转化医学理念在全科医学教育中的应用探讨

转化医学强调医学基础研究成果向临床实践应用的转化,其"以患者为中心"的学科理念符合全科医学的主旨及培养教育核心内容。我们借鉴转化医学的先进理念及其领域内学科建设、教学方式、评估体系、师资培训等有效经验,结合我国国情,探讨转化医学理念与全科医学教育的契合点,探讨如何应用其特色和优势之处促进全科医学教育的全面发展。

MYBL2基因与妇科恶性肿瘤相关性的研究进展

MYBL2是MYB转录因子家族成员之一,是介导细胞周期进程、细胞存活和分化的重要的调控因子。研究表明,MYBL2在多种恶性肿瘤中呈过度表达状态,且其蛋白表达水平与临床不良预后相关。MYBL2在基因表达调控中起关键作用,并参与了细胞凋亡、细胞衰老、肿瘤发生发展等过程。MYBL2及其下游转录网络的参与者可以用作预后或预测生物标志物,作为将来更具体的抗癌疗法的潜在治疗靶标。近年大量研究显示,女性生殖系统恶性肿瘤中存在典型的MYBL2基因过表达现象,并且发现MYBL2与妇科肿瘤的化疗耐药、免疫治疗及临床预后密切相关。本文将对MYBL2在妇科肿瘤领域的研究进展进行综述,为肿瘤治疗提供新的思路和方向。

苦参碱调节Notch信号通路对高糖诱导的滋养层细胞增殖和凋亡的影响

目的研究苦参碱调节Notch信号通路而对高糖诱导的滋养层细胞增殖和凋亡产生的影响。方法将人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo培养至对数期,以高糖诱导损伤,然后用不同浓度的苦参碱处理细胞并用CCK-8法检测其活性。依据结果将HTR-8/SVneo分为ctrl组(5 mmol/L葡萄糖培养)、HG组(25 mmol/L葡萄糖培养)、低浓度苦参碱组(1.00 mmol/L)、高浓度苦参碱组(1.50 mmol/L)、高浓度苦参碱(1.50 mmol/L)+Jagged1组(500μg/L Notch信号通路激活剂)。CCK-8试剂盒检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡;试剂盒检测细胞中MDA和SOD活性;western blot检测Notch1、PCNA、BAX、Bcl-2蛋白表达。结果与ctrl组比较,HG组HTR-8/SVneo的细胞存活率、SOD水平、PCNA、Bcl-2蛋白表达降低,而细胞凋亡率、MDA水平、Notch1、BAX蛋白表达升高(P<0.05);与HG组比较,低浓度苦参碱组、高浓度苦参碱组细胞存活率、SOD水平、PCNA、Bcl-2蛋白表达升高,而细胞凋亡率、MDA水平、Notch1、BAX蛋白表达降低(P<0.05);Jagged1减弱了高浓度苦参碱对HTR-8/SVneo细胞增殖的促进和凋亡的抑制作用。结论苦参碱可能会通过抑制Notch信号通路而改善高糖诱导的滋养层细胞的增殖,并抑制细胞凋亡。

孕产妇产前凝血四项、D-二聚体和血小板的检测分析

目的通过对孕产妇产前凝血四项[凝血酶原时间(PT)、部分活化凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原定量(FIB)]以及D-二聚体(DD)和血小板(PLT)的联合检测,探讨其在判断孕产妇凝血功能、出血危险性方面的临床意义。方法收集2012年6月至2013年9月来该院就诊孕妇及健康体检育龄非妊娠妇女共795人,分为正常妊娠组(孕早期、孕中期、孕晚期、临产期)、产科意外组、妊娠伴其他疾病组和健康对照组。同时检测PT、APTT、TT、FIB、DD、PLT,并进行相关统计分析。结果正常妊娠组DD、FIB明显高于健康对照组(P<0.05),PT、APTT明显低于健康对照组(P<0.05),两组TT比较差异无统计学意义(P>0.05);产科意外组、妊娠伴其他疾病组DD、FIB明显高于正常妊娠组(P<0.05),PT明显低于正常妊娠组(P<0.05)。产科意外组、妊娠伴其他疾病组PLT明显低于正常妊娠组(P<0.05)。三项联合检测诊断孕产妇产科意外发生的敏感性和特异性大大优于单项或两项联合检测。结论产前进行凝血四项、DD和PLT的联合检测,可初步判定孕产妇妊娠周期的凝血状况,帮助治疗孕产妇异常出血,对制定生产方案及预防产科意外的发生有着重要的指导意义。

