莲心碱通过抑制细胞自噬减轻体外胰腺腺泡细胞急性炎症反应

目的探讨莲心碱(liensinine,LSN)对雨蛙素诱导的急性胰腺炎细胞模型的保护作用及其分子机制。方法胰腺腺泡细胞AR42J分为对照组、模型组、20μmol/L LSN组和40μmol/L LSN组。模型组加入雨蛙素刺激造模;20μmol/L LSN组和40μmol/L LSN组加入LSN预处理12 h,再加入雨蛙素刺激造模。采用Western blot检测LC3、Beclin-1和p62蛋白表达水平,采用ELISA法检测炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)分泌水平,采用淀粉酶活性检测试剂盒检测淀粉酶含量,采用Calcein AM细胞活性检测试剂盒检测细胞存活率,采用乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)细胞毒性检测试剂盒检测细胞损伤,采用TUNEL法检测细胞凋亡。结果与对照组比较,模型组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比率和Beclin-1蛋白水平显著升高(P<0.01),而p62蛋白水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,20μmol/L LSN组和40μmol/L LSN组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比率和Beclin-1蛋白水平显著降低(P<0.05),而p62蛋白水平显著升高(P<0.05);与20μmol/L LSN组比较,40μmol/L LSN组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比率和Beclin-1蛋白水平显著减少(P<0.05),而p62蛋白水平显著增加(P<0.05)。与对照组比较,模型组IL-1β、IL-6和TNF-α分泌水平显著增加(P<0.01),淀粉酶活性显著升高(P<0.01),细胞存活率显著降低(P<0.01),LDH活性显著升高(P<0.01),细胞凋亡率显著增加(P<0.01);与模型组比较,20μmol/L LSN组和40μmol/L LSN组IL-1β、IL-6和TNF-α分泌水平显著降低(P<0.05),淀粉酶活性显著下降(P<0.05),细胞存活率显著升高(P<0.05),LDH活性显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著下降(P<0.05);与20μmol/L LSN组比较,40μmol/L LSN组IL-1β、IL-6和TNF-α分泌水平显著减少(P<0.05),淀粉酶活性显著降低(P<0.05),细胞存活率显著提高(P<0.05),LDH活性显著下降(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。结论莲心碱可有效保护雨蛙素诱导的胰腺腺泡细胞损伤,其作用机制可能与抑制细胞自噬相关。

CaMKK2调控肝细胞癌化疗耐药性的作用和机制

目的 探讨钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶2(calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase 2,CaMKK2)调控肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)化疗耐药性的作用及其机制。方法 (1)为了检测CaMKK2在HCC耐药细胞株中的表达变化,将实验分为亲本组和耐药组。采用浓度梯度递增法建立奥沙利铂(oxaliplatin, OXA)耐药细胞株MHCC97H/OXA和Hep3B/OXA。采用Western blot检测CaMKK2的磷酸化和总蛋白表达水平。(2)为了检测CaMKK2对肝细胞癌化疗药性的调控作用,将实验分为对照组和CaMKK2敲除组。采用CRISPR/Cas9技术敲除MHCC97H/OXA和Hep3B/OXA细胞株中的CaMKK2基因表达,采用Western blot验证CaMKK2敲除效率。采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)实验检测CaMKK2敲除对MHCC97H/OXA和Hep3B/OXA细胞株细胞存活率的影响。采用流式细胞术检测CaMKK2敲除对MHCC97H/OXA和Hep3B/OXA细胞株凋亡的影响。采用Western blot检测CaMKK2敲除对微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、p62、腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine 5′-monophosphate-activated protein kinase, AMPK)和UNC-51样激酶1(UNC51-like kinase 1,ULK1)蛋白表达水平的影响。(3)为了验证CaMKK2对肝细胞癌化疗药性的调控作用,将实验分为CaMKK2敲除+空载体组和CaMKK2敲除+CaMKK2载体组。采用Western blot检测CaMKK2的蛋白表达水平。采用CCK-8实验检测重新表达CaMKK2对CaMKK2敲除的细胞耐药性的影响。采用Western blot检测重新表达CaMKK2对CaMKK2敲除的细胞中AMPK、ULK1和LC3蛋白表达水平的影响。结果 (1)与亲本组相比,耐药组HCC细胞株中CaMKK2的总蛋白表达水平无显著变化(P>0.05),而CaMKK2的磷酸化水平显著升高(P<0.01)。(2)与对照组比较,CaMKK2敲除组细胞中CaMKK2表达水平显著减少(P<0.01)。与对照组比较,CaMKK2敲除组HCC耐药细胞对OXA的敏感性显著提高(P<0.05),OXA细胞凋亡率显著升高(P<0.01)。与对照组比较,CaMKK2敲除组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ显著降低,p62蛋白水平显著升高,p-AMPK/AMPK以及p-ULK1/ULK1显著降低(均P<0.01)。(3)与CaMKK2敲除+空载体组比较,CaMKK2敲除+CaMKK2载体组HCC耐药细胞对OXA的敏感性显著降低(P<0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、p-AMPK/AMPK和p-ULK1/ULK1显著升高(P<0.01)。结论 基因敲除CaMKK2有效逆转HCC化疗耐药性,其作用机制与调控AMPK/ULK1介导的自噬通路相关。

