钙离子调控KLK4表达对成釉细胞生长的影响

目的探讨钙离子对成釉细胞中激肽释放酶4(kallikrein-4,KLK4)表达及细胞生长的影响,为钙离子促进牙釉质正常矿化提供实验依据。方法采用不同浓度CaCl_(2)(0、2.0、2.5、3.0、3.5 mmol/L)处理成釉细胞株ALC(ameloblast-lineage cell)24 h、48 h,q RT-PCR和Western blot检测KLK4 mRNA和蛋白表达水平;CCK-8检测细胞相对活力;流式细胞术、Hoechst 33342染色检测钙离子对细胞周期和细胞凋亡的影响;Western blot检测葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)的蛋白表达水平。结果与对照组(0 mmol/L CaCl_(2))相比,2.5、3.0、3.5 mmol/L CaCl_(2)处理细胞24 h后,KLK4 mRNA表达上升(P<0.05),2.0、2.5、3.0、3.5 mmol/L CaCl_(2)处理细胞24 h后,KLK4蛋白表达上升(P<0.05);3.0、3.5 mmol/L CaCl_(2)处理细胞48 h后,KLK4 mRNA和蛋白表达上升(P<0.05)。与对照组相比,2.0、2.5、3.0 mmol/L CaCl_(2)处理ALC细胞24 h、48 h后,细胞活力增加(P<0.05),其中2.5 mmol/L CaCl_(2)组中细胞活力最高。Hoechst 33342染色结果显示,3.0、3.5 mmol/L CaCl_(2)促使ALC细胞发生凋亡。流式细胞仪检测结果显示,与0、2.0、2.5、3.0 mmol/L CaCl_(2)组相比,3.5 mmol/L CaCl_(2)处理ALC细胞24 h后,G2/M期细胞比例增加,细胞凋亡率上升(P<0.05)。3.0、3.5 mmol/L CaCl_(2)处理细胞24 h后,与对照组相比,GRP78蛋白表达下降(P<0.05);2.5 mmol/L CaCl_(2)处理细胞48 h后,与对照组相比,GRP78蛋白表达下降(P<0.05)。结论钙离子促进ALC细胞中KLK4表达上升、细胞活力增加,但较高浓度的钙离子可使ALC细胞的G2/M期阻滞,诱发ALC细胞凋亡,降低凋亡相关蛋白GRP78的表达。

KLK4介导氟诱发成釉细胞凋亡的作用机制

目的探讨氟对成釉细胞中激肽释放酶4(kallikrein-4,KLK4)表达和细胞凋亡的影响及其作用机制。方法以不同浓度的氟化钠(NaF)处理ALC细胞24 h、48 h,qRT-PCR和Western blotting检测KLK4 mRNA及蛋白表达;CCK-8检测细胞相对活力;流式细胞术、Hoechst 33342染色检测氟对细胞周期和细胞凋亡的影响;Western blotting检测葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、真核生物起始因子2a(eukaryotic initiation factor 2α,eIF2α)、激活转录因子-4(activating transcription factor 4,ATF4)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)的蛋白表达。结果1.0、2.0 mmol/L NaF处理细胞24 h、48 h后,与对照组(0 mmol/L NaF)相比,KLK4 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。1.0、2.0 mmol/L NaF处理细胞24 h、48 h后,漂浮细胞增加,其中2.0 mmol/L NaF组细胞相对活力降低,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。NaF处理细胞24 h后,与对照组相比,0.1、1.0 mmol/L NaF组G0/G1期细胞比例降低,S期细胞比例升高(P<0.05),2.0 mmol/L NaF组G0/G1期细胞比例升高,S期细胞比例降低(P<0.05);NaF处理细胞48 h后,与对照组相比,2.0 mmol/L NaF组G0/G1期细胞比例升高,G2/M期细胞比例降低(P<0.05)。随着NaF处理浓度的升高,亮蓝色的细胞数量逐渐增多,细胞凋亡率也依次升高,除了0.1 mmol/L NaF 24 h处理组外,其余氟浓度处理组细胞凋亡率与对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,0.1、1.0、2.0 mmol/L NaF处理细胞24 h后,GRP78和p-eIF2α蛋白表达升高(P<0.05)。与对照组相比,1.0、2.0 mmol/L NaF处理细胞24 h,ATF4和CHOP蛋白表达升高(P<0.05),0.1、1.0、2.0 mmol/L NaF处理细胞48 h,ATF4和CHOP蛋白表达升高(P<0.05)。结论NaF可能通过上调GRP78表达,激活eIF2α/ATF4/CHOP信号通路,从而引起KLK4表达抑制,诱发ALC细胞生长异常。