不明原因复发性流产患者绒毛组织中DNA低甲基化及机制

目的探究不明原因复发性流产(URSA)患者绒毛组织全基因组甲基化水平和甲基化相关酶基因表达情况。方法选取URSA患者31例(URSA组)及同期正常早孕放弃妊娠行人工流产的妇女30例(对照组)。取绒毛组织,采用ELISA测定绒毛组织中总DNA的甲基化水平,实时定量PCR检测DNA甲基化转移酶1(DNMT1)、DNMT3a、DNMT3b、去甲基化酶10-11转位酶1(TET1)、TET2、TET3的mRNA水平,Western blot法检测DNMT1、DNMT2、DNMT3、TET1、TET2、TET3蛋白水平。免疫化学染色检测绒毛组织中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、TET1、TET2、TET3的表达和分布。结果与对照组相比,URSA组的全基因组甲基化水平显著降低,URSA组绒毛组织中DNMT1、DNMT3b的mRNA和蛋白水平显著降低,TET1、TET2的mRNA和蛋白水平显著增加。结论URSA妇女的流产绒毛组织呈现出低甲基化水平的状态,可能与DNMT1、DNMT3b上调,TET1、TET2下调有关。

外周血miR-152、PIGF、sFlt-1和sEng水平对子痫前期患者不良孕产结局的预测分析

目的探讨子痫前期(PE)患者血清中微小RNA152(miR-152)、胎盘生长因子(PIGF)、可溶性血管内皮生长因子(sFlt-1)及可溶性内皮抑素(sEng)表达水平对不良孕产结局的诊断预测价值。方法选取西安医学院第一附属医院2019年1月至2020年12月收治的145例PE患者为研究对象,其中发生不良孕产结局者为研究组(n=60),未发生不良孕产结局者为对照组(n=85),绘制受试者工作特征(ROC)曲线、计算曲线下面积(AUC)分析预测价值。结果本研究145例PE患者中发生不良孕产结局的患者为60例(41.38%),其中早产40例(66.67%)、胎盘早剥5例(8.33%)、胎儿窘迫12例(20.00%)、低出生体重儿44例(73.33%)、胎死宫内1例(1.67%)、新生儿肺炎13例(21.67%);研究组患者孕周和胎儿出生体重小于对照组,差异有统计学意义(t/H值分别为7.58、11.29,P<0.05),两组间年龄和住院天数差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,研究组患者miR-152、sFlt-1、sEng的表达水平上升,PIGF水平下降,差异均具有统计学意义(t/H值分别为-7.73、-3.62、-5.18、4.06,P<0.05);单独指标诊断PE患者发生不良孕产结局时,miR-152诊断AUC最大,为0.80;联合指标诊断时,AUC为0.89,特异性为86.23%,敏感性为77.47%。结论PE患者血清中PIGF、sFlt-1和sEng水平联合miR-152检测,对于PE患者发生不良孕产结局的预测诊断具有一定临床价值。

lncRNA-SNHG5在重度子痫前期胎盘组织中的表达及其对滋养细胞增殖能力影响的机制

目的分析长链非编码RNA(lncRNA)小核仁RNA宿主基因5(SNHG5)在重度子痫前期(sPE)胎盘组织中的表达情况,及其对人正常滋养细胞HTR8增殖能力影响的机制。方法应用实时荧光定量PCR检测30例重度子痫前期孕妇(sPE组)与30例正常晚孕孕妇(正常组)胎盘组织中lncRNA-SNHG5的表达情况。取人正常滋养细胞HTR8分为过表达组、抑制组、对照组,分别转染过表达质粒(pcDNA3.1-lncRNA-SNHG5)、lncRNA-SNHG5抑制序列以及空质粒。检测转染24 h、48 h、72 h后各组细胞的增殖情况,以及转染24 h后各组lncRNA-SNHG5、微小RNA-155(miRNA-155)及其靶基因细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达情况。结果sPE组胎盘组织中lncRNA-SNHG5的表达水平低于正常组(P<0.05)。抑制组、对照组、过表达组各时间点细胞增殖能力依次提高,lncRNA-SNHG5、cyclin D1 mRNA及蛋白表达水平均依次升高,miRNA-155表达水平依次降低(均P<0.05)。结论lncRNA-SNHG5与sPE密切相关,其可能通过调控miRNA-155/cyclin D1途径,影响滋养细胞增殖能力。

