口腔内科实验教学多媒体仿真头模系统的应用

从口腔内科学专业特点出发,阐述了多媒体仿真头模系统在实验教学过程中的应用与体会,认为该系统已成为现代口腔医学实验教学必备的设备和手段。

口腔扁平苔藓患者40例幽门螺旋杆菌的检测及意义

目的:探讨糜烂型扁平苔癣与幽门螺旋杆菌(HP)的相关性。方法:应用聚合酶链反应技术,对糜烂型扁平苔癣患者的口腔黏膜进行幽门螺旋杆菌脱氧核糖核酸的检测,比较与正常黏膜存在情况的差异。结果:对照组20例,HP呈阳性为1例。病例组40例,HP呈阳性为14例。两者存在显著性差异。结论:以糜烂型口腔扁平苔癣患者口腔黏膜中HP的存在情况为着手点,去除了胃肠道疾病的影响。正常组与糜烂型扁平苔癣病例组HP的存在有显著性差异,表明HP的存在与口腔扁平苔癣糜烂的发生密切相关。

融洽口腔诊疗过程中医患关系初探

近年来,医患关系问题不仅在我国,而且在全世界医疗卫生机构和社会舆论中都成为人们共同关注的焦点。医疗纠纷呈逐年上升的趋势,医患关系出现了前所未有的紧张局势。这些在诊疗过程中出现的紧张的医患关系在口腔诊疗中也屡见不鲜。本文就目前口腔诊疗过程中医患关系的局势,造成这一社会现象的成因及如何营造和谐医患关系等问题进行初步探讨,以期改善医患关系,减少医疗纠纷,促进口腔卫生事业协调、健康地向前发展。

牙龈卟啉单胞菌精氨酸牙龈素催化结构域基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的克隆牙龈卟啉单胞菌精氨酸牙龈素催化结构域(RgpAcd)基因,并将其置于大肠杆菌中作融合表达。方法利用PCR技术和基因重组技术,克隆牙龈卟啉单胞菌RgpAcd,然后插入中介载体pMD18-T中并测序鉴定。将目的基因片段插入原核表达载体pET-15b来构建表达质粒pET-15b/RgpAcd。重组原核表达质粒经酶切鉴定后转化大肠杆菌BL21感受态细胞,以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白。结果核酸序列测定与分析的结果表明,克隆的1476bp基因序列与GenBank数据库中的序列呈现100%同源性;IPTG诱导后的菌体经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳后有一个相对分子质量为5×104的融合表达蛋白产生。结论本实验成功克隆了牙龈卟啉单胞菌RgpAcd基因,并在大肠杆菌中表达了RgpAcd蛋白,为进一步研制重组活载体疫苗奠定了基础。

寡核苷酸转化变形链球菌方法的筛选

目的:筛选一种适合变形链球菌的寡核苷酸转运方法,为利用反义寡核苷酸抑制变形链球菌基因表达打下基础。方法:分别采用阳离子聚合体So-fastTM,及阳离子脂质体为载体,以FITC标记的寡核苷酸转化变形链球菌,流式细胞术检测摄取率,并与自然转化和电穿孔转化法的摄取率进行比较。利用生长曲线和琼脂平皿记数法,观察转化试剂和(或)转化方法对细菌增殖能力的影响。结果:So-fastTM转化组的摄取率最高,近80%,其次为电穿孔组(70.5%)和脂质体转化组(17.3%),自然转化组的摄取率最低,约4%。So-fastTM组和对照组的菌落计数和生长曲线均无明显差别(P>0.05),电穿孔组与未穿孔组的菌落计数差别明显(P<0.01)。结论:So-fastTM有明显的促转化作用,并且不影响受试菌的增殖,可做为寡核苷酸转化变形链球菌的载体。

脱矿牙本质基质用于根尖诱导成形术的临床研究

目的 观察同种脱矿牙本质基质 (DDM)用于根尖诱导成形术的临床效果。方法 将人牙本质去脂、脱矿粉碎、冻干等处理制备成DDM ,作为根尖诱导剂应用于临床 ,并以氢氧化钙糊剂作为对照 ,共治疗患牙 5 7颗。分别于术后 1年、2年拍X线片及临床检查。结果 根尖诱导成形术后 1年 ,患牙X线片有不同程度的根尖屏障形成 ,或虽无明显的X线改变但根管内探测有明显阻力 ,此时更换永久性根管充填材料。术后 2年的临床观察发现 ,DDM组的治愈率为 92 86 % ,略高于氢氧化钙组的 91 30 % ,但无显著性差异。结论 脱矿牙本质基质可作为一种新的根尖诱导剂应用于临床。

