口腔材料学教法改革的探索与思考

口腔材料学是口腔医学专业的一门基础课程,对培养学生的临床工作与科学研究能力发挥着重要的指导作用。由于课程具有多学科交叉性、基础原理复杂性、涉及材料广泛性等特点,使教学过程中存在学生学习兴趣低、知识掌握程度差等问题。本文通过实施医文融合的“贴心课堂”、线上教学的“前课堂”、线下教学的“动课堂”、科研融入实验教学的“自主课堂”等改革方法,改善了学生对口腔材料学的学习积极性和主动性,提高了学生解决分析问题的能力,实现了创新型医学人才的培养目标。

西安市口腔医生使用医疗社交媒体的现状调查

目的了解西安市口腔医生对医疗社交媒体的认知情况和使用现状,分析医疗社交媒体的优缺点及影响因素,为推动医疗社交媒体在口腔医疗领域的广泛使用奠定基础。方法针对使用情况设计调查问卷,于2017年7-8月份分别在西安市20家口腔医疗机构对177名在岗口腔医生进行问卷调查(有效问卷172份),并对结果进行统计分析。结果医疗社交媒体认知率为69.2%,使用率为39.0%,使用频率以一周数次最多见(13.4%)。使用目的集中在查阅资料(25.6%)、与同行交流心得(22.7%)、医患沟通(21.5%)等方面。交流内容不可靠(15.1%)、泄露个人隐私(15.1%)等问题的选项占比较高。调查对象对社交媒体满意度为20.9%。结论西安市口腔医生对医疗社交媒体的认知情况良好,但使用度不高。使用社交媒体的目的更倾向于专业交流和学习。各媒体安全性、专业性、信息质量等方面存在的问题是制约医疗社交媒体发展和应用的重要因素。

补骨脂酚通过抑制SIRT3信号抵抗口腔鳞状细胞癌的机制研究

目的观察补骨脂酚(BAK)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)的影响并探究SIRT3是否介导BAK抗癌作用。方法OSCC细胞分组如下:control组,BAK组,SIRT3-AV+BAK组和SIRT3-AV组。利用腺病毒(AV)感染方法提高OSCC细胞内SIRT3的表达水平。BAK处理正常OSCC细胞和SIRT3高表达OSCC细胞24 h后,检测细胞活力、活性氧(ROS)产量、凋亡率、迁移能力以及SIRT3通路蛋白(SIRT3、Ac-SOD2和SOD2)、Bax、Bcl-2和cleaved Caspase-3的蛋白表达水平。结果与control组相比,SIRT3-AV组OSCC细胞SIRT3表达量明显增加,而SOD2的乙酰化水平明显降低(P<0.05),其余指标无明显变化(P>0.05)。与control组相比,BAK组OSCC细胞内SOD2乙酰化水平、Bax和cleaved Caspase 3的表达量、ROS产量、凋亡率明显增加,而细胞迁移能力、SIRT3和Bcl-2的表达量明显下降(均P<0.05)。与BAK组相比,SIRT3-AV+BAK组OSCC细胞内SOD2乙酰化水平、Bax和cleaved Caspase 3的表达量、ROS产量、凋亡率明显降低,而细胞迁移能力、SIRT3和Bcl-2的表达量明显增加(P<0.05)。结论补骨脂酚通过抑制SIRT3通路,促进ROS产生,诱导细胞凋亡,抑制细胞增殖和迁移,从而发挥抗口腔鳞状细胞癌作用。

不同细胞标记物对大鼠牙髓干细胞体外标记的生物学影响

目的通过体外实验,对比氯甲基苯甲酰氨(CM-DiI)和4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)这两种不同细胞标记物对大鼠牙髓干细胞生物学性能的影响,为需要进行细胞标记的实验研究提供理论参考依据。方法采用酶解组织块法培养大鼠牙髓细胞并对其进行纯化,通过免疫组化鉴定细胞来源,并进行细胞体外多向诱导分化能力实验。利用5μg/ml浓度的CM-DiI和DAPI对第3代大鼠牙髓干细胞进行体外标记,通过比较细胞增殖情况以及细胞乳酸脱氢酶释放率,评价标记后细胞生物学状态。结果利用酶解组织块法可获得克隆集落状生长的大鼠牙髓细胞。免疫组化法确定细胞为间充质来源,且具有向脂肪细胞、成骨细胞以及成牙本质细胞分化的潜能。CM-DiI标记后细胞膜及核膜均呈现出红色荧光,DAPI则细胞核蓝染。与未进行细胞标记比较,CM-DiI和DAPI标记后细胞形态、上清液乳酸脱氢酶含量及CCK-8值均无明显变化,两组差异无统计学意义。结论CM-DiI和DAPI操作简便、染色速度快,都可用于标记大鼠牙髓干细胞。相较DAPI而言,CM-DiI对大鼠牙髓干细胞的细胞毒性更小。