专职科研队伍在临床教学医院建设与发展中存在的问题及对策

结合专职科研队伍在临床教学医院建设和发展中所面临的问题,介绍了提升医院科研创新能力和学科建设有益的经验和方法。从临床教学医院的实际情况出发,对比分析了构建高水平专职科研队伍的必要性,并从岗位设置、人员结构、晋升考核、激励政策等方面提出了一系列有效的解决方案,以期为临床教学医院建立定位明确、层次清晰、结构合理、可持续发展的高水平专职科研队伍提供一些新思路和新途径。

慢性丙肝患者干扰素治疗并发重度血小板减少症的护理探讨

目的探讨慢性丙肝患者干扰素治疗并发重度血小板减少症的护理价值。方法选择2016年7月至2017年究对象,随机分为对照和观察两组,每组50例。对照组受试者接受常规化护理干预。观察组受试者开展针对性护理,分析结果。结果对照组受试者干预有效率为72.00%,观察组受试者该有效率为90.00%。相较于对照组,观察组受试者干预有效率明显更高P<0.05。相较于对照组,观察组受试者治疗期间内出现脱发、骨髓抑制、甲状腺功能异常、寒战发热等不良情况明显更低,P<0.05。结论对于丙肝合并重度血小板减少症患者,在其接受α-干扰素治疗期间内,应用优质化护理服务能够取得满意效果,此法安全性强,有效性高。

血清基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶-2水平对胃癌腹膜转移及预后的预测价值

目的:探析血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)水平对胃癌腹膜转移及预后的预测价值。方法:选取85例胃癌患者作为研究对象,依照临床诊断中是否腹膜转移分为转移组(n=32)和未转移组(n=53),另选取同期体检的40例健康人士作为对照组,对比三组受检者血清MMP-9和MMP-2表达水平,并分析血清MMP-9和MMP-2与胃癌转移的相关性,应用受试者特征曲线(ROC)分析血清MMP-9和MMP-2对胃癌转移的诊断价值。所有患者均采取胃癌常规手术治疗、放化疗或靶向治疗。治疗后对所有患者进行1年随访,将患者分为预后良好组(n=63)与预后不良组(n=22),对比预后良好组与预后不良组患者一般资料和血清MMP-9和MMP-2表达水平,并应用Logistic回归分析血清MMP-9和MMP-2对胃癌患者预后的预测价值。结果:三组受检者血清MMP-9和MMP-2表达水平对比,转移组明显高于未转移组和对照组(均P<0.05);Spearman相关分析结果显示:血清MMP-9和MMP-2与胃癌转移呈正相关(均P<0.05)。应用ROC曲线分析显示:MMP-9和MMP-2联合诊断的灵敏度与特异度明显高于MMP-9或MMP-2单一诊断(均P<0.05);预后良好组与预后不良组患者性别、年龄、肿瘤位置对比无统计学差异(均P>0.05),两组患者临床分期、腹膜转移、组织分化程度、血清MMP-9与MMP-2表达水平对比差异有统计学意义(均P<0.05);Logistic回归分析结果表明:腹膜转移、血清MMP-9与MMP-2为胃癌患者预后的独立影响因素(均P<0.05)。结论:MMP-9和MMP-2联合对胃癌腹膜转移有较高的诊断价值,且腹膜转移、血清MMP-9与MMP-2为胃癌患者预后的独立影响因素。临床上需针对腹膜转移、血清MMP-9与MMP-2水平升高的患者采取相关措施,减少预后不良情况发生。