糖尿病合并牙周病患者牙周治疗的伦理学思考

牙周病是糖尿病的第六大并发症,糖尿病患者的牙周情况却常被忽视。从医学伦理学角度出发,分析了糖尿病合并牙周病患者牙周治疗常被忽视的原因有:患者错误的医疗观念和临床医师对糖尿病患者合并牙周病的认识不足。对这类患者牙周治疗的医德要求有:首先临床医师要对糖尿病合并牙周病有正确的认识;其次正确处理与协调医患关系和科室间关系;最后正确选择牙周治疗方法的伦理道德观。

诱导大鼠下切牙氟斑牙模型所需饮水氟浓度及时间的筛选

目的通过观察不同浓度加氟饮水对大鼠下切牙釉质表面颜色变化及釉质发育的影响,筛选建立氟斑牙模型的合适实验时间及饮水氟浓度,为进一步研究氟斑牙的发病机理奠定实验基础。方法105只体重为210 g左右的SD雄性大鼠被随机分为4组,对照组15只用去离子水喂养,另外3组分别用含氟25mg/L5、0 mg/L及100 mg/L的氟化钠水喂养6周。分别在51、0、20、304、2 d等不同的时间点对每个大鼠下前牙唇侧面照相,然后每组分别处死一部分大鼠,分离下颌切牙、固定、脱钙并进行HE切片制作。结果正常鼠切牙颜色为橘黄色染色。在50 mg/L和100 mg/L氟化钠组成功地建立了下颌切牙氟斑牙模型,切牙釉质颜色呈现逐渐退变过程,由橘黄色变为浅黄色,白垩色,釉质的成釉细胞成多层排列。100 mg/L氟化钠组比50 mg/L组氟斑牙出现较早且更严重。而对照组和25 mg/L氟化钠组釉质表面颜色正常,成釉细胞排列整齐。结论50 mg/L和100 mg/L氟化钠水能成功的诱导不断生长的鼠切牙氟斑牙的产生。其釉质表面呈现白棕色条纹、白垩色等各种程度的颜色改变。25 mg/L氟化钠水喂养组在为期6周的实验中不产生明显的氟斑牙。

半定量RT-PCR检测腺样囊性癌细胞survivin mRNA的表达

目的探讨靶向surv iv in基因阻断后mRNA表达量的变化,以及在体外对肿瘤细胞的抑制作用。方法应用分子克隆技术构建siRNA真核表达载体Pgenesil/sur;通过脂质体转染腺样囊性癌(salivary adeno id cystic carcinom a,SACC)细胞。采用RT-PCR技术检测转染前后surv iv in mRNA表达量以及表达抑制率。结果转染后surv iv in mRNA表达水平x-±s(0.42±0.10)较转染前surv iv in mRNA表达水平(1.56±0.12)明显减低,P<0.05;在mRNA水平其表达抑制率为73.1%。转染空质粒载体Pgenesil-1 surv iv in mRNA表达水平(1.35±0.13)与空白对照组比较无统计学差异(P>0.05)。结论靶向surv iv in siRNA能阻断肿瘤细胞surv iv in基因mRNA表达,并有效抑制体外培养的肿瘤细胞SACC-83的增殖作用。

改良一步法分离变形链球菌RNA

目的快速、高效分离高质量变形链球菌RNA。方法溶菌酶处理变形链球菌后加入10%SDS,再经沸水浴1-2min可快速裂解细菌;裂解产物以一步法分离RNA。琼脂糖凝胶电泳及紫外分光光度计观察和测量RNA完整性及浓度。结果与其他方法比较,该法所获RNA产量高,几乎达30μgRNA/109细胞且无DNA污染。反转录（RT）-PCR证实mRNA的完整性好。结论改良一步法简便、经济、稳定,所得RNA可用于后续研究。

rhBMP-2复合制剂用于犬牙根尖诱导成形术的实验研究

目的观察使用基因重组人骨形成蛋白-2、Ⅰ型胶原和羟基磷灰石(rhBMP-2/Co/HA)的复合制剂作为根尖诱导剂,用于犬牙牙根未发育完成的年轻恒牙的慢性根尖周炎的根管充填,观察其根尖诱导效果。方法制备杂种家犬牙根未发育完成的年轻恒牙慢性根尖周炎的动物实验模型。用rhBMP-2/Co/HA复合制剂作为根尖诱导剂充填到犬牙的根管内,对照组用氢氧化钙糊剂。12周后用X线片及组织学方法观察2种不同的根尖诱导剂根管充填后牙根延长、根尖封闭的效果。结果实验组全部牙根延长,根尖形成并闭合,闭合率100%;对照组45个牙根延长,根尖形成并闭合,闭合率93.75%;实验组和对照组的根尖闭合率无显著差异(P>0.05),且根尖均有不同程度的硬组织形成。结论 rhBMP-2/Co/HA复合制剂具有良好的生物活性和根尖诱导作用。

