六味地黄慢性处理对抗D半乳糖引起的大鼠大脑胆碱能神经系统损伤(英文)

本研究旨在观察六味地黄(Liu Wei Dihuang,LWDH)对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)致衰老大鼠的学习记忆能力及中枢胆碱能神经系统的保护作用。采用成年Sprague-Dawley(SD)大鼠64只,雌雄各半。雄性、雌性大鼠均随机分为4组(n=8):空白对照组即生理盐水+生理盐水(N+N)组;对照组即生理盐水+LWDH(N+L)组;模型组即D-gal+生理盐水(D+N)组和治疗组即D-gal+LWDH(D+L)组。D+N组和D+L组连续每天项部皮下注射D-gal(100mg/kg)6周,N+N和N+L组大鼠注射相同体积生理盐水。第三周起给D+L和N+L组大鼠连续每天LWDH汤剂灌胃6周,同时给N+N组和D+N组连续每天相同体积生理盐水灌胃6周。D-gal衰老大鼠造模结束后,采用Morris水迷宫测定大鼠学习、记忆能力,用HE染色法观察海马和视皮质的形态学变化,检测视皮质中乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)含量,以及胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)及乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)的活性,用免疫组织化学方法观察视皮质中胆碱能神经元ChAT、AChE的表达。结果显示:与N+N组相比,D+N组表现出明显的学习记忆能力下降,提示D-gal衰老模型建立成功;D+L组逃避潜伏期显著缩短,游泳速度明显增加,同时其对靶象限搜寻时间百分比和平台穿越次数均显著增加,提示LWDH显著改善了D-gal诱导的学习记忆障碍。LWDH显著地增加了D+L组的视皮质匀浆ACh含量和ChAT活性,而降低了AChE活性。免疫组织化学结果显示:D+L组视皮质神经元AChE和ChAT均明显高于D+N组。HE染色结果显示:与N+N组相比,D+N组海马和视皮质神经元凋亡增加,细胞密度明显下降,而LWDH显著地增加了D+L组神经元密度。LWDH对衰老雌、雄大鼠的神经保护作用存在差异,D+N组雄性大鼠平台穿越次数的改善情况优于雌性大鼠,而雌性大鼠在ChAT表达水平和视皮质神经元密度指标上的改善情况则优于雄性大鼠。以上结果表明,LWDH显著逆转了D-gal诱导的学习记忆能力障碍及海马和视皮质的神经元损伤,其保护的机制可能是通过恢复视皮质中ACh的含量及ChAT活性,提高视皮质中ChAT及AChE的表达而起作用。此外,LWDH对大鼠大脑的保护作用有性别差异。