手术时机选择在可手法复位的成人腹股沟嵌顿疝中的应用效果对照研究

比较手术时机的不同选择对可手法复位的成人腹股沟嵌顿疝的应用效果。方法:选取2014年6月—2021年6月武警陕西省总队医院收治的成人嵌顿性腹股沟疝符合手法复位条件,复位成功的80例患者作为研究对象,根据随机数字表法分为观察组和对照组,各40例。观察组在复位成功后1周,对照组在复位成功后48 h分别行疝环充填式无张力修补术,术后均随访12个月。比较两组术后疼痛情况、并发症发生情况。结果:术后第1天,两组视觉模拟评分(VAS)比较,差异无统计学意义(P=0.052);术后第2、3天,观察组VAS评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组术后并发症发生率低于对照组,差异有统计学意义(P=0.017)。结论:成人腹股沟嵌顿疝手法复位成功1周后手术能有效降低术后并发症发生率,有利于患者恢复。

高氧液的临床应用与护理

高氧液是用高氧医用液体治疗仪把氧溶解、活化在液体中形成的治疗液体,临床上广泛应用于呼吸衰竭、休克、一氧化碳中毒、心肺复苏等各种缺血、缺氧性疾病的治疗,同时对组织的缺血再灌注损伤亦有保护作用,此外对急性肺损伤也具有明显的保护作用。临床应用中应注意对患者做好心理护理,严格执行操作规程,保证溶氧、活化并注意其合理应用,正确处理高氧液治疗与常规氧疗的关系。

IGF-1R阻断剂抑制人肝癌细胞MHCC97-H增殖转移的研究

目的:探讨IGF-1R阻断剂在人肝癌细胞MHCC97-H增殖转移中的作用。方法:培养人肝癌细胞株MHCC97-H,预先给予IGF-1R阻断剂鬼臼苦素(picropodophyllin,PPP)10μmol/L干预1h,然后给予IGF-II 50ng/ml作用48h,观察各组细胞形态变化,噻唑兰(MTT)法分析细胞生长情况,Brdu法检测细胞增殖潜能,平板克隆实验观察并计算细胞克隆形成率,Real-time PCR及Western blot法观察细胞增殖核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶-9、-2(MMP-9、MMP-2)mRNA及蛋白表达情况,进一步分析细胞增殖转移情况。结果:IGF-1R阻断剂PPP可使MHCC97-H细胞形态发生明显改变;IGF-1R阻断剂PPP显著抑制MHCC97-H细胞存活率、细胞增殖及克隆形成(P<0.05);与对照组相比,IGF-II组MHCC97-H细胞中PCNA、MMP-9及MMP-2的mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05),而与IGF-II组相比,IGF-1R阻断剂PPP可明显抑制MHCC97-H细胞中PCNA、MMP-9及MMP-2的mRNA和蛋白表达(P<0.05)。结论:IGF-1R阻断剂通过抑制人肝癌细胞MHCC97-H生长增殖,下调PCNA、MMP-9及MMP-2的表达,发挥阻碍人肝癌细胞MHCC97-H增殖转移的功效。

Meta分析法在我国护理科研中的应用现状

目的了解我国护理科研中Meta分析法的应用现状。方法通过计算机检索中国学术期刊全文数据库1999年1月至2008年5月《中华护理杂志》、《护理学杂志》、《护理研究》等9种中国科技论文统计源期刊上刊登的有关Meta分析法的文章以分析其应用现状。结果检索到16篇相关文献,介绍Meta分析3篇,专科护理实践8篇(其中2篇文章为同一作者),护理教育1篇,基础护理研究4篇。结论Meta分析在护理科研中的应用处于初级阶段,许多护理领域Meta分析的应用仍是空白。护理工作者应该不断学习,提高自身素质和科研水平,应用Meta分析方法来汇总同类研究的不同研究结果,提高学科科研水平。

食管癌术前超声内镜T、N分期与术后病理T、N分期的比较

目的:探讨超声内镜(endoscopic ultrasonography,EUS)在食管癌术前TNM分期中的诊断价值。方法:回顾分析43例食管癌根治术患者术前超声内镜的T、N分期与术后病理学的T、N分期,以术后病理分期为金标准,比较两种分期的一致性。结果:食管癌术前EUS检查T、N分期的诊断准确率分别为82. 50%和47. 53%,其中T_1为83. 35%、T_2为82. 65%、T_3为82. 32%、T_4为84. 45%,N0为74. 63%、N_1为72. 75%、N_2为55. 35%、N_3为25. 27%。EUS的T分期与病理T分期结果一致性较好(Kappa=0. 724,P <0. 05); EUS的N_0、N_1分期与病理N_0、N_1分期结果一致性较好,而N_2、N_3的一致性则相对较差,但总体一致性比较仍具有统计学意义(Kappa=0. 408,P <0. 05)。结论:EUS判断食管癌T、N分期诊断准确率较高,可作为术前治疗方法选择的重要依据。

