姜黄素诱导人黑色素瘤A375细胞凋亡以及对c-myc、caspase-3表达的影响

目的探讨姜黄素诱导人黑色素瘤A375细胞凋亡及其对c-myc、Caspase-3表达的影响。方法姜黄素处理A375细胞,MTT法检测细胞的生长活性,应用倒置显微镜和透射电镜进行形态学观察,采用AnnexinV/PI双染法和DAN片段化分析检测细胞凋亡,SABC免疫组化法和原位杂交检测细胞内c-myc、Caspase-3表达水平。结果姜黄素能抑制A375细胞增殖,并呈剂量和时间依赖性。经30!μmol/L姜黄素处理A375细胞48h,细胞呈现凋亡形态学改变;DAN片段化分析可见到明显的DNA梯带形成;流式细胞仪定量检测出20!μmol/L以上浓度姜黄素诱导细胞凋亡的发生率较对照组有显著性差异。c-myc表达水平减少,而Caspase-3表达增加。结论姜黄素能抑制A375细胞增殖和诱导其凋亡,c-myc和Caspase-3基因可能参与凋亡过程。

模拟失重14d大鼠中脑导水管周围灰质Fos蛋白表达的改变

目的观察大鼠模拟失重后中脑导水管周围灰质(periaqueductafgray,PAG)神经元Fos蛋白表达的改变。方法采用雌性大鼠尾部悬吊法建立模拟失重模型,按体重配对原则随机将大鼠分为2组,即模拟失重14d(SW-14d)组和正常对照(Con)组;根据实验干预措施的不同,每组又分为3个亚组,即电刺激(electrical stimulation,ES)亚组,琥珀胆碱(succinylcholine,Sch)预处理(pretreatment ofSch,PS)亚组和单纯琥珀胆碱注射(Sch injection,SI)亚组,每个亚组4只大鼠。采用免疫组织化学ABC法对大鼠中脑冰冻切片进行染色,显微镜下进行观察并拍照,对Fos免疫阳性细胞进行形态与计数分析。结果两组大鼠PAG腹外侧区均观察到Fos样蛋白的表达。与正常对照组相比,模拟失重组Fos免疫阳性细胞,核着色较淡,边界较为模糊;Fos免疫阳性细胞数明显减少。不同亚组大鼠Fos免疫阳性细胞计数分析表现为:Sch预处理亚组>伤害性电刺激亚组>单纯琥珀胆碱注射亚组,正常对照组大鼠阳性细胞计数结果分别为71.06±8.96、46.94±3.38和35.04±4.62;模拟失重2周组分别为32.91±2.99,27.77±3.27和11.75±1.00。结论伤害性电刺激可诱发大鼠PAG腹外侧区神经元Fos样蛋白的表达,而琥珀胆碱可使其表达增加;模拟失重后伤害性电刺激诱发的Fos样蛋白在PAG的表达减少。

功能矫治器前伸下颌后SD大鼠咀嚼肌中Ⅳ型胶原mRNA表达水平的改变

目的：通过检测大鼠下颌前伸后咀嚼肌中Ⅳ型胶原的表达水平的改变，研究颌骨矫形过程中咀嚼肌适应性变化及其规律，并初步探讨其适应性变化机制，为矫形治疗提供新的理论依据。方法：选用40只4周龄雄性Sprague—Dawley（SD）大鼠为实验对象，用自制的功能矫治器斜导导下颌向前。采用RT-PCR法对Ⅳ型胶原mRNA进行测定。结果：实验组Ⅳ型胶原的表达随着时间的变化出现先增加后减少再增加的表现，实验组Ⅳ型胶原的表达较实验组整体减少。结论：Ⅳ型胶原介导了组织重构过程，为MMPs、TIMPs的平衡理论提供了新的依据，即MMPs／TIMPs处于一个平衡-改变-平衡这样一个动态的平衡当中。