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题名肠道病毒71型VP1蛋白原核表达及初步鉴定
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作者
李小青
何威
段明月
李丹
冯媛
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机构
西安交通大学医学院附属儿童医院儿科疾病研究所
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出处
《临床和实验医学杂志》
2014年第16期1314-1317,共4页
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基金
陕西省自然科学基金资助项目
基金编号:2011GM4030
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文摘
目的采用分子克隆技术,构建肠道病毒71型(EV71)VP1全长基因大肠杆菌原核系统表达载体,诱导重组VP1融合蛋白表达。方法自EV71感染患者血清中提取病毒总RNA,进行一步法RT-PCR,扩增编码VP1蛋白的全长基因片段(891 bp),以pET32(a)为表达载体,构建重组表达质粒pET32(a)-VP1,转化E.coli.Rosseta感受态细胞,获得重组工程菌株。经诱导培养,SDS-PAGE电泳,免疫印迹鉴定表达产物。结果获得了含重组表达质粒pET32(a)-VP1的正相阳性工程菌株,经IPTG诱导能高效表达VP1融合蛋白。结论重组工程菌可表达VP1融合蛋白,对研究EV71发病机制及疫苗研制具有重要意义。
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关键词
肠道病毒EV71型
VP1蛋白
表达载体
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Keywords
Enterovirus 71
VP1 protein
Expression vector
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分类号
R373.2
[医药卫生—病原生物学]
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