氩气源低温常压等离子体改善牙本质⁃自酸蚀粘接界面粘接效果的体外研究

目的探讨氩气源低温常压等离子体(nonthermal argonatmos phericpressure plasma,NTAPP)射流处理不同时间对牙本质⁃自酸蚀粘接剂粘接界面粘接强度及牙本质润湿性的影响。方法使用NTAPP发生装置(放电输入功率:9 W,氩气气体流量:5 L/min),分别处理5组(n=6)人牙本质试件(0、5、10、15、20 s)后,使用S3 Bond粘接剂处理牙面,制作微拉伸粘接试件并测量各组即刻粘接强度。同样参数、同样分组条件下处理牙本质面后测量牙本质表面接触角。结果随着NTAPP处理时间延长,牙本质即刻粘接强度呈显著上升趋势,以处理15 s组粘接强度最高(31.82±2.80)MPa。随着NTAPP处理时间延长,与阴性对照组牙本质表面接触角(75.57°±1.45°)相比,各实验组牙本质表面接触角均显著减小,以处理15 s组牙本质表面接触角(33.56°±2.14°)最低,湿润性最大。结论NTAPP处理可显著增加牙本质表面湿润性,提高与自酸蚀粘接剂粘接界面的粘接强度,这与处理时间相关。

低温大气压等离子体对脱矿牙本质胶原保护作用的体外研究

目的该研究拟观测低温常压等离子体射流处理改善脱矿牙本质胶原纤维交联度及耐降解性的效果。方法离体牙截取冠部牙本质磨粉,磷酸完全脱矿后冻干,空白对照组不做任何处理,其他2组分别用NTAPP射流处理15 s,5%的戊二醛浸泡120 s,采用茚三酮法检测各组游离-NH2含量,计算各组交联度。获取中层牙本质片,酸蚀后经NTAPP处理0、15 s后,分别浸泡于5%NaClO溶液中0、30、60、120 s,扫描电镜观察各组脱矿牙本质胶原的降解情况。对各组胶原交联度进行统计分析。结果NTAPP处理组与戊二醛组间交联度无显著性差异。扫描电镜观察脱矿胶原显示,随着NaClO溶液处理时间延长,各组牙本质胶原均呈现不同程度降解,对照组120 s胶原完全消失,但NTAPP组仍可见胶原纤维残留;经NaClO浸泡30 s后,NTAPP组胶原纤维网结构完整。结论采用合适的参数及处理时间,NTAPP可以增加牙本质胶原交联度,提高胶原纤维的耐降解性,起到增韧胶原强度的作用。

牙齿移动对静止期牙周病动物模型牙槽骨的影响

目的观察牙齿移动对静止期牙周病动物模型牙槽骨骨微结构及炎症反应的影响。方法SD大鼠分为对照组(24只)和实验组(48只)。随机对实验组半数大鼠行牙周基础治疗(24只),所有实验组大鼠近中移动下颌右侧第一磨牙,分为牙周病组、牙周病加力组、静止期牙周病组(牙周治疗大鼠左侧)和静止期牙周病加力组(牙周治疗大鼠右侧)。各组于加力0,7,14,21 d取材,行micro-CT扫描、免疫荧光染色。结果加力0,7,14,21 d,静止期牙周病加力组骨密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb·Th)高于牙周病加力组,骨小梁分离距离(Tb·Sp)低于牙周病加力组(P<0.05);加力14 d和21 d,静止期牙周病加力组骨小梁数量(Tb·N)低于牙周病加力组(P<0.05)。静止期牙周病加力组BMD、BV/TV、Tb·Th在加力14 d降至最低,Tb·N、Tb·Sp升至最高。加力0,7,21 d,静止期牙周病加力组IL-6表达的平均光密度值(AO)低于牙周病加力组(P<0.05)。结论静止期牙周病动物模型牙齿移动初期牙周炎症加重,牙槽骨强度下降,加力14 d时牙槽骨吸收最活跃,但在整个牙齿移动过程中牙周组织的破坏程度较牙周病动物模型减轻。

