PPARδ激动剂对非酒精性脂肪肝大鼠胰岛素抵抗作用的研究

目的研究PPARδ激动剂(GW501516)对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠胰岛素抵抗的影响及特点。方法 47只SD雄性大鼠随机分为造模组(n=37)与正常对照组(n=10),分别给予高脂饮食和普通饮食喂养12周后,造模组随机处死3只大鼠,经肝脏病理HE染色观察造模成功。余34只造模成功大鼠随机分为:模型组(n=10)、GW501516治疗组(n=12),吡格列酮治疗组(n=12)。治疗2周、4周后分别处死各组半数大鼠。测体质量、肝重、体长并计算肝指数及体质量指数(BMI);采集血清检测空腹血糖、肝功、血脂,放免法测空腹胰岛素,计算胰岛素敏感指数HOMA-IR;行肝组织油红O染色、HE染色;ELISA法测血清IGF-1;免疫组化检测SREBP-1c及GLUT-2表达情况。结果 (1)与模型组相比,GW501516治疗组肝湿重、体质量、肝指数及BMI均下降在治疗4周后更为明显(P<0.05);治疗4周后,GW501516组体质量和BMI较吡格列酮治疗组低(P<0.05)。(2)与模型组相比,GW501516治疗组糖代谢、脂代谢及肝功均明显改善(P<0.05);治疗4周后,GW501516组糖代谢、脂代谢及肝功改善较格列酮治疗组更为明显(P<0.05)。(3)与模型组相比,GW501516治疗2周及4周后肝脏脂肪变及炎症均明显减轻;治疗4周后,GW501516组肝脏组织改善程度较吡格列酮治疗组更明显。(4)与模型组相比,GW501516治疗组血清IGF-1水平升高、肝脏SREBP-1c表达下调、GLUT-2表达上调(P<0.05);治疗4周后,与吡格列酮治疗组相比,GW501516组IGF-1及GLUT-2升高更明显,SREBP-1c降低更明显(P<0.05)。结论 PPARδ激动剂GW501516可通过上调IGF-1及GLUT-2、下调SREBP-1c改善NAFLD大鼠的胰岛素抵抗及减轻肝脏脂质沉积,且改善作用明显优于PPARγ激动剂(吡格列酮)。

miR-655-3p对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨miR-655-3p对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法采用qRT-PCR检测miR-655-3p在GES-1、MKN-28、SGC-7901和BGC-823细胞系中的表达水平;qRT-PCR证实转染agomiR-655-3p后miR-655-3p的过表达水平;MTT实验检测过表达miR-655-3p对胃癌细胞增殖的影响;Transwell实验检测过表达miR-655-3p对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响。结果与GES-1细胞相比,miR-655-3p在MKN-28、SGC-7901和BGC-823细胞系中的表达均降低(P<0.05),其中低分化的BGC-823细胞系表达最低;转染agomiR-655-3p将BGC-823细胞中成熟miR-655-3p的表达水平提高了35.3倍(P<0.05);过表达miR-655-3p可抑制BGC-823细胞增殖(P<0.05);过表达miR-655-3p降低了BGC-823细胞的迁移和侵袭能力,每个视野迁移细胞数由223±15降低至117±9(P<0.05),侵袭细胞数由124±14降低至61±6(P<0.05)。结论过表达miR-655-3p可抑制BGC-823胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

ARHⅠ对胃癌细胞TRAIL凋亡敏感性的影响

目的探讨ARHⅠ对TRAIL诱导胃癌细胞BGC-823和MKN-28凋亡敏感性的影响。方法以稳定转染p IRES2-EGFP、p IRES2-EGFP-ARHⅠ质粒载体的BGC-823胃癌细胞系和稳定转染p U6、p U6-si ARHⅠ质粒载体的MKN-28胃癌细胞系为模型,以200 ng/ml的重组人可溶性TRAIL作用于细胞24 h,采用流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测Bax、Bcl-2、活化caspase-3的蛋白表达。结果过表达ARHⅠ显著增强了TRAIL诱导的BGC-823胃癌细胞凋亡,凋亡率由(6.85±1.77)%增加至(28.14±3.29)%(P<0.01),而下调ARHⅠ表达显著抑制了TRAIL诱导的MKN-28胃癌细胞凋亡,凋亡率由(35.02±3.89)%降低至(16.27±2.64)%(P<0.01);过表达ARHⅠ能够提高Bax表达2.37±0.18倍(P<0.01)、降低Bcl-2表达0.54±0.06倍(P<0.01),而下调ARHⅠ表达能够降低Bax表达0.45±0.08倍(P<0.01)、提高Bcl-2表达1.92±0.15倍(P<0.01)。结论调控ARHⅠ表达能够影响胃癌细胞BGC-823和MKN-28对TRAIL诱导凋亡的敏感性。