索拉非尼对子宫内膜癌细胞HEC-1B增殖、凋亡的影响

目的:探讨多分子靶向药物索拉菲尼对体外培养人子宫内膜癌细胞(HEC-1B)增殖、凋亡的影响。方法:MTT检测细胞活力/增殖情况,免疫印迹检测细胞内caspase3蛋白水平;流式细胞仪检测细胞凋亡;对比阴性对照组(正常培养的细胞),分析索拉菲尼对子宫内膜癌细胞增殖/凋亡的影响。结果:索拉菲尼对子宫内膜癌细胞增殖有抑制作用,且随着药物浓度增加作用也增强(P<0.05);与对照组相比,索拉菲尼处理组细胞caspase3蛋白表达及凋亡率均明显增加(P<0.05)。结论:索拉菲尼对体外培养的人子宫内膜癌细胞有明显的抑制作用。

子痫前期患者胎盘组织中miR-30a-3p表达的研究

目的研究miR-30a-3p在子痫前期(PE)患者与正常产妇胎盘组织中的表达差异,以及其在PE发病中的作用。方法收集PE患者和正常产妇胎盘组织各20例,应用荧光实时定量聚合酶链反应(Real time-PCR)的方法检测两组miR30a-3p的表达差异。结果两组胎盘组织中均有miR-30a-3p的表达,PE患者胎盘组织中miR-30a-3p的表达较正常孕妇组升高2.36倍,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论胎盘组织中miR-30a-3p的病理性高表达可能与PE发病相关。

阿帕替尼调控WWOX对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响及其机制研究

目的:探讨阿帕替尼(Apatinib)是否通过包含氧化还原酶的WW结构域(WWOX)影响子宫内膜癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭。方法:噻唑蓝(MTT)比色法检测4μmol/L、8μmol/L、16μmol/L、32μmol/L Apatinib作用于子宫内膜癌细胞HEC-124 h、48 h、72 h后的细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、p21、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、WWOX蛋白水平,Transwell小室法检测迁移细胞数、侵袭细胞数。在HEC-1中转染pcDNA3.1-WWOX,或转染si-WWOX并用16μmol/L Apatinib进行处理,采用上述方法评估细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭情况。结果:Apatinib明显降低HEC-1细胞活性(P<0.05),呈剂量、时间依赖性;Apatinib显著增加HEC-1细胞凋亡率及p21、Bax蛋白表达量(P<0.05),呈剂量依赖性;Apatinib明显降低Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达量(P<0.05),呈剂量依赖性;16μmol/L Apatinib显著减少HEC-1细胞的迁移细胞数、侵袭细胞数、MMP-2蛋白表达量(P<0.05),明显提高E-cadherin、WWOX蛋白表达量(P<0.05)。过表达WWOX明显降低HEC-1细胞中Cyclin D1、Bcl-2、MMP-2蛋白表达量、细胞活性、迁移细胞数、侵袭细胞数(P<0.05),提高p21、Bax、E-cadherin、WWOX蛋白表达量及细胞凋亡率(P<0.05)。抑制WWOX表达逆转了Apatinib对HEC-1细胞中Cyclin D1、Bcl-2、MMP-2蛋白表达量、细胞活性、迁移、侵袭的抑制作用,以及逆转了其对p21、Bax、E-cadherin、WWOX蛋白表达量、细胞凋亡的促进作用。结论:阿帕替尼通过调控WWOX表达,抑制子宫内膜癌细胞增殖、迁移、侵袭,并诱导细胞凋亡。

miR-18a对人正常滋养细胞中MMP-2、MMP-9表达的影响

目的:研究子痫前期(pre-eclapmpsia,PE)相关微小RNA-18a(miR-18a)对人正常滋养细胞(HTR-8细胞)中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9的影响。方法:按照HTR-8细胞中miR-18a的表达情况分为3组(每组重复5次):miR-18a过表达组、miR-18a抑制组、阴性对照组;实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测转染后HTR-8细胞中miR-18amRNA的表达量;RT-qPCR和蛋白质印迹(Western blotting)检测转染后HTR-8细胞中MMP-2、MMP-9mRNA和蛋白表达量。结果:miR-18a过表达组miR-18amRNA表达量比阴性对照组升高,miR-18a抑制组miR-18amRNA表达量比阴性对照组降低,差异均有统计学意义(均P<0.001)。miR-18a抑制组MMP-2、MMP-9mRNA和蛋白表达量比阴性对照组降低,差异均有统计学意义(均P<0.001)。结论:miR-18a影响人正常滋养细胞中MMP-2、MMP-9在mRNA及蛋白水平的表达,可能通过该途径参与对滋养细胞浸润能力的调控。

