牙周炎患牙位点保存术的临床疗效观察

目的观察位点保存术在牙周炎患牙拔除后牙槽骨量改变的临床效果。方法纳入门诊确诊为牙周炎不能保留的患牙85颗,随机分为2组:1常规拔牙组,40颗患牙,采用传统的牙拔除术;2位点保存组,45颗患牙,经微创拔牙后牙槽窝同期植入Bio-OSS胶原,覆盖Bio-Gide胶原膜并且严密缝合。对比两组患牙的临床疗效,并分别于术前术后行X线和锥形束CT(cone beam CT,CBCT)影像学检查,评估2组牙槽骨量变化情况及比较牙槽骨的密度情况。结果两组术区均无感染,愈合良好,牙龈质地坚韧,颜色粉红。X线和CBCT结果显示,常规拔牙组牙槽骨水平和垂直吸收增加,位点保存组牙槽骨垂直和水平吸收量显著低于常规拔牙组(P<0.05),术后6月CBCT显示位点保存组新生骨密度显著高于常规拔牙组。结论位点保存术可有效预防及减少牙周炎患牙拔除后牙槽骨的吸收,改善牙槽骨高度和宽度,成骨效果良好,有利于满足后期的修复需要。

联合应用柚皮苷及黄芩苷对人牙周膜细胞生物学活性的影响

目的:观察中药有效成分柚皮苷和黄芩苷联合应用对人牙周膜细胞(hPDLCs)生物学活性的作用。方法:用酶结合组织块法原代培养hPDLCs;通过MTT法、酶联免疫吸附法、诱导矿化实验测定二者配比之后对hPDLCs增殖、Ⅰ型胶原蛋白的表达、碱性磷酸酶(ALP)活性及钙化结节形成的影响。结果:1.0 mg/L的柚皮苷与0.1 mg/L黄芩苷配伍对细胞增殖、Ⅰ型胶原蛋白表达、ALP活性以及矿化的促进作用明显。结论:柚皮苷与黄芩苷配伍组合可增强hPDLCs的成骨能力。

黄芩苷对人牙周膜细胞功能活性调节的实验研究

目的:通过观察中药黄芩的有效成份黄芩苷对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)增殖、矿化成骨等功能活性的影响,研究黄芩对人牙周膜细胞的调节作用。方法:采用组织贴块联合胶原酶消化的方法,体外分离、培养、纯化和鉴定hPDLCs后,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、酶联免疫吸附、半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法,检测不同浓度的黄芩苷(10、1.0、0.1、0.01mg/L)对hPDLCs增殖、矿化成骨、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、细胞核因子-κB受体活化因子配基(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)mRNA表达等方面的影响。结果:0.1mg/L的黄芩苷对于增加人牙周膜细胞的增殖活性、碱性磷酸酶活性和Ⅰ型胶原蛋白的表达作用最强;适宜浓度的黄芩苷可以降低RANKL/OPGmRNA比值。结论:黄芩苷能促进hPDLCs的增殖和成骨作用,该作用可能与RANKL/OPG信号通路相关。

客观结构化临床考试应用于牙周临床出科考核的探索

为改进我院牙周病学临床教学，我院牙周黏膜科首次引入客观结构化临床考试（objective structured clinical examination，OSCE）应用于牙周病学出科考核。通过设立OSCE考站、建立题库、培训标准化病人（SP），对考生的知识、技能、态度进行全面评估。较之于传统考核，本次考核较好地评价了考生在临床接诊、病史采集、治疗计划制定等方面的能力。本次考核合格率86.4%（19/22），良好率36.4%（8/22），优秀率9.1%（2/22）。之后的问卷调查显示，大部分考生认为OSCE有助于促进理论知识的学习（87.5%，14/16），有利于自身将学到的知识和技能转化为职业能力（87.5%，14/16）。

BMP-2促进人炎症牙髓干细胞骨向诱导分化的体外研究

目的:研究人骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein,BMP-2)对人炎症牙髓组织来源的牙髓干细胞(dental pulp stem cells from inflamed pulps,DPSCs-IPs)体外骨向诱导分化的影响。方法:取第三代DPSCs-IPs,按是否于培养基中加入BMP-2分成:BMP-2+DPSCs-IPs组(实验组)和DPSCs-IPs组(对照组)。无成骨诱导条件培养1周后,对各组分泌的胶原基质行Trichrome染色,观察并比较实验组和对照组之间的骨向诱导分化情况;实时定量RT-PCR检测二者的Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,COL-Ⅰ)mRNA表达情况。在成骨诱导条件下,培养3周后对各组分泌的钙化基质行Von Kossa染色,通过实时定量RT-PCR检测转录因子及成骨相关基因的表达。结果:无成骨诱导培养1周后,实验组DPSCs-IPs分泌的胶原基质Trichrome染色较对照组深,COL-ⅠmRNA的表达水平显著上调(P<0.05),说明BMP-2可诱导DPSCs-IPs沉积更多的胶原基质;成骨诱导培养3周后,相对于对照组,实验组DPSCs-IPs沉积了更多的钙化基质,Nanog、八聚体结合转录因子4(octamer-binding transcription factor 4,Oct4)、性别决定区因子(SRY-related high-mobility group box 2,Sox2)等转录因子表达升高,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP),牙骨质蛋白1(cementum protein 1,CEMP-1)、COL-Ⅰ等成骨相关基因表达水平显著上调(P<0.05)。结论:BMP-2在成骨诱导条件下可促进DPSCs-IPs进行体外骨向诱导分化。