TiF4溶液对脱矿牙釉质再矿化作用的实验研究

目的:研究不同浓度四氟化钛(TiF_4)溶液对脱矿牙釉质的再矿化作用。方法:将人第三磨牙切割打磨,制备3 mm×2 mm×1.5 mm的牙釉质块60个,建立早期人工龋损模型后随机分6组:1%、2%、3%、4%TiF_4溶液组、1.356%Na F阳性对照组和双蒸水DDW阴性对照组。各组试件每天处理1次后浸泡于再矿化液中,14 d后进行micro-CT扫描和表面显微硬度(SMH)测试。结果:2%TiF_4处理组脱矿深度变浅,显著优于3%TiF_4组和4%TiF_4组(P<0.05);2%TiF_4组脱矿深度优于Na F阳性对照组,差异无显著性(P>0.05);2%TiF_4组处理后表面硬度与阳性对照Na F组相当(P>0.05),显著高于其他组(P<0.05)。结论:2%TiF_4溶液对脱矿牙釉质再矿化作用优于1%、3%和4%TiF_4。

低钙对SD大鼠原代成釉细胞生物学特性影响的体外实验研究

目的探索低水平的钙对成釉细胞生物学特性的影响。方法用标准DMEM培养基培养大鼠原代成釉细胞,培养5 d后,RT-PCR及免疫组化对其进行鉴定,然后分别加入含Ca^(2+)0、0.6、1.2 mmoL/L及100 mL/L胎牛血清的不同钙浓度DMEM培养基。48 h后倒置显微镜下观察细胞形态变化,MTT观察细胞增殖活力,Annexin V-PI观察细胞凋亡情况,Real time-PCR检测细胞釉原蛋白及激肽释放酶-4(KLK4)的mRNA表达水平。结果标准DMEM培养基培养5 d后,细胞呈铺路样排列,RT-PCR显示细胞釉原蛋白、KLK4均有表达;免疫组化显示多数细胞釉原蛋白染色阳性。不同浓度钙干预48 h后,1.2 mmoL/L Ca^(2+)组部分细胞较0 mmoL/L和0.6 mmoL/L Ca^(2+)组胞核密度高、透光性差、高柱状细胞数目多。随着培养基中Ca^(2+)浓度降低,MTT显示成釉细胞增殖活性增加(P<0.01);Annexin V-PI检测显示凋亡细胞百分率降低,1.2 mmoL/L Ca^(2+)组与0 mmoL/L Ca^(2+)组间差异具有统计学意义(P<0.05);Real time-PCR显示细胞釉原蛋白及KLK4 mRNA表达水平均降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论钙缺乏可能抑制成釉细胞分化,进而影响釉质矿化成熟。

四氟化钛对变形链球菌生长及产酸作用的初步研究

目的:探讨四氟化钛(TiF4)对变形链球菌生长及产酸的影响,为应用TiF4防龋提供实验依据。方法:以含有相同F-浓度的氟化钠为参照,观察四氟化钛对变链菌抑菌圈的大小,测定其最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC),绘制不同浓度四氟化钛下的细菌生长曲线,比较不同浓度四氟化钛与氟化钠分别作用下菌液培养前后pH值的变化。结果:四氟化钛抑菌圈直径大于氟化钠,其MIC及MBC均远低于氟化钠,菌液pH值变化小于氟化钠(P<0.05)。结论:四氟化钛较氟化钠对变链菌的生长及产酸有更强的抑制作用,且其作用与浓度正相关。