子痫前期患者与正常孕妇血清脂质组学成分对比分析

目的:对子痫前期(pre-eclampsia,PE)患者和正常孕妇血清中脂质成分进行对比分析。方法:纳入西安医学院第一附属医院产科2019年1月1日—7月1日收治的PE患者16例为PE组,选取同期自然分娩正常孕妇16例为正常对照组(NC组),收集2组患者血清。采用超高效液相色谱串联质谱(ultra-performance liquid chromatography tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)法对各组患者血清中的甘油磷脂、鞘脂、甘油酯、甾醇类及脂肪酸五大类脂质成分进行分析。结果:2组孕妇年龄和采血时体质量指数(BMI)差异无统计学意义(P>0.05)。PE组患者妊娠时间低于NC组(P<0.05)。对2组患者血清中5大类脂质共计25种脂质成分进行分析,相比于NC组,PE组的甘油磷脂、鞘脂、甘油酯和甾醇类表达差异无统计学意义(P>0.05)。PE组患者血清中游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)含量高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。进一步对13种不同类型FFA进行分析,发现PE组孕妇血清中FFA22:4、FFA20:5、FFA20:4、FFA20:3、FFA18:2、FFA18:1、FFA16:1、FFA16:0和FFA14:0与NC组相比显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PE患者血清中出现多种不同类型的FFA的差异化表达,不同类型FFA可能成为疾病诊断的预警分子,在疾病预测及机制探索中具有一定作用。

孕期脉冲电磁场与子代大鼠海马神经干细胞增殖及巢蛋白的表达(英文)

背景:电磁场能对机体产生影响,尤其对于神经系统。研究已发现了脉冲电磁场对神经干细胞的影响。目的:观察产前脉冲电磁场对子代大鼠海马神经干细胞增殖及巢蛋白表达的影响。方法:选用体质量240～260g SD雌性大鼠为母鼠,随机分为2组。对照组孕期不给任何干预;产前脉冲电磁场组于怀孕14～20d,给予脉冲电磁场刺激,3次/d,10min/次。于雌、雄仔鼠1月龄时每组随机各组6只行脑组织切片,应用免疫组织化学方法检测海马中Nestin蛋白和Brdu阳性细胞的表达。结果与结论:产前脉冲电磁场组雌雄子代海马Nestin蛋白和Brdu阳性细胞表达均较对照组多(P<0.001),且产前脉冲电磁场组雌性子代海马Nestin蛋白和Brdu阳性细胞表达较雄性子代的多,差异具有非常显著性意义(P<0.001),对照组雌雄子代之间差异无显著性意义(P>0.05)。结果表明,产前脉冲磁场能引起子代海马神经干细胞数增多及增殖能力增加,这可能是机体对产前脉冲电磁场所致脑损伤的代偿性反应。

长链非编码RNASNHG5在重度子痫前期患者胎盘中的表达及其通过miR-155/CXCR4对滋养细胞侵袭的影响

目的观察长链非编码RNA(lncRNA)小核仁RNA宿主基因5(SNHG5)在重度子痫前期(sPE)患者胎盘组织中的表达,及其通过调控微小RNA 155(miR-155)对人滋养细胞(HTR8)侵袭功能的影响。方法qRT-PCR检测30例重度子痫前期(sPE组)与30例正常产妇(正常组)胎盘组织中lncRNA-SNHG5的表达水平。培养人滋养细胞(HTR8),分为:过表达组、抑制组和对照组(NC组),分别转染过表达质粒(pcDNA3.1-SNHG5)、siRNA-SNHG5和空质粒(pcDNA3.1)。Transwell法检测各组HTR8细胞侵袭能力。qRT-PCR、Western-blot检测各组中lncRNA-SNHG5、miR-155及其靶基因特异性趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)的表达。结果qRT-PCR结果显示,与正常组相比,sPE组胎盘组织中lncRNA-SNHG5的表达显著下降(P<0.05)。与对照组相比,lncRNA-SNHG5在过表达组水平升高,在抑制组水平降低(P<0.05);Transwell结果显示,与对照组相比,过表达组穿过小室细胞数量升高,抑制组穿过小室细胞数量降低,差异有统计学意义(P<0.05);过表达组miR-155在mRNA水平低于抑制组(P<0.05),过表达组CXCR4在mRNA和蛋白水平均高于抑制组(P<0.05)。结论子痫前期患者胎盘中IncRNA-SNHG5表达下降。IncRNA-SNHG5可能通过影响miR-155/CXCR4途径导致滋养细胞侵袭能力下降,可能是PE发病的潜在机制。

