“思政元素”融入医学免疫学课程教学的实践研究

大学生思想政治教育是高校人才培养的重中之重,也是医学院校践行社会主义核心价值观、培养现代化医药人才的重要途径之一。在新形势下,我校坚持将教书与育人相结合,在临床本科专业免疫学教学过程中引入课程思政内容,通过深入挖掘医学知识中的德育元素和思想政治内容,将学科教育和思想政治理念有机融合,使德育教育渗透并贯穿于教与学的全过程,以期培养德才兼备的医疗卫生人才。

医学本科生参与课外科研活动的探索

为提升医学生培养质量,文章从保持学生参加课外科研活动的持续动力、提升课外科研活动的时间效率、确定课外科研课题的难易程度、将实验方法的学习与研究课题的内容有机结合四方面对医学本科生参加课外科研活动进行了探索。

课外科研中医学本科生开展动物实验的探讨

文章从合理安排,鼓励学生及早接触动物实验;多次培训,逐步熟练掌握动物实验技术;开展讲座,了解动物实验研究最新进展;联系临床,注重人类疾病动物模型的制备和应用的四个方面探讨了课外科研中医学本科生开展动物实验的策略。

医学本科生课外科研中安全保障的实践心得

文章从坚决落实安全管理制度、全面强化实验室人员安全管理责任、定期进行安全教育、切实保障安全设施完备可用、及时清除安全隐患和充分发挥指导教师监管作用六个方面总结了医学本科生课外科研中安全保障的实践心得.

元宝枫油对衰老果蝇生理指标及肠道菌群的影响

探究元宝枫油对衰老果蝇生理指标及肠道菌群的影响。在基础培养基中分别添加10、20 g/kg和40 g/kg的元宝枫油对野生黑腹果蝇进行干预,观察果蝇寿命、爬行能力、嗅觉记忆能力和热耐受能力等行为学变化情况;检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力;收集果蝇中肠,进行16S rRNA基因扩增子测序,检测肠道微生物组的变化。结果表明,与对照组相比,不同含量的元宝枫油干预均能显著延长果蝇的寿命(P<0.000 1),其中,20 g/kg元宝枫籽油抗衰老效果最佳,平均延长寿命31%。另外,20 g/kg元宝枫油干预可明显改善衰老果蝇的爬行能力、嗅觉记忆能力和热耐受能力,提高SOD和GSH-Px活力。衰老改变了果蝇肠道微生物的组成和结构,线性判别分析结果显示衰老果蝇中Enterobacteriaceae、Gluconobacter和Morganella morganii 3类细菌相对丰度增加,而元宝枫油抑制了衰老过程中以上3类细菌相对丰度的增加。综上,元宝枫油具有抗衰老作用,可改善果蝇的生理功能衰退,延长寿命,其机制可能与改变衰老果蝇肠道微生物的丰富度、均匀度和菌群结构,从而调节肠道菌群和提高抗氧化能力有关。

妇炎舒抗炎镇痛作用研究

目的研究妇炎舒镇痛及抗炎作用,并观察工艺优化的影响。方法采用醋酸扭体法和热板法进行镇痛实验,利用连续二倍梯度琼脂平板稀释法,液体转染平板法及大鼠棉球肉芽肿形成模型,观察妇炎舒的抗炎活性。结果妇炎舒对热刺激引起的小鼠疼痛痛阈明显延长,并明显减少醋酸引起的小鼠扭体次数;妇炎舒(除小剂量组)对大鼠棉球肉芽肿有明显抑制作用;与妇炎舒(原)比较,大剂量妇炎舒明显减少醋酸引起的小鼠扭体次数,并对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、阴道加特纳菌、淋病奈瑟氏菌的MIC和MBC值均降低。结论妇炎舒具有较好的镇痛及抗炎活性,且工艺优化后妇炎舒的镇痛及抗炎作用有明显提高。