猪髂骨TEB与APBSC复合修复犬牙周骨缺损的实验研究

目的：观察APBSC在原代和不同传代培养下与TEB复合移植修复骨缺损的效果.方法：采用猪的新鲜髂骨块经脱蛋白、脱钙处理后制成TEB,与原代和不同传代培养的APBSC制成APBSC-TEB复合体,移植于犬的下颌骨缺损处,观察不同时间原代APBSC-TEB复合体和不同传代培养的APBSC-TEB复合体对犬颌骨缺损修复的效果.结果：10只犬经过6个月的观察发现：原代APBSC与1～3次传代培养的APBSC在植入骨缺损区的成骨作用没有显著性差别,对骨缺损区的修复作用效果良好.APBSC在TEB的网状支架内生长良好,逐渐衍变为成骨细胞.3个月后,骨缺损区得以完全修复.TEB也逐渐被吸收并由钙化的骨胶原组织取代.而第4～5代培养的APBSC-TEB复合体植入骨缺损区成骨作用较差.结论：经脱蛋白、脱钙处理后的TEB,大大降低了抗原性,是良好的细胞移植载体.APBSC无论是原代,还是经1～3代传代培养,其成骨效果同样良好.

苯妥英钠对巨噬细胞中TGF-β1和bFGF表达的影响

目的:观察苯妥英钠(phenytion)作用下巨噬细胞中TGF-β1和bFGF的表达。方法:用5、25、50μg/mL苯妥英钠液对SD大鼠的腹腔巨噬细胞(macrophage,Mφ)作用48h、SABC免疫组化方法测定Mφ中TGF-β1、bFGF的蛋白表达。结果:各实验组中TGF-β1、bFGF的蛋白表达明显高于空白对照组,具有统计学差异(P<0.05),且随着PHT浓度的升高,蛋白表达增强。但5μg/mL组和25μg/mL组中TGF-β1的表达没有统计学差异(P>0.05)。结论:PTH在5～50μg/mL浓度范围内可以激活Mφ,并促进其分泌TGF-β1、bFGF。

APBSC与TEB犬体内埋植诱导成骨的实验研究

目的：研究APBSC-TEB复合埋植于犬的腹部皮下组织，在TGF-β1和BMP的诱导下成骨，为牙周骨缺损骨修复作准备。方法：新鲜猪髂骨脱蛋白、脱钙制成TEB，浸入自犬提取的APBSC种子细胞悬液中，制备成APBSC-TEB复合物，埋植于犬腹部皮下组织，在不同时间观察成骨情况。结果：实验组术后1周APBSC细胞与移植前没有变化；术后2周，APBSC细胞壁触突向胶元纤维和成纤维细胞中伸展；术后1个月，TEB被机体吸收，代之以少量的骨小梁形成，APBSC已演变为成骨细胞。3～5个月，骨小梁增多，其间也有大量的结缔组织成分。对照组为结缔组织，没有成骨细胞形成。结论：APBSC-TEB复合移植于非骨部位，在TGF-β1和BMP的诱导下可以形成骨样组织。

高致龋变形链球菌寡脱氧核苷酸探针的设计及有效性检测

目的:设计变形链球菌ATCC25175毒力因子gtfB寡脱氧核苷酸探针,并进行敏感性和特异性检测。方法:采用斑点杂交法,将体外合成的变形链球菌毒力因子gtfB寡脱氧核苷酸探针与经PCR扩增的S.M及7种口腔常见细菌DNA进行杂交检测,然后,使用该探针测试来源于髙龋和无龋个体的唾液样本。结果:探针检测同源性序列敏感性达到1ng水平;与7株口腔常见菌种的杂交结果不存在菌株间的交叉反应,具有较高的特异性。结论:变形链球菌毒力因子gtfB寡脱氧核苷酸探针敏感性高而且特异性好,化学性质稳定。同时,观察临床唾液样本测试结果发现,其阳性率与个体龋患现状基本一致。可以进一步考察该探针检测结果与临床病例龋患风险的一致性,为今后用于大规模流行病学调查中龋高危人群的筛查奠定基础。