Smad3通过p38/MAPK信号通路调控细胞自噬及凋亡促进胰腺癌进程

目的观察Smad3对胰腺癌细胞Panc-1、BxPC-3凋亡、自噬的影响,初步探讨Smad3表达水平影响胰腺癌进程的可能机制。方法基于GEPIA2数据库进行生物信息学分析,探究Smad3与胰腺癌发生、发展及生存的相关性。利用CRISPR/Cas9系统以及短发卡RNA(ShRNA)敲除及敲减Smad3的表达,采用Real-Time quantitative PCR(qPCR)和Western blot检测细胞中Smad3 mRNA和蛋白水平变化。实验组转入ShSmad3-1、ShSmad3-2序列,将不靶向任何基因的Sh-Scramble序列作为对照组(Scr)。将转入Smad3 guide RNA(gRNA)序列作为CRISPR/Cas9的实验组,转入空载质粒的作为CRISPR/Cas9的对照组。采用Western blot检测细胞中LC3、p62、p38以及p-p38蛋白变化情况,同时在敲减Smad3的胰腺癌细胞用PI-Annexin V试剂盒染色并进行流式分析。利用pLVX-Smad3质粒进行回补实验,并用p38抑制剂SB203580处理细胞检测相关蛋白的变化情况。结果GEPIA2数据库及临床标本分析结果显示,Smad3在胰腺癌组织中高表达(P<0.05)。在胰腺癌细胞BxPC-3中转入ShSmad3-1、ShSmad3-2后,Smad3的mRNA和蛋白水平均显著降低(P<0.05)。同时在Panc-1中转入Smad3 guide RNA筛选到2个Smad3敲除细胞系。与对照组相比,敲减Smad3胰腺癌细胞凋亡显著增加(P<0.05)。Western blot实验发现:Smad3敲减及敲除后,p-p38的蛋白水平显著增加(P<0.05),LC3、p62水平显著降低(P<0.05)。进一步通过回补实验及利用SB203580处理胰腺癌细胞,发现p62、LC3蛋白水平能回复(P<0.01)。结论干扰Smad3促进胰腺癌细胞过度自噬,进而导致细胞凋亡增加,可能与激活p38/MAPK信号通路有关。

NF-κb和PCNA在宫颈鳞癌及宫颈上皮内瘤变中的表达及临床意义

目的探讨分析核因子κB（nuclear factor-κB,NF-κB）和增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）在宫颈病变过程中的表达及临床特征。方法采用免疫组织化学SP法检测NF-κB和PCNA在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）（Ⅰ~Ⅲ）及宫颈鳞癌组织中的阳性表达率。结果 1 NF-κB在正常宫颈、CINⅠ、CINⅡ~Ⅲ、宫颈鳞癌组织中的阳性表达率分别为12.9%、35.0%、52.0%、78.8%;PCNA在正常宫颈、CINI、CINⅡ~Ⅲ及宫颈鳞癌组织中的阳性表达率分别为16.1%、50.0%、72.0%、90.9%;2 NF-κB和PCNA在宫颈鳞癌组织中的阳性表达率与临床分期、病理分级及淋巴结转移相关（P〈0.05）;与年龄无显著相关性（P〉0.05）;3 NF-κB与PCNA在宫颈鳞癌组织中的表达呈正相关（r=0.609,P〈0.05）。结论 NF-κB和PCNA可能参与宫颈病变过程,联合检测二者在宫颈组织中的表达情况,可作为宫颈疾病的鉴别、诊断及评估等辅助手段。

miR-18a对人滋养细胞中再生蛋白1表达的影响

目的观察子痫前期相关miR-18a对人正常滋养细胞中再生蛋白(Neogenin)表达的影响。方法在人正常滋养细胞(HTR8)中过表达与抑制miR-18a,共分三组:miR-18a过表达组(mimics组)、miR-18a抑制组(inhibitor组)、阴性对照组(NC组);实时定量PCR(RT-qPCR)检测转染后HTR8细胞中miR-18a的表达情况;RT-qPCR和Western-blot检测转染miR-18a前体分子后HTR8细胞中NEO1(Neogenin)mRNA及NEO1蛋白表达水平。结果与阴性对照组(0.61±0.07)相比,miR-18a过表达组mRNA水平增加(1.04±0.13),miR-18a抑制组降低(0.35±0.05),差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-18a抑制组HTR8细胞中NeogeninmRNA水平未见变化,Neogenin蛋白表达升高(P<0.05)。结论miR-18a在人正常滋养细胞中对Neogenin蛋白的表达具有负性调控影响作用,可能通过该途径影响滋养细胞凋亡能力。