新媒体时代住院医师规范化培训方式的探讨

新媒体已成为现代教育不可缺少的重要组成部分,新媒体的广泛应用对规培学员的教育提出了新的挑战。文章探讨了新媒体对住院医师规范化培训教学模式的影响,分析了其对住院医师规范化培训的积极作用,指出新媒体技术从根本上丰富和改善了原有教学模式。

血管周围脂肪体积与代谢综合征组分及其冠状动脉损伤的关系

目的探讨腹型肥胖者血管周围脂肪(PVAT)体积与代谢综合征(MS)组分及其冠状动脉损伤的关系。方法入选明确有腹型肥胖并行选择性冠状动脉造影(CAG)的住院病人35例,包括CAG证实的冠心病(CHD)患者25例(腹型肥胖合并CHD组),冠状动脉造影正常者10例(单纯腹型肥胖组)。采用16层螺旋CT对35例入选者进行腹部CT容积扫描,测量血管周围脂肪体积,并测量受试者体重指数(BMI)、腰臀比(WHR)、血脂、血糖和超敏C反应蛋白(hs-CRP)等多项指标,进行统计分析。结果①随着MS组分个数的增加,血管周围脂肪指数(PVATI)显著增加(P<0.05);②总体腹型肥胖患者中,PVATI与TC、Apo-B、hs-CRP有显著相关性(P<0.05);③腹型肥胖合并CHD组PVATI与Apo-B正相关,单纯腹型肥胖组PVATI与HDL-C负相关;④PVATI在冠心病患病及冠脉损伤过程中的作用未见统计学意义,但可发现随着PVATI值的升高,其有增加冠心病患病危险性及Gensini积分的趋势,并与MS组分在冠脉损伤中有协同作用,其共同增加冠脉损伤程度。结论结果提示PVAT可能通过影响脂质代谢及参与炎症过程而在冠状动脉粥样硬化发生及发展过程中发挥作用。

优化运动技巧训练在恢复脑卒中患者手部精细功能中的作用

目的:研究优化运动技巧训练在恢复脑卒中患者手部精细功能中的作用。方法:选取我院康复科门诊和住院的脑卒中患者60例并随机分为两组,对照组采用传统康复治疗,研究组采用优化运动技巧训练,六周后对比两组治疗前后Fugl-Meyer评分、手部神经功能缺损评分以及简单上肢功能检查评分。结果:治疗后研究组的FMA评分为(38.13±7.94)分,STEF评分为(58.24±7.83),均分别高于对照组的(29.92±8.57)分,(49.87±8.31)分,差异有统计学意义(t=3.849,4.015;均P<0.001)。研究组手部神经功能缺损程度评分为(2.41±0.88)分,低于对照组的(3.51±0.75)分,差异有统计学意义(t=5.211,P<0.001)。结论:优化运动技巧训练能够有效改善脑卒中患者上肢偏瘫状况,更能促进脑卒中患者手部精细功能的恢复,值得临床推广应用。

IGF-Ⅱ促进人肝癌细胞MHCC97-H生长增殖作用的研究

目的:探讨IGF-Ⅱ在人肝癌细胞MHCC97-H生长增殖中的作用。方法:培养人肝癌细胞株MHCC97-H,IGF-Ⅱ(25,50,100ng/ml)作用于不同时间点(24、48、72h),观察各组细胞形态变化,噻唑兰(MTT)法分析细胞生长情况,Brdu法检测细胞增殖潜能,平板克隆实验观察并计算细胞克隆形成率,细胞免疫荧光及Western blot法观察细胞增殖核抗原(PCNA)表达,进一步分析细胞增殖情况。结果:IGF-Ⅱ可使MHCC97-H细胞形态发生一定改变;IGF-Ⅱ时间依赖性地增加MHCC9 7-H细胞存活率,但与对照组比较无显著差异(P>0.05);IGF-Ⅱ可促进MHCC97-H细胞增殖,但与对照组比较无显著差异(P>0.05);IGF-Ⅱ(50ng/ml)对MHCC97-H细胞的克隆形成有一定的促进作用,但与对照组比较无显著差异(P>0.05);与对照组相比,IGF-Ⅱ(50ng/ml)组,MHCC97-H细胞中PCNA荧光表达和蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论:IGF-Ⅱ有诱导人肝癌细胞MHCC97-H生长增殖的趋势,亦可促进PCNA表达上调。

