先天性马蹄内翻足诱导多能干细胞建立及鉴定

目的 以尿液脱落细胞为来源,构建先天性马蹄内翻足患者特异的诱导多能干细胞（iPSCs）.方法 收集先天性马蹄内翻足患者尿液180 ml,通过离心,分离出尿液脱落细胞并进行培养,然后使用病毒系统对该细胞进行重编程,获得状态良好的细胞并进行鉴定,鉴定方法包括多能性基因检测、碱性磷酸酶（ALP）染色、核型鉴定、流式细胞仪（FACS）检测表面标志物、拟胚体（EB）悬浮球实验和甲基化检测等多种检测手段.结果 获得的细胞多能性基因表达与人胚胎干细胞H9相似,ALP染色呈强阳性,核型正常,多能性标记Tra-1-60阳性率为84.1％,能形成大量EB悬浮球,细胞在Nanog同源框（NANOG）和有机阳离子/肉毒碱运输蛋白4（Oct4）基因启动子区域的甲基化基本消失,证实获得的细胞具有多能性干细胞的所有特征,确定为iPSCs.结论 本实验成功构建了先天性马蹄内翻足患者特异iPSCs,为明晰先天性马蹄内翻足的演变特征提供了疾病模型.