肿瘤相关巨噬细胞对乳腺癌MCF-7细胞侵袭迁移能力的影响

目的观察肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)对乳腺癌MCF-7细胞侵袭迁移能力的影响,并初步探索其机制。方法选取人单核细胞系THP-1,体外经佛波酯(PMA)、人白细胞介素-4(IL-4)诱导获得TAMs细胞模型;通过流式细胞术(FCM)检测TAMs表面标记分子CD206表达水平;MCF-7细胞与TAMs共培养后,光学倒置显微镜观察细胞形态;利用Transwell小室分别检测MCF-7细胞的侵袭和迁移能力;蛋白印记法(Western blotting)检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、闭合蛋白(Occludin)及波形纤维蛋白(Vimentin)的表达;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养上清中转化生长因子-β(TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和血管内皮生长因子(VEGF)的浓度。结果与TAMs共培养后的MCF-7细胞伪足增多,细胞排列更松散。通过FCM检测到TAMs表面标记物CD206显著表达。Transwell实验结果显示,与TAMs共培养后的MCF-7细胞迁移能力增强,对照组穿过Transwell小室细胞数为(54±2)个,实验组为(110±6)个,差异有统计学意义(P<0.001);其侵袭能力显著增强,对照组穿透基质膜的细胞数为(41±1)个,实验组为(77±4)个,差异亦有统计学意义(P<0.001)。Western blotting检测结果显示,MCF-7细胞与TAMs共培养后,E-cadherin、Occludin蛋白表达较对照组显著降低,而N-cadherin和Vimentin蛋白表达量显著升高(P均<0.05)。ELISA法检测TAMs与MCF-7细胞共培养上清中的TGF-β、TNF-α、VEGF浓度均较对照组升高(P均<0.05)。结论TAMs与乳腺癌MCF-7细胞的浸润转移过程密切相关,TAMs可通过促进MCF-7细胞发生上皮间质转化(EMT)进而促进乳腺癌的浸润转移。