乳化七氟烷对大鼠Formalin模型脊髓水平镇痛作用的研究

目的：旨在阐明不同剂量的乳化七氟烷在脊髓水平的镇痛作用及相关机制。方法：将36只成年SD大鼠,随机均分为6组,鞘内注射生理盐水50μl/kg（A1,A2）组,鞘内注射乳化七氟烷50μl/kg（B1,B2）组,鞘内乳化七氟烷25μl/kg（C1,C2）组。各组大鼠分别应用福尔马林足底注射致痛模型,通过鞘内置管至腰膨大（L4~L5）注射不同药物,应用免疫组织化学和行为学方法,综合评价乳化七氟烷在脊髓水平的镇痛效果。结果：鞘内注射乳化七氟烷可明显减少福尔马林足底致痛大鼠缩足反射的次数（P〈0.05）,明显延长缩足潜伏期（P〈0.05）,明显提高疼痛阈值（P〈0.05）,并具有一定的剂量依赖关系。光镜结果显示：鞘内注射乳化七氟烷可剂量依赖性的抑制大鼠脊髓背角I-VI层Fos蛋白的表达（P〈0.05）。结论：鞘内注射乳化七氟醚在脊髓水平能够发挥抗伤害性作用,其部分机制可能与减少大鼠脊髓背角Fos蛋白的合成有关。

游离脂肪酸受体4(FFAR4/GPR120)调控巨噬细胞功能的研究进展

游离脂肪酸受体4(FFAR4/GPR120)表达于巨噬细胞,调控白细胞介素1(IL-1)、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)等细胞因子的表达与分泌,介导ω-3多不饱和脂肪酸的抑炎效应。FFAR4可通过Gq/11蛋白激活磷脂酶C和胞质磷脂酶A2介导的信号分子途径,或者通过β抑制蛋白2(β-arrestin 2)调控炎症相关分子,改变核因子κB(NF-κB)等转录因子活性。巨噬细胞在机体分布广泛,FFAR4调节巨噬细胞状态,进而影响脂肪组织、肌肉组织、肝脏等组织器官的功能,参与肥胖、胰岛素抵抗、骨质疏松、脂肪肝等疾病发生。目前对FFAR4激活在巨噬细胞的效应和对疾病的治疗作用还处于认识的初期,许多问题仍待更深入研究。

葡萄糖转运体与心血管疾病之间关系的研究进展

葡萄糖转运体(glucosetransporters,GLUT)承担葡萄糖的跨膜转运,参与心脏和血管的能量代谢调控,与多种心血管疾病的发生发展关系密切。GLUT存在多种亚型,不同亚型GLUT在心血管疾病发生中起着不同的作用,不同心血管疾病表现出GLUT亚型改变的差异。本文重点介绍各种GLUT亚型在心血管的表达及其变化,探讨GLUT在心血管疾病发生中的作用。

游离脂肪酸受体4对胃肠激素分泌的调节作用及其生理意义研究进展

游离脂肪酸受体4(FFA4)是定位于细胞膜的G蛋白偶联受体,表达于胃肠道黏膜中的内分泌细胞,可感知胃肠道和机体组织中游离脂肪酸水平变化,调节胃肠激素分泌。FFA4激活可刺激胰高血糖素样肽-1、葡萄糖依赖性胰高素样多肽、胆囊收缩素、神经紧张素等多种激素分泌,同时抑制胃饥饿素分泌。FFA4通过调节胃肠激素的分泌而影响食物摄入、消化、吸收及能量代谢等生理过程。

Irisin的生理效应及其研究进展

Irisin (鸢尾素)从最初被发现在脂肪细胞棕化过程中的作用后就一直被研究者们广泛关注。它在多种组织中均有表达,在运动后及二型糖尿病,孕期糖尿病患者中表达量发生变化。由于Irisin可以改善胰岛素抵抗,促进脂肪细胞棕化,故其在糖尿病及肥胖症治疗中具有应用潜力。Irisin在神经系统发育中具有重要作用,其含量与认知水平密切相关。本文就Irisin的发现及生理效应的研究展开综述。