氦气源低温大气压等离子体射流处理对离体牙本质黏接强度的影响

目的研究氦气源低温大气压等离子体(non-thermal atmospheric pressure plasma,NTAPP)射流处理对牙本质接触角及黏接强度的影响。方法将10颗离体牙制备成30片1.5 mm厚的牙本质片,打磨清洗后NTAPP射流分别处理0(对照组),5,10,15,20 s,测量牙本质接触角。30颗离体牙去除牙合面牙釉质,暴露的牙本质打磨清洗后酸蚀15 s,NTAPP射流分别处理0(对照组),5,10,15,20 s,常规黏接进行微拉伸测试。对各处理组接触角及黏接强度进行统计分析。结果对照组牙本质接触角均值为75.57°,经NTAPP处理后各组接触角均显著降低(P<0.05),各NTAPP处理组间差异无统计学意义(P>0.05)。NTAPP射流处理0,5,10,15,20 s黏接强度分别为(36.38±3.28) MPa、(39.82±3.57) MPa、(41.85±1.88) MPa、(45.79±4.2) MPa、(33.51±2.59) MPa;与NTAPP处理0 s相比,处理10和15 s即刻牙本质黏接强度显著增加(P<0.05)。结论 NTAPP处理可以显著改善牙本质表面的接触角及即刻牙本质黏接强度,黏接强度的大小与处理时间密切相关。

GO-PEEK复合材料的骨诱导功能

目的通过3D打印聚醚醚酮(polyetheretherketone,PEEK)仿下颌骨多孔支架,利用氧化石墨烯(graphene oxide,GO)修饰表面,形成一种新型的具有良好抗菌性能及成骨能力的下颌骨缺损修复材料,最终拓宽骨组织工程在颌面部骨缺损领域的应用。方法3D打印PEEK多孔支架,经过硫化(S)、氧化石墨烯(GO)处理后制备GO-PEEK复合支架。提取SD大鼠下颌骨骨髓间充质细胞分别与PEEK、S-PEEK、GO-PEEK支架共培养。实验分为:空白对照组(骨髓间充质细胞)、PEEK组(骨髓间充质细胞+PEEK支架)、S-PEEK组(骨髓间充质细胞+硫化PEEK支架)、GO-PEEK组(骨髓间充质细胞+氧化石墨烯PEEK支架)。CCK-8检测细胞生物学活性,判断不同支架对下颌骨间充质细胞生存状态的影响。RT-PCR检测在PEEK组、硫化PEEK组、氧化石墨烯PEEK组中与成骨相关基因RUNX2、COL1A1、OCN的表达差异。结果CCK-8检测结果提示PEEK抑制间充质干细胞的增殖(P<0.01)。S-PEEK支架表面残留的化学物质,显著降低间充质干细胞生物学活性(P<0.01)。GO-PEEK复合支架对间充质细胞增殖有促进作用(P<0.01)。RT-PCR结果提示与PEEK、S-PEEK支架相比,GO-PEEK复合支架可上调成骨相关基因的表达且差异具有统计学意义(P<0.01)。结论GO-PEEK复合材料,在一定程度上改善了PEEK支架性能及S-PEEK支架细胞毒性作用,对间充质干细胞的成骨有一定促进作用。

TNF-α刺激下长链非编码RNA H19对人牙周膜干细胞骨向分化的调控作用

目的研究TNF-α刺激下人牙周膜干细胞骨向分化过程中长链非编码RNA的表达情况,探索长链非编码RNA H19在其中发挥的功能。方法选用人牙周膜干细胞作为研究对象,采用流式细胞术检测人牙周膜细胞表面分子STRO-1、CD105、CD90、CD31、CD14、CD45的表达情况。实验分为正常对照组(正常培养液培养)和TNF-α处理组(含10 ng/ml TNF-α的培养液培养),并对两组细胞进行成骨诱导,7 d后碱性磷酸酶(ALP)染色观察细胞ALP表达的情况,real time PCR检测成骨相关基因Runx-2、OPN、ALP以及H19、TCF1 mRNA的表达情况。正常牙周膜细胞经过TNF-α处理后,实验分为对照组、空转组和转染组(转染慢病毒载体H19)。real time PCR检测H19转染效率以及转染后成骨相关基因Runx-2、OPN、ALP和TCF1 mRNA的水平。结果流式细胞仪检测结果显示:牙周膜干细胞表型分子STRO-1细胞百分比为34.3%,CD105细胞百分比为98.0%,CD90细胞百分比为98.0%,CD31细胞百分比为1.6%,CD14细胞百分比为2.4%,CD45细胞百分比为1.4%。牙周膜干细胞成骨诱导7 d后,TNF-α处理组较正常对照组碱性磷酸酶染色变浅。real time PCR检测结果表明,成骨诱导后TNF-α处理组Runx-2、OPN、ALP mRNA较正常对照组的表达降低(P<0.05),H19、TCF1的mRNA表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。慢病毒转染H19后,转染组H19 mRNA表达量明显较对照组和空转组升高,Runx-2、OPN、ALP、TCF1 mRNA表达量上调(P<0.05)。结论TNF-α可能通过影响H19的功能抑制人牙周膜干细胞的骨向分化。