两种糊剂在根管治疗封药期间镇痛效果的比较

目的:评估Odontopaste与PULPDENT Temp CanalTM两种根管糊剂在根管治疗封药期间的镇痛作用。方法:选择下颌第一或第二磨牙自发痛的患者129名共129个患牙,根管预备后随机分为3组(n=43),组1:Odontopaste组;组2:PULPDENT Temp CanalTM组;组3:安慰剂,并在患牙内分别封入相应糊剂。根据Heft-Parker VAS量表对患者在治疗前、封药后24 h及7 d时自发痛及叩痛程度进行评分。结果:组1和组2在封药后24 h及7 d的自发痛和叩痛评分显著低于组3,组1在封药24 h后的自发痛评分低于组2;3组患者在根管预备及封药24 h后其自发痛和叩痛情况均得到明显减轻。结论:Odontopaste、PULPDENT Temp Canal^(TM)糊剂均能有效降低患牙的自发痛和叩痛,且Odontopaste的早期镇痛作用则更加理想。

T-2毒素对大鼠切牙成釉细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响

目的:研究不同剂量T-2毒素对大鼠切牙成釉细胞Bcl-2和Bax表达的影响。方法:选择30只SD大鼠,随机分为3组:对照组,实验组1和实验组2,T-2毒素灌胃剂量分别为每天每公斤体质量0、100、200 ng,每周灌胃6 d,连续灌胃4周后处死,取含牙的下颌骨,沿切牙长轴做5μm连续切片,SABC免疫组化检测成釉细胞Bcl-2和Bax蛋白表达,计算机图像采集积分光密度半定量分析Bcl-2和Bax蛋白表达量,蛋白表达量和积分光密度值成反比。结果:两实验组较对照组分泌期成釉细胞Bcl-2蛋白表达下降,Bax蛋白表达上升,Bax/Bcl-2表达的比值上升,各组间均有显著性差异(P<0.05)。结论:T-2毒素可使大鼠切牙分泌期成釉细胞Bcl-2蛋白表达下降,同时上调Bax蛋白表达。高剂量T-2毒素影响更明显。

钙对成釉细胞系ALC细胞生物学特性的影响

目的观察钙对成釉细胞系ALC细胞增殖、凋亡及细胞周期等生物学特性的影响。方法培养ALC细胞系,在高糖DMEM培养基中配制0、2.0、2.5、3.0、3.5 mmol/L CaCl2溶液,利用倒置显微镜检测在两种培养时间(24、48 h)下ALC细胞形态是否改变。通过CCK-8法分析钙离子对ALC细胞增殖的作用,运用Hoechst染色观察钙离子对ALC细胞凋亡的影响;通过PI染色FCM法分析钙离子对ALC细胞生长周期的干预。利用Western blot检测钙离子对ALC细胞中周期蛋白Cyclin A、Cyclin B、Cyclin D表达的调节。结果0 mmol/L CaCl2组,ALC细胞形态呈卵圆或多边形,细胞间连接紧密呈铺路石样生长。其他不同浓度的钙干预24、48 h后,ALC细胞形态未见明显变化;CCK-8法结果显示钙干预24、48 h后,随着钙浓度增加,ALC细胞的存活率呈微弱降低趋势,但此趋势无统计学意义;Hoechst染色结果显示不同浓度的钙干预24、48 h后,ALC细胞的凋亡数目随时间延长可见增加,但不同钙离子浓度组间差异并不显著;PI染色FCM检测显示随着钙离子浓度的升高,ALC细胞的细胞周期中S期逐渐增加,G1期、G2期呈下降趋势;Western blot结果表明钙干预24、48 h后,ALC细胞中的周期蛋白Cyclin A、Cyclin B表达呈下降趋势,Cyclin D表达呈上升趋势。结论在本研究条件下,钙对ALC细胞增殖、凋亡未见明显影响,但改变了细胞周期。通过实验研究结果发现本实验中的钙离子浓度对成釉细胞无明显毒副作用,可用于进一步探讨钙对氟牙症治疗的可能机制及作用。