黄芩苷和牛血清白蛋白双缓释制剂的制备及释药性能检测

目的:将黄芩苷和牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)载入壳聚糖温敏凝胶,构建双缓释体系,检测凝胶对药物的体外释放情况。方法:采用乳化缩聚法制备黄芩苷-明胶微球(gelatin microspheres,GMS);用不同配比的壳聚糖溶液和β-甘油磷酸钠(β-glycerophosphate,β-GP)溶液制备壳聚糖温敏凝胶,观察在37℃的成胶情况,选择最佳配比;在此基础上,将不同浓度的黄芩苷-GMS与BSA共混于壳聚糖凝胶溶液,测定载药后的成胶情况及黄芩苷和BSA的体外释放情况。结果:成功制备了黄芩苷-GMS,载药率5.62%,包封率72.05%;1.8%壳聚糖溶液与9%的β-GP混合10min后可获得状态良好的凝胶;加载两种药物后的凝胶溶液相转变时间未发生改变;30d时低浓度组累积释放了63.79%,两个较高浓度组分别释放了74.86%、77.63%。结论:壳聚糖温敏凝胶可以同时负载黄芩苷-GMS和BSA两种药物,在室温下呈溶液状态,37℃下经过10min可转变成半固体凝胶,在体外释药可达30d。黄芩苷和牛血清白蛋白双缓释制剂的制备和释药性能检测为牙周组织修复再生药物的研制提供了基础。

改良隧道技术治疗牙龈退缩合并非龋性牙颈部缺损的临床研究

目的探讨改良隧道技术(MTUN)治疗牙龈退缩合并非龋性牙颈部缺损(NCCL)的临床疗效。方法纳入42颗Miller Ⅰ度牙龈退缩患牙,根据是否伴有NCCL分为NCCL组和对照组,均采用MTUN联合上皮下结缔组织移植进行治疗。记录患牙术前及术后3、6月的牙周探诊深度(PD)、牙龈退缩高度(GRH)、牙龈退缩宽度(GRW)、附着龈宽度(AGW)以及临床附着丧失(CAL),并计算术后6月的平均根面覆盖率(MRC)。使用美学评分系统记录美学评分。结果 2组患牙术后GRH、GRW、CAL较术前相比均明显减小,PD、AGW未发现明显改变。NCCL组MRC为63.40%±28.02%,对照组MRC为67.00%±21.72%,二者间差异无统计学意义(P=0.815)。2组间术后美学评分无统计学意义。结论 MTUN能够有效改善牙龈退缩问题,较浅NCCL(≤1 mm)的存在不会影响MTUN的手术疗效。

整合素α5β1在苯妥英钠促进大鼠PDLSCs和BMMSCs黏附于牙骨质中的作用

目的探讨在苯妥英钠(Phenytoin,PHT)促进大鼠牙周膜干细胞(Rat periodontal ligament stem cells,rPDLSCs)、大鼠骨髓间充质干细胞(Rat Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,rBMMSCs)黏附于牙骨质过程中,整合素α5β1(Integrinα5β1)起到的作用。方法提取大鼠BMMSCs和PDLSCs,培养并纯化。通过细胞鉴定后,将获得的两种细胞各分为4组:40 mg/L PHT处理组、40 mg/L PHT+整合素α5抗体处理组、40 mg/L PHT+整合素β1抗体处理组、PBS处理组,每组细胞放入置有牙骨质片的96孔板处理4 h后,检测黏附于牙骨质片上的细胞量并做以比较。最后,利用qRT-PCR和Western blot检测40 mg/L PHT组与对照组细胞的整合素α5、β1亚基的mRNA与蛋白表达量。结果40 mg/L PHT可促进rBMMSCs及rPDLSCs黏附于牙骨质片,加入整合素α5、β1抗体后,均明显抑制了40 mg/L PHT对rBMMSCs、rPDLSCs黏附于牙骨质的促进作用(P<0.01)。qRT-PCR、Western-blot结果显示PHT处理组的整合素α5、β1亚基表达量高于空白对照组(P<0.05)。结论40 mg/L PHT能促进rBMMSCs、rPDLSCs黏附于牙骨质,该作用与整合素α5β1的表达上调密切相关。