舒芬太尼抑制肝癌Hep3B细胞活性及促进凋亡作用

目的探讨舒芬太尼对肝癌Hep3B细胞活性的影响及相关机制。方法以Hep3B肝癌细胞为研究对象,经不同浓度(0.01、0.1、1、5、10、15μmol/L)舒芬太尼处理后,MTT法观察细胞活性的改变,流式细胞仪及AnnexinV/PI双标记染色检测Hep3B细胞周期及凋亡的变化,Western blot检测survivin及caspase-3蛋白的表达。结果随着舒芬太尼浓度的增加,肝癌细胞活性降低,细胞周期停滞在G0/G1期,细胞凋亡增多,survivin蛋白表达量降低,caspase-3蛋白表达量升高。结论舒芬太尼能通过改变肝癌细胞的细胞周期,促进细胞凋亡,改变survivin和caspase-3蛋白的表达,抑制Hep3B细胞的活性。

二氧化钛纳米材料对氧化应激状态大鼠肾脏的毒性

目的研究二氧化钛(TiO2)纳米材料对正常及氧化应激SD大鼠肾组织的不良影响。方法通过肌肉注射四氧嘧啶,构建氧化应激模型,并分为四氧嘧啶处理组(OS组)、纳米TiO2处理组(NM组)及四氧嘧啶与纳米TiO2共处理组(OS-NM组),后两组分别采用一次性腹腔注射0.5、5和50mg/kg体质量纳米TiO2的方式进行染毒,另设正常对照组。检测氧化应激指标、尿素氮(BUN)水平并制备肾组织病理切片。结果注射5mg/kg体质量纳米TiO2时,OS-NM组大鼠O2-·和超氧化物歧化酶(SOD)较OS组和NM组增高,差异均有统计学意义(P<0.05);当注射50mg/kg体质量纳米TiO2时,与OS组及NM组分别比较,OS-NM组大鼠的O2-·、谷胱甘肽(GSH)和SOD水平变化差异均极显著(P<0.01);且OS组与NM组相比较,O2-·和GSH的变化有统计学意义(P<0.05)。与染毒后的正常大鼠相比,纳米TiO2导致氧化应激大鼠BUN水平的异常升高(P<0.01),并引起肾脏出现肾小球体积增大、细胞数目增多、肾小管上皮细胞水肿。方差分析表明四氧嘧啶与纳米TiO2在导致O2-·水平升高的过程中存在协同作用。结论 TiO2纳米材料对正常及氧化应激大鼠肾脏均有损伤,且四氧嘧啶与纳米TiO2协同作用能诱发更为严重的氧化应激状态从而加重对肾脏的损伤,这为患者安全使用纳米材料提供了一定的实验依据。

丙泊酚对HepG2肝母细胞瘤细胞侵袭能力的影响

目的:探讨丙泊酚对Hep G2肝母细胞瘤细胞侵袭能力的影响及相关机制。方法:用不同质量浓度(0、3、6、9和12 mg/L)丙泊酚培养Hep G2细胞24 h后,通过细胞侵袭实验检测侵袭率;培养24、48和72 h后用MTT法检测细胞活性;培养48 h后采用RT-PCR和Western blot法检测细胞中MMP-2、MMP-9 mRNA及MMP-2、MMP-9和TIMP-1蛋白的表达。结果:随丙泊酚质量浓度的增加,Hep G2细胞的侵袭能力逐渐降低(F=4 883.900,P<0.001),细胞活性逐渐降低(F=38.334,P<0.001),MMP-2及MMP-9 mRNA及蛋白的表达亦逐渐降低(P<0.05),而TIMP-1蛋白的表达逐渐升高(F=44.918,P<0.001)。结论:丙泊酚能降低Hep G2细胞的侵袭能力及细胞活性,其机制与抑制MMP-2和MMP-9蛋白的表达及促进TIMP-1蛋白的表达有关。

