miR-103b调控ING5表达对急性淋巴细胞白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨微小RNA-103b(miR-103b)对急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测37例ALL患者(ALL组)和16例血小板减少症患儿(对照组)骨髓单个核细胞中miR-103b表达水平。转染miR-103b抑制剂至Molt4细胞,RT-qPCR检测细胞中miR-103b水平验证转染效果,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测抑制miR-103b表达对Molt4细胞增殖的影响,流式细胞仪检测抑制miR-103b表达对Molt4细胞凋亡的影响,蛋白印迹(Western Blot)检测抑制miR-103b表达对Molt4细胞细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p21、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)和生长抑制蛋白家族成员5(ING5)表达的影响。双荧光素酶报告基因实验验证miR-103b与ING5调控关系。结果与对照组比较,ALL组骨髓中miR-103b表达水平升高(P<0.05)。抑制miR-103b表达可降低Molt4细胞存活率及Cyclin D1和Bcl-2蛋白表达水平(P<0.05),提高Molt4细胞凋亡率及P21和Bax蛋白表达水平(P<0.05)。miR-103b在Molt4细胞中靶向负调控ING5表达。抑制ING5表达可逆转抑制miR-103b表达对Molt4细胞增殖和凋亡的影响(P<0.05)。结论miR-103b通过上调ING5表达抑制ALL细胞增殖,并诱导其凋亡。

PCA3调控miR-185对霍奇金淋巴瘤细胞L428增殖和凋亡的影响

目的探讨PCA3对霍奇金淋巴瘤细胞L428增殖和凋亡的影响及可能机制。方法收集39例霍奇金淋巴瘤患者淋巴瘤组织和正常瘤旁组织,RT-qPCR检测组织中PCA3和miR-185表达水平。体外培养淋巴瘤L428细胞,分为si-NC组、si-PCA3组、si-PCA3+NC组、si-PCA3+miR-185 inhibitor组,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,RT-qPCR法检测PCA3和miR-185表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证PCA3和miR-185的调控关系。结果淋巴瘤组织中PCA3的表达升高,miR-185的表达降低(P<0.05);转染si-PCA3可抑制细胞增殖,阻滞细胞周期,促进细胞凋亡。PCA3靶向负调控miR-185表达。共转染si-PCA3、miR-185 inhibitor可降低转染si-PCA3对细胞增殖、细胞周期、凋亡的作用。结论干扰PCA3表达可靶向负调控miR-185抑制淋巴瘤细胞L428增殖,并促进L428细胞凋亡。