基于卓越医生培养计划的妇产科学教学改革探讨

目的探讨卓越医生培养计划的妇产科学教学改革模式。方法采用病例对照研究方法,选取2016年9月～2017年7月我校卓越1301班(60名)为实验组,随机选取临床1382班(57名)为对照组。实验组采用器官系统整合+PBL教学模式;对照组采用传统教学模式。对两组的期末、毕业临床综合、实践考核成绩及评判性思维能力进行比较。结果实验组期末成绩主观题和总分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组的毕业临床综合成绩差异无统计学意义(P>0.05),实验组实践考核成绩和总分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组评判性思维比较结果显示在求知欲、分析能力、开放思想、评判性思维自信心方面实验组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论基于"卓越医生培养计划"的妇产科学教学改革取得了一定的成效,然而地方医学院校五年制卓越医生培养是一项长期而艰巨的任务,尚需要在今后的教学工作中及时总结并进一步改进,深入探索新的改革经验。

miR-30a-3p在复发性流产绒毛组织中的表达及对滋养细胞功能的影响

目的 观察miR-30a-3p在复发性流产患者绒毛组织中的表达,及其对滋养细胞(HTR-8)凋亡、迁移功能的影响。方法 采用qRT-PCR检测复发性流产患者(RSA组)及正常早孕妊娠(正常组)要求终止的患者各20例绒毛组织中miR-30a-3p的表达水平。在HTR-8细胞中转染miR-30a-3p前体分子,共分3组:miR-30a-3p模拟物组(mimic组)、miR-30a-3p抑制物组(inhibitor组)和阴性对照组(NC组)。流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell试验检测细胞侵袭能力。结果 qRT-PCR结果显示,与正常组相比,RSA组绒毛组织中miR-30a-3p表达量显著降低(P<0.05)。与NC组相比,mimic组HTR-8细胞中miR-30a-3p表达升高,inhibitor组miR-30a-3p表达水平降低(P<0.05)。流式细胞结果显示,与NC组相比,inhibitor组细胞凋亡率显著增加(P<0.05)。Transwell结果显示,与NC组相比,inhibitor组迁移能力显著降低(P<0.05)。结论 复发性流产绒毛组织中低表达的miR-30a-3p可能导致滋养细胞凋亡增加,迁移力降低,从而导致复发性流产的发生。

lncRNA-SNHG12在重度子痫前期患者胎盘组织中的表达及其对滋养细胞增殖的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)小核仁RNA宿主基因12(SNHG12)在重度子痫前期患者胎盘组织中的表达及其对滋养细胞(HTR8/SVneo)增殖的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测25例正常产妇(正常组)及25例重度子痫前期患者(sPE组)胎盘组织中lncRNA-SNHG12的表达。将HTR8/SVneo细胞分为3组:过表达组、抑制组和对照组,分别转染pcDNA3.1-SNHG12、siRNA-SNHG12和空质粒。qRT-PCR法检测转染后24 h各组lncRNA-SNHG12、miRNA-30a-3p及其靶基因DNA甲基转移酶3a(DNMT3a)mRNA的表达,蛋白免疫印迹(Western blot)检测DNMT3a蛋白水平的表达。CCK-8法检测转染后24,48,72 h细胞的增殖情况。结果qRT-PCR结果显示,与正常组比较,sPE组胎盘组织中lncRNA-SNHG12的表达量显著降低(P<0.001)。与对照组相比,过表达组lncRNA-SNHG12表达升高,miR-30a-3p的表达降低(P<0.001);抑制组lncRNA-SNHG12表达降低,miR-30a-3p表达增加(P<0.001)。与对照组比较,过表达组DNMT3a mRNA及蛋白水平表达均增加(P<0.001),抑制组DNMT3a mRNA及蛋白水平表达均降低(P<0.001)。CCK-8检测结果显示,与对照组相比较,抑制组24,48,72 h细胞增殖能力均显著降低(P<0.01),过表达组24,48,72 h细胞增殖能力均升高(24 h:P=0.062;48,72 h:P<0.01)。结论lncRNA-SNHG12与子痫前期发病相关,lncRNA-SNHG12可能通过影响miR-30a-3p/DNMT3a途径,调节滋养细胞增殖能力。