人参皂苷Rg1抑制舌鳞状细胞癌增殖和转移能力的作用机制研究

目的研究人参皂苷Rg1(GS-Rg1)抑制舌鳞状细胞癌(TSCC)增殖和转移能力的作用,以及相关的作用机制。方法用1.25、2.5、5.0和10.0μmol·L^(-1)的GS-Rg1处理TSCC细胞CAL-2748 h后,用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测不同浓度细胞的增殖能力,并计算GS-Rg1作用CAL-2748 h的IC_(50)值。TSCC细胞CAL-27分为对照组和GS-Rg1组,分别用0.9%NaCl和IC_(50)浓度的GS-Rg1处理对照组和GS-Rg1组48 h。用流式细胞仪检测各组细胞周期分布情况,用Transwell实验检测各组细胞转移能力。构建TOP/FOP Flash质粒,转染对照组和GS-Rg1组,用荧光素酶实验检测GS-Rg1对TSCC细胞CAL-27中wnt/β-连环蛋白(wnt/β-catenin)信号通路活性的影响。用wnt/β-catenin通路抑制药XAV939处理GS-Rg1组细胞(XAV939+GS-Rg1组),及wnt/β-catenin通路激活药HLY78处理GS-Rg1组细胞(HLY78+GS-Rg1组),检测GS-Rg1组、XAV939+GS-Rg1组和HLY78+GS-Rg1组细胞中wnt/β-catenin信号通路活性、细胞增殖能力、细胞周期分布以及转移能力变化,用蛋白质印迹法检测各组细胞中wnt/β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin及其下游细胞周期相关分子细胞性骨髓细胞瘤原癌基因(cMYC),细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)和细胞周期蛋白D1(cyclinD1)及转移相关蛋白钙黏蛋白E(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达。结果GS-Rg1显著抑制TSCC细胞CAL-27的增殖能力(P<0.05),GS-Rg1作用CAL-2748 h的IC_(50)值为(5.46±1.58)μmol·L^(-1)。对照组和GS-Rg1组G0/G1分别为(60.65±2.16)%和(71.20±2.38)%,细胞穿膜数分别为(87.33±7.51)和(50.67±3.21)个,荧光素酶活性分别为1.00±0.02和0.35±0.06,在统计学上差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与GS-Rg1组相比,XAV939+GS-Rg1组细胞中wnt/β-catenin信号通路活性、细胞增殖能力和转移能力均显著降低(均P<0.05),G0/G1期细胞增多(P<0.05),β-catenin、cMYC、CDK4、cyclinD1、E-cadherin、MMP-2蛋白表达均显著降低(均P<0.05),N-cadherin蛋白表达增加,而HLY78+GS-Rg1组细胞结果相反。结论GS-Rg1下调wnt/β-catenin信号通路抑制TSCC细胞增殖和转移能力。

氦气源低温常压等离子体处理对牙本质表面性能影响的体外研究

目的探讨不同参数设定下氦气源低温常压等离子体(non-thermal atmospheric pressure plasma,NTAPP)射流处理对牙本质表面温度、润湿性以及胶原纤维微观形貌的影响,为NTAPP在口腔领域的研究和应用提供参考。方法将NTAPP发生装置的氦气气体流量分别设定为3、4、5 L/min,放电输入功率分别设定为8、9、10、11 W,分别处理12组人牙本质试件(西安医学院第一、第二附属医院口腔科提供,每组样本量为6),采用红外热像仪连续测量NTAPP射流处理60 s内试件表面温度,绘制温度曲线。测量上述气体流量、输入功率设定下NTAPP射流处理5、10、15、20 s后牙本质和未经NTAPP处理的牙本质(阴性对照组)接触角(每组样本量均为6)。场发射扫描电镜(field emission scanning electron microscopy,FE-SEM)观察氦气气体流量为5 L/min,输入功率分别为8、9、10、11 W设定下NTAPP射流处理5、10、15、20 s的各NTAPP组及阴性对照组(未行NTAPP处理)(每组样本量均为4)牙本质试件胶原纤维的微观形貌。结果气体流量、输入功率和处理时间对牙本质表面温度及润湿性均有显著影响(P<0.01)。随着处理时间延长,牙本质表面温度呈上升趋势;输入功率越大,牙本质表面温度越高;气体流量越大,升温越迅速。气体流量为5 L/min、输入功率为11 W处理60 s时,牙本质试件表面温度最高,为(35.10±0.24)℃。随着NTAPP处理时间延长,与阴性对照组牙本质表面接触角(75.57°±1.45°)相比,各NTAPP组牙本质表面接触角均显著减小(P<0.05);随着气体流量及输入功率增加,接触角呈减小趋势,气体流量为5 L/min、输入功率为10 W处理20 s后牙本质表面接触角最低,为13.19°±2.01°。FE-SEM显示,随着输入功率增大及处理时间延长,胶原纤维出现断裂、融合等不同程度的破坏。结论NTAPP处理可显著改变牙本质表面温度、润湿性及微观形貌,效果与设备的气体流量、输入功率和处理时间密切相关。