IGF-Ⅱ对人肝癌细胞HepG2中抑癌基因p16和p53表达的影响

目的:观察胰岛素样生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)对人肝癌细胞HepG2中生物学表型变化及抑癌基因p16和p53表达的影响。方法:培养人肝癌细胞株HepG2,IGF-Ⅱ(25、50、100 ng/ml)作用于不同时间点(24、48、72 h),观察各组细胞生物学表型变化。IGF-Ⅱ(50 ng/ml)作用于HepG2 48 h后,分别采用Realtime PCR、Western blot及细胞免疫荧光法检测人肝癌细胞中p16和p53的表达情况,并进行定量分析。结果:IGF-Ⅱ诱导HepG2细胞形态发生一定改变;IGF-Ⅱ可增加HepG2细胞存活率及细胞增殖,但差异无统计学意义(P>0.05);IGF-Ⅱ(50 ng/ml)对HepG2细胞的克隆形成有一定的促进作用,但差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,IGF-Ⅱ组HepG2细胞中p16和p53 mRNA及蛋白表达量明显降低(P<0.05)。此外,p16和p53阳性表达主要位于细胞核。对照组、IGF-Ⅱ组HepG2细胞中p16荧光表达量分别为(100.00±11.55)%、(68.33±6.01)%,p53荧光表达量分别为(100.00±17.32)%、(57.67±10.11)%。与对照组相比,IGF-Ⅱ组HepG2细胞中p16及p53荧光表达量明显减弱(P<0.05)。结论:IGF-Ⅱ可通过诱导人肝癌细胞HepG2生物学表型的改变,下调抑癌基因p16和p53的mRNA及蛋白表达,继而发挥促进肝癌进展的作用。

将医患沟通评价体系纳入外科研究生规范化培训的措施研究

良好的医患沟通技巧和习惯的建立,是医患双方互相了解最为重要的基础。从研究生临床规范化培训阶段就开始实施和培养良好的医患沟通习惯和技巧十分必要。文章介绍了在外科研究生规范化培训过程中,培训机构应积极组织医患沟通实践活动,导师或带教教师在临床活动中应以身作则、真实示范医患沟通过程,同时应制定医患沟通效果的客观评价标准等措施,从而提高其医患沟通能力,有效降低医患纠纷风险。

人肝癌组织中S1P1和AT1R蛋白及mRNA表达的初步研究

目的:检测S1P1和AT1R蛋白及mRNA在人肝癌组织中的表达。方法:对18例人正常肝组织和23例人肝癌组织进行HE染色。采用免疫组化、Real-time PCR及Western blot方法检测人正常肝组织和人肝癌组织中S1P1及AT1R蛋白及mRNA表达。结果:S1P1及AT1R在人正常肝组织的细胞膜和细胞浆中可见弱的棕黄色颗粒沉着,肝癌组织的细胞膜和细胞浆中可见强的棕黄色颗粒沉着。与正常肝组织相比,肝癌组织中S1P1和AT1R蛋白及mRNA表达水平显著增高(P<0.05),两者呈现一致趋势。结论:S1P1及AT1R在人肝癌组织中的蛋白及mRNA表达水平呈一致升高的趋势,提示两种分子之间可能存在一定的相关性,为进一步研究其在肝癌发生发展中的关系提供了一丝新线索,也为临床上肝癌的诊断和防治提供一些新策略。

多层螺旋CT及后处理技术评价腹部及血管周围脂肪

背景:目前国内对腹部脂肪的测量多用单一层面的腹部脂肪面积来表示,而受脂肪分布不均一的影响,其并不能准确定量内脏脂肪含量。国内尚未见到使用多层螺旋CT测量血管周围脂肪体积的研究报道。目的:探讨多层螺旋CT及其后处理技术在评价腹部及血管周围脂肪中的价值。方法:采用16排多层螺旋CT对35例腹型肥胖患者进行腹部容积扫描,在GE(General Electric,通用电气公司)AW(Advantage Workstation)4.3工作站上使用容积再现技术观察腹部及血管周围脂肪的影像表现,并用Histogram软件测量腹部脂肪总体积、皮下脂肪体积、内脏脂肪体积、血管周围脂肪总体积,重复测量各项指标,比较2次测量体积值之间的差异。结果与结论:多层螺旋CT及其后处理技术能直观地显示腹部及血管周围脂肪的分布,且可以准确地测量所扫描范围内所含脂肪的体积及分布在不同部位的脂肪体积。比较2次CT后处理所得腹部及血管周围脂肪组织的体积差异,两次处理所得数值间差异无显著性意义(P>0.05)。提示多层螺旋CT及其后处理技术在评价腹部及血管周围脂肪分布与含量中是可行的,且具有可重复性。