褪黑素在大鼠离体心脏急性钙超载损伤中的作用

目的:观察褪黑素(melatonin,Mel)对大鼠离体心脏急性钙超载损伤的保护作用。方法:将32只大鼠随机分为4组:对照组(Control)、褪黑素组(Mel)、钙反常组(calcium paradox,CaP)和Mel干预钙反常组(Mel+CaP)。大鼠离体心脏行Langendorff灌流,建立钙反常模型;观察左室发展压、心肌梗死面积、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性、细胞色素c及caspase-3蛋白的表达变化;HE染色观察心肌纤维形态学变化。结果:与Control组相比,CaP组心肌几乎全部梗死(P<0.01),冠状动脉流出液中LDH活性显著增加(P<0.01),心肌纤维排列紊乱,细胞色素c和caspase-3蛋白表达均上调(P<0.01);Mel(10μmol/L)干预钙反常组心脏损伤各项指标均明显降低(P<0.01)。结论:Mel可明显减轻大鼠离体心脏急性钙超载诱导的损伤。

游离脂肪酸受体4调控能量代谢的途径与分子机制

游离脂肪酸(FFA)是调节机体能量代谢的重要物质,可通过胞内代谢所产生的中间产物或在胞外激活细胞膜上G蛋白偶联受体调节代谢。FFA受体4(FFAR4)是FFA激活的一种膜受体,表达于下丘脑、胃肠道、脂肪、肝脏和舌等多种与物质代谢相关的组织,可影响激素和细胞因子等分泌,通过多个途径调节机体代谢过程,包括影响下丘脑摄食中枢活动,调节胃肠内分泌,改变脂肪细胞状态,参与肝脏代谢,影响味觉和食物喜好等。FFAR4激动剂可通过以上作用增加机体能量消耗,有望用于肥胖和2型糖尿病的治疗。

抑制CaMKII减轻线粒体氧化应激可改善离体心脏缺血再灌注损伤

目的探讨钙/钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ(CaMKII)在离体心脏缺血再灌注(IR)损伤中的作用和可能机制。方法采用大鼠离体心脏缺血再灌注(IR 45 min/120 min)模型,将40只大鼠随机分为对照组(Control)、KN-93药物对照组(2.5μmol/L KN-93)、IR组和CaMKII特异性抑制剂KN-93干预缺血再灌注组(KN-93+IR),以左室心脏功能、冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)活性和心肌肌钙蛋白(cTnI)含量、心肌梗死面积评价心脏损伤程度,Western-blot检测CaMKII磷酸化(p-CaMKII)、CaMKII氧化(ox-CaMKII)和PLN磷酸化(p-PLN)蛋白的表达,试剂盒检测线粒体超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的含量。结果与Control组相比,KN-93组各项指标均无明显变化;IR组心脏功能、线粒体SOD的活性降低(P<0.01),而心肌梗死面积、冠脉流出液中LDH活性和cTnI含量、p-CaMKII、ox-CaMKII和p-PLN的表达、线粒体MDA的含量均明显升高(P<0.01);KN-93干预IR组可明显改善心脏功能(P<0.01),增加线粒体SOD活性,减小心肌梗死面积、LDH活性、cTnI含量、p-CaMKII、ox-CaMKII和p-PLN的表达以及线粒体MDA含量(P<0.01)。结论 CaMKII参与离体心脏缺血再灌注损伤,抑制CaMKII可通过降低线粒体氧化应激进而减轻离体心脏缺血再灌注损伤。

