估也有重要的价值。

肠道病毒71型VP1蛋白原核表达及初步鉴定

目的采用分子克隆技术,构建肠道病毒71型(EV71)VP1全长基因大肠杆菌原核系统表达载体,诱导重组VP1融合蛋白表达。方法自EV71感染患者血清中提取病毒总RNA,进行一步法RT-PCR,扩增编码VP1蛋白的全长基因片段(891 bp),以pET32(a)为表达载体,构建重组表达质粒pET32(a)-VP1,转化E.coli.Rosseta感受态细胞,获得重组工程菌株。经诱导培养,SDS-PAGE电泳,免疫印迹鉴定表达产物。结果获得了含重组表达质粒pET32(a)-VP1的正相阳性工程菌株,经IPTG诱导能高效表达VP1融合蛋白。结论重组工程菌可表达VP1融合蛋白,对研究EV71发病机制及疫苗研制具有重要意义。