对比分析Lava Ultimate优韧瓷高嵌体与SonicFill声波树脂修复对根管治疗后大面积牙体缺损的修复效果

目的:比较Lava Ultimate优韧瓷高嵌体与SonicFill声波树脂修复对根管治疗后大面积牙体缺损的修复效果。方法:选择2019年1月至2022年1月期间我院收治的124例根管治疗后大面积牙体缺损患者作为研究对象,根据牙体修复方式分为A组(62例)和B组(62例)。A组采用Lava Ultimate优韧瓷高嵌体修复,B组采用SonicFill声波树脂修复。比较两组患者治疗后6个月、12个月时的临床疗效、牙龈指数(GI)和菌斑指数(PLI)以及并发症情况、患者修复满意度。结果:(1)A组和B组修复后6个月和修复后1年时的改良版USPHS标准中边缘密合度、修复体外形、修复体颜色、修复体折裂、基牙继发龋等分级比较无显著差异(P>0.05);(2)A组和B组修复后6个月和修复后12个月时的GI和PLI均显著低于修复前(P<0.05),但两组不同时间的GI、PLI分别比较无显著差异(P>0.05);(3)A组修复总满意度高于B组(P<0.05);(4)A组和B组修复后并发症总发生率分别为3.23%和4.84%,两组间比较无显著差异(P>0.05)。结论:Lava Ultimate优韧瓷高嵌体与SonicFill声波树脂修复对根管治疗后大面积牙体缺损治疗效果相当,都能有效保证牙体缺损外观恢复、密合程度和咬合,有利于牙周健康,但高嵌体满意度较高。

氧化锆强化硅酸锂玻璃陶瓷与Lava UItimate优韧瓷嵌体修复根管治疗后大面积缺损牙的咀嚼能力和外观的比较研究

目的:探究氧化锆强化硅酸锂玻璃陶瓷与Lava UItimate优韧瓷嵌体修复根管治疗后大面积缺损牙的咀嚼能力和外观的效果。方法:选择298例牙缺损患者随机分为观察组和对照组2组,其中观察组患者给与Lava UItimate优韧瓷嵌体修复治疗,对照组给与氧化锆强化硅酸锂玻璃陶瓷嵌体修复治疗。对比分析两组患者修复效果、咀嚼能力、外观变化、牙龈指数和菌斑指数、修复满意度以及并发症发生率。结果:观察组患者修复的完整度为99.33%,颜色匹配度为97.32%,边缘适合性为98.66%,均显著高于对照组的77.18%、65.77%和67.11%(P<0.05)。修复后,观察组患者的咀嚼能力、外观变化显著优于对照组(P<0.05),PLI和GI显著低于对照组(P<0.05)。并且,观察组患者对修复的总满意度为99.33%,显著高于对照组的82.55%(P<0.05),并发症发生率为2.01%,显著低于对照组的29.53%(P<0.05)。结论:Lava UItimate优韧瓷嵌体修复根管治疗后大面积缺损牙的咀嚼能力和外观的效果较氧化锆强化硅酸锂玻璃陶瓷好,可显著降低并发症发生率,提高患者满意度,值得临床推广使用。

医用空气消毒机在洁牙诊室应用管理的研究

探讨洁牙诊室空气消毒机的有效消毒方法,提高口腔诊疗过程中的空气质量,确保医疗安全。方法:通过细菌沉降法,设对照组和观察组,根据消毒时间和时间点的不同分成三个观察组,对洁牙诊室空气进行细菌监测。对照组未采取任何空气消毒措施;观察组应用科尔康医用消毒机进行空气消毒。结果:3组观察组和对照组差异均有统计学意义,其中观察②组和观察③组符合《医院空气净化管理规范》相关标准的要求。结论:洁牙诊室存在大量的感染性气溶胶及粉尘,采用医用空气消毒机进行空气消毒至少每日3次,每次1小时,可以达到空气消毒标准。及时清除室内污浊空气,释放高效负离子,能够有效地降低诊室内空气细菌数量,保证口腔诊室空气的清洁,保障医疗安全。