DNAM-1通过IL-2/STAT-5通路调节Ⅰ型调节性T细胞的增殖和功能

目的探讨DNAM-1对Ⅰ型调节性T细胞(Tr1细胞)活化、增殖和功能的影响及相关分子机制。方法利用anti-CD3/CD28激活小鼠T细胞,采用流式细胞术分别检测静息和激活状态下CD4+T细胞和Tr1细胞DNAM-1分子表达变化;分离DNAM-1基因敲除小鼠(KO小鼠)脾脏初始CD4+T细胞并体外诱导Tr1细胞,流式细胞术检测CD25和CD69活化分子表达水平,CFSE标记后检测增殖能力,IL-2刺激前后检测KO小鼠Tr1细胞分泌IL-10和转录激活蛋白(p-STAT5)水平变化。结果流式细胞术结果显示:与静息状态下相比较,激活状态的CD4+T细胞和Tr1细胞表达DNAM-1分子均增高(P<0.05);敲除DNAM-1不影响小鼠脾脏Tr1细胞的数量和比例,但KO小鼠Tr1细胞表达细胞激活分子CD25和CD69均降低,差异有统计学意义(P<0.05);与WT小鼠比较,KO小鼠诱导型Tr1细胞体外增殖能力降低(P<0.05);与WT组Tr1细胞比较,KO小鼠Tr1细胞分泌抑制性细胞因子IL-10水平降低(P<0.05),给予IL-2刺激后仍无法逆转,表达Il-10 mRNA和Gzmb mRNA水平降低(P<0.05);给予不同剂量IL-2刺激Tr1细胞后,KO小鼠Tr1细胞表达p-STAT5水平相比较WT组均降低(P<0.05)。结论DNAM-1参与Tr1细胞的活化和增殖,并通过IL-2/STAT5信号通路影响Tr1细胞抑制功能。

GPR120激动剂TUG891对诱导分化的3T3-F442A细胞的脂肪因子表达的影响

目的研究游离脂肪酸受体4/G蛋白偶联受体120(FFAR4/GPR120)激动剂TUG891对脂肪细胞的细胞因子mRNA水平的影响。方法 3T3-F442A细胞在含100 m L/L胎牛血清(FBS)的完全DMEM培养基中培养至接触抑制2 d后,换至诱导分化培养基继续培养2 d;随后,用含100 m L/L FBS、0. 24 IU/m L胰岛素的DMEM维持培养基培养2 d;最后,在含100 m L/L FBS的完全DMEM培养基培养6～8 d。当80%以上细胞出现脂滴沉积后,细胞分为对照组和10μmol/L FFAR4激动剂TUG891处理组。处理12 h后,应用反转录PCR检测3T3-F442A脂肪细胞内白细胞介素1(IL-1)、IL-6、IL-12、IL-8、IL-10、IL-15、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、抵抗素(resistin)的mRNA水平。结果 3T3-F442A细胞经诱导后分化为脂肪细胞。与对照组相比,TUG891处理组3T3-F442A脂肪细胞的IL-1、IL-6、IL-12、TNF-α和MCP-1的mRNA水平显著下降,IL-8、IL-10、IL-15和resistin的mRNA水平变化不明显。结论激活FFAR4/GPR120抑制脂肪细胞的细胞因子IL-1、IL-6、IL-12、TNF-α和MCP-1转录。

高脂饮食诱导肥胖和游泳运动对小鼠心脏脂质沉积的影响

目的明确高脂饮食诱导肥胖和游泳运动对小鼠心脏脂质沉积的影响。方法 C57BL/6J小鼠分为普通饲料组(NC)、高脂饲料诱导肥胖组(DIO)、肥胖低运动组(DIO+LE)、肥胖高运动组(DIO+HE),DIO+LE小鼠每天自由游泳30分钟,DIO+HE小鼠游泳3×30分钟,间隔15分钟。连续游泳运动4周后,油红O染色检测心脏脂质沉积,RT-qPCR分析基因表达变化,免疫组织染色观察线粒体标记物MTCO2水平变化。结果 NC小鼠心脏可见少量脂滴,DIO小鼠心肌细胞内脂滴的数量显著减少(P<0.05)。DIO+HE小鼠心肌细胞内脂滴的数量较DIO显著增加(P<0.05)。DIO小鼠心脏中乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)、脂肪酸合酶(FAS)等基因表达较NC组显著下降(P<0.05),肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT1和CPT2)、3-磷酸甘油脱氢酶(GPD-1)和甘油激酶(GyK)基因表达较NC显著升高(P<0.05)。DIO+HE进一步增加CPT1和CPT2表达,但是逆转DIO小鼠的GPD-1和GyK升高(P<0.05)。DIO+HE小鼠MTCO2免疫染色较DIO组显著增强(P<0.05)。结论单纯高脂饲料诱导的肥胖模型小鼠并未增加心脏脂质沉积,反而出现脂质减少,一定运动量可逆转此种变化。本研究为高脂饮食和运动影响心脏脂